中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
缩略词(Abbreviations) | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-29页 |
1.1 植物中酪氨酸酶的研究进展 | 第9-20页 |
1.1.1 酪氨酸酶与推测的甜菜素合成代谢途径 | 第10-12页 |
1.1.2 酪氨酸酶的分离、鉴定及纯化 | 第12-13页 |
1.1.3 酪氨酸酶的理化性质 | 第13-15页 |
1.1.4 编码酪氨酸酶或PPO的基因 | 第15-18页 |
1.1.5 酪氨酸酶的亚细胞定位 | 第18页 |
1.1.6 酪氨酸酶研究面临的挑战 | 第18-20页 |
1.2 植物中PPO基因启动子的研究进展 | 第20-28页 |
1.2.1 启动子的基本结构 | 第20-21页 |
1.2.2 启动子的分类 | 第21-24页 |
1.2.3 启动子的研究方法 | 第24-27页 |
1.2.4 PPO基因的启动子 | 第27-28页 |
1.3 本研究的目的与意义 | 第28-29页 |
第二章 实验材料与方法 | 第29-46页 |
2.1 实验材料及实验设备 | 第29-30页 |
2.1.1 实验材料 | 第29页 |
2.1.2 实验试剂 | 第29页 |
2.1.3 实验仪器及设备 | 第29-30页 |
2.2 实验方法 | 第30-46页 |
2.2.1 常用培养基及溶液配制 | 第30-32页 |
2.2.2 植物培养条件 | 第32-33页 |
2.2.3 植物基因组及RNA的提取 | 第33-36页 |
2.2.4 质粒DNA的提取、大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第36-37页 |
2.2.5 质粒的酶切、目标DNA片段的回收与连接 | 第37-38页 |
2.2.6 农杆菌感受态细胞的制备、转化和质粒DNA的提取鉴定 | 第38-40页 |
2.2.7 转基因植物材料的获得 | 第40-42页 |
2.2.8 转基因材料的鉴定及表型观察 | 第42-46页 |
第三章 BvcTYR基因启动子的克隆与功能分析 | 第46-64页 |
3.1 红柄甜菜酪氨酸酶基因启动子的克隆与序列分析 | 第46-50页 |
3.2 BvcPPOP的5’端删除分析 | 第50-51页 |
3.3 BvcPPOP启动子系列表达载体的构建 | 第51-52页 |
3.4 转BvcPPOP拟南芥的PCR鉴定 | 第52-53页 |
3.5 BvcPPOP驱动GUS在营养生长时期的转基因拟南芥的叶柄和根中优势表达 | 第53-56页 |
3.6 BvcPPOP驱动的GUS基因表达与发育阶段相关 | 第56-57页 |
3.7 非生物胁迫可不同程度的影响BvcPPOP::GUS的表达 | 第57-59页 |
3.8 不同5’端短截版本BvcPPOP在转基因拟南芥中具有不同的表达模式和/或表达强度 | 第59-64页 |
第四章 BvcTYR在甜菜素合成中的功能初探 | 第64-76页 |
4.1 BvcCYP76AD1/BvcDODA1/AcDOD的克隆与序列分析及AmDOD的全基因合成 | 第64-67页 |
4.2 BvcCYP76AD1/BvcDODA1/AcDOD/AmDOD表达载体的构建 | 第67-70页 |
4.3 各构建在本生烟中的瞬时表达 | 第70-72页 |
4.4 BvcTYR和BvcDODA1双价基因在烟草中的稳定表达 | 第72-73页 |
4.5 转BvcTYR和BvcDODA1双价基因烟草叶片的酪氨酸酶羟基化酶活性检测. | 第73-76页 |
第五章 讨论与结论 | 第76-82页 |
5.1 讨论 | 第76-80页 |
5.1.1 BvcPPOP在拟南芥根和叶柄中优势表达 | 第76页 |
5.1.2 BvcPPOP在拟南芥的表达与发育阶段相关 | 第76-77页 |
5.1.3 BvcPPOP的表达受非生物胁迫的影响 | 第77页 |
5.1.4 BvcPPOP的5’端删除主要影响启动子的表达强度 | 第77页 |
5.1.5 BvcPPOP驱动GUS基因积累GUS表达产物的位置类似于甜菜素的积累位置 | 第77-78页 |
5.1.6 BvcTYR或(与)DOD的(共)表达产物能在体外催化酪氨酸和酪胺产生有色物质 | 第78-80页 |
5.2 结论 | 第80页 |
5.3 展望 | 第80-82页 |
参考文献 | 第82-102页 |
致谢 | 第102-103页 |
个人简历 | 第103页 |