| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文縮略词简表 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 第一部分 神经干细胞的分离培养及鉴定 | 第14-21页 |
| 1.1 材料 | 第14-16页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第14页 |
| 1.1.2 主要仪器设备 | 第14页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第14-15页 |
| 1.1.4 主要试剂的配制 | 第15页 |
| 1.1.5 实验器材的预处理 | 第15-16页 |
| 1.2 方法 | 第16-18页 |
| 1.2.1 胎鼠NSCs的原代培养 | 第16页 |
| 1.2.2 NSCs的传代培养 | 第16-17页 |
| 1.2.3 NSCs体外诱导分化 | 第17页 |
| 1.2.4 间接免疫荧光法鉴定NSCs | 第17-18页 |
| 1.3 结果 | 第18-19页 |
| 1.3.1 原代NSCs生长情况 | 第18页 |
| 1.3.2 NSCs体外诱导分化 | 第18-19页 |
| 1.3.3 间接免疫荧光法鉴定NSCs | 第19页 |
| 1.4 讨论 | 第19-20页 |
| 1.4.1 神经干细胞分离培养的条件及生长情况 | 第19页 |
| 1.4.2 神经细胞的鉴定 | 第19-20页 |
| 1.5 小结 | 第20-21页 |
| 第二部分 HRE调控VEGF表达转染NSCs的实验研究 | 第21-36页 |
| 2.1 材料 | 第22-25页 |
| 2.1.1 细胞 | 第22页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第22页 |
| 2.1.3 主要试剂及耗材 | 第22页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制 | 第22-25页 |
| 2.2 方法 | 第25-31页 |
| 2.2.1 pGC-FU-VEGF165重组慢病毒、HRE-pGC-FU-VEGF165重组慢病毒构建 | 第25页 |
| 2.2.2 慢病毒感染目的细胞 | 第25-26页 |
| 2.2.3 流式细胞仪检测转染效率 | 第26-27页 |
| 2.2.4 PCR检测VEGFmRNA含量 | 第27-29页 |
| 2.2.5 Western-Blot检测转基因大鼠神经干细胞体外VEGF165蛋白表达 | 第29-30页 |
| 2.2.6 ELISA检测基因工程神经干细胞分泌型VEGF蛋白表达 | 第30页 |
| 2.2.7 MTT检测基因工程神经干细胞增殖 | 第30-31页 |
| 2.3 统计学方法 | 第31页 |
| 2.4 结果 | 第31-33页 |
| 2.4.1 pGC-FU-VEGF 165重组慢病毒、HRE-pGC-FU-VEGF 165重组慢病毒质粒鉴定 | 第31页 |
| 2.4.2 荧光显微镜观察转染后的神经干细胞 | 第31页 |
| 2.4.3 流式细胞仪检测转染率 | 第31页 |
| 2.4.4 RT-PCR检测各组目的基因VEGF165在NSCs细胞中的表达 | 第31-32页 |
| 2.4.5 Western blot检测VEGF165蛋白在NSCs细胞中的表达水平 | 第32页 |
| 2.4.6 ELISA检测各组转基因神经干细胞分泌型VEGF蛋白表达 | 第32页 |
| 2.4.7 MTT法检测基因修饰的NSCs增殖活性 | 第32-33页 |
| 2.5 讨论 | 第33-34页 |
| 2.5.1 目的基因的选择 | 第33页 |
| 2.5.2 HRE启动子的选择及其对目的基因VEGF的调控作用 | 第33-34页 |
| 2.6 小结 | 第34-36页 |
| 结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-41页 |
| 附图 | 第41-51页 |
| 综述 | 第51-59页 |
| 参考文献 | 第56-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
