| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 综述 | 第11-24页 |
| ·PRV 研究概况 | 第11-12页 |
| ·PRV 的流行病学 | 第11页 |
| ·PRV 的生物学特性 | 第11-12页 |
| ·PRV 基因组结构和功能 | 第12-15页 |
| ·PRV 基因组结构 | 第12页 |
| ·PRV 糖蛋白结构和功能 | 第12-15页 |
| ·细菌人工染色体 | 第15-21页 |
| ·细菌人工染色体研究进展 | 第15-17页 |
| ·细菌人工染色体技术在疱疹病毒基因功能研究上的应用 | 第17-19页 |
| ·细菌人工染色体的修饰技术 | 第19-21页 |
| ·PRV 疫苗研究进展 | 第21-23页 |
| ·PRV 传统疫苗 | 第21-22页 |
| ·PRV 基因缺失疫苗 | 第22-23页 |
| ·以PRV 为载体的重组疫苗 | 第23页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 PRV-ZJ 病毒转移载体的构建 | 第24-32页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·病毒、工程菌和细胞 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-28页 |
| ·PRV-ZJ 重组病毒转移载体同源臂的PCR 扩增 | 第25-27页 |
| ·pMD22-24 质粒的构建 | 第27页 |
| ·pHA2-gfp 质粒片段的制备及重组病毒转移质粒的构建 | 第27-28页 |
| ·pHA2 和 pMD22-24 的酶切及回收 | 第27页 |
| ·电转化感受态细胞的制备 | 第27页 |
| ·回收片段的连接与转化 | 第27-28页 |
| ·转化细菌的酶切鉴定 | 第28页 |
| ·结果 | 第28-30页 |
| ·pMD22 和pMD24 质粒鉴定 | 第28页 |
| ·pMD22-24 结果鉴定 | 第28-29页 |
| ·重组病毒转移载体鉴定 | 第29-30页 |
| ·讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 PRV-ZJ 株基因组克隆为感染性细菌人工染色体 | 第32-36页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·病毒、工程菌和细胞 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-33页 |
| ·转移载体pMD22-gfp-24-HA2 质粒的提取纯化及其线性化 | 第32-33页 |
| ·转染用PRV-ZJ 感染细胞总DNA 的制备 | 第33页 |
| ·转移载体质粒与PRV-ZJ-DNA 的共转染 | 第33页 |
| ·重组病毒PRV-ZJ-HA2 的初步筛选和纯化 | 第33页 |
| ·结果 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| ·PRV-ZJ 基因组的完整性对于启动病毒的感染至关重要 | 第34页 |
| ·转染方法对获得重组病毒的影响 | 第34页 |
| ·用gfp 作为重组病毒筛选标记的意义 | 第34-35页 |
| ·重组病毒转移载体质粒的纯度及其线性化是共转染成功的重要因素 | 第35-36页 |
| 第四章 PRV-ZJ 感染性BAC 的获得及重组病毒的拯救 | 第36-43页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·病毒、工程菌和细胞 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36-37页 |
| ·方法 | 第37-38页 |
| ·重组病毒环状 DNA 的提取 | 第37页 |
| ·环状 DNA 的电转化 | 第37页 |
| ·pPRV-ZJ 的筛选及鉴定 | 第37页 |
| ·重组病毒的拯救 | 第37页 |
| ·recPRV-ZJ、pPRV-ZJ 和 PRV-ZJ-HA2 酶切结果比较 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| ·适时提取病毒环化的基因组 DNA 是使重组病毒获得拯救的关键 | 第41页 |
| ·病毒环化基因组DNA 提取方法的优化 | 第41页 |
| ·电转化条件的优化 | 第41-43页 |
| 第五章 PRV-ZJ， PRV-ZJ-HA2，recPRV-ZJ 生长特性测定 | 第43-49页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·细胞和实验动物 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43页 |
| ·主要仪器 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第44-45页 |
| ·重组病毒 PRV-ZJ-HA2 与拯救的重组病毒 recPRV-ZJ 的噬斑大小比较 | 第44页 |
| ·PRV-ZJ, PRV-ZJ-HA2, recPRV-ZJ 体外增殖特性的比较 | 第44页 |
| ·PRV-ZJ,PRV-ZJ-HA2,recPRV-ZJ 在小鼠体内增殖特性的比较 | 第44-45页 |
| ·结果 | 第45-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 附录 | 第56-59页 |
| 缩略词 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 个人简介 | 第61页 |
