| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1 前言 | 第12页 |
| 2 肌肉形成概述 | 第12-17页 |
| 2.1 成肌细胞的来源及分化 | 第12-14页 |
| 2.2 成肌细胞的融合与迁移 | 第14-17页 |
| 2.3 肌肉相关遗传病 | 第17页 |
| 3 miRNA研究进展 | 第17-21页 |
| 3.1 miRNA及其作用方式 | 第17-18页 |
| 3.2 miRNA在肌肉中的研究进展 | 第18-19页 |
| 3.3 有关miRNA的最新发现 | 第19页 |
| 3.4 miR3405p研究进展 | 第19-21页 |
| 4 研究目的与意义 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-48页 |
| 1 材料 | 第22-27页 |
| 1.1 主要仪器与设备 | 第22-23页 |
| 1.2 主要试剂及试剂盒 | 第23-24页 |
| 1.3 常用化学试剂及其配制 | 第24-26页 |
| 1.4 载体、菌株和细胞系 | 第26页 |
| 1.5 主要分子生物学软件及数据库 | 第26-27页 |
| 2 方法 | 第27-48页 |
| 2.1 3'UTR的pmir GLO荧光报告载体的构建 | 第27-34页 |
| 2.2 突变型 3'UTR的pmirGLO荧光报告载体的构建 | 第34-36页 |
| 2.3 C2C12细胞培养和转染 | 第36-37页 |
| 2.4 荧光活性的检测 | 第37页 |
| 2.5 总RNA和蛋白质的提取 | 第37-39页 |
| 2.6 miR3405p的qRT-PCR分析 | 第39-41页 |
| 2.7 相关基因的qRT-PCR分析 | 第41-43页 |
| 2.8 Western Blot检测相关基因的蛋白 | 第43-44页 |
| 2.9 免疫荧光检测 | 第44-45页 |
| 2.10 xCELLigence系统细胞增殖实验 | 第45-46页 |
| 2.11 细胞迁移检测 | 第46-48页 |
| 第三章 结果 | 第48-63页 |
| 1 miR3405p对Bai3的影响 | 第48-56页 |
| 1.1 免疫荧光检测miR3405p对C2C12细胞融合的影响 | 第48-49页 |
| 1.2 miR3405p以及其靶基因的生物信息学分析 | 第49-51页 |
| 1.3 转染mimics或inhibitor后miR3405p的表达量变化 | 第51-52页 |
| 1.4 Bai33’UTR双荧光素酶报告载体的构建以及双荧光检测结果分析 | 第52-54页 |
| 1.5 荧光定量PCR检测miR3405p对Bai3的调控作用 | 第54-56页 |
| 1.6 Western Blot检测miR3405p对Bai3的影响 | 第56页 |
| 2 miR3405p对ROCK1的影响 | 第56-61页 |
| 2.1 miR3405p对C2C12细胞增殖的影响 | 第56-57页 |
| 2.2 miR3405p对C2C12细胞迁移的影响 | 第57-58页 |
| 2.3 ROCK13’UTR双荧光素酶报告检测结果分析 | 第58-59页 |
| 2.4 miR3405p对ROCK1基因表达的影响 | 第59-61页 |
| 3 miR3405p对DMD的影响 | 第61-63页 |
| 第四章 讨论 | 第63-66页 |
| 1 miR3405p对成肌细胞融合的影响以及对杜氏肌营养不良症的影响 | 第63-64页 |
| 2 miR3405p对ROCK1的抑制及其意义 | 第64-65页 |
| 2.1 miR3405p对ROCK1的抑制作用 | 第64页 |
| 2.2 miR3405p抑制ROCK1对成肌细胞增殖的调控机制 | 第64-65页 |
| 2.3 miR3405p抑制ROCK1对成肌细胞迁移的调控机制 | 第65页 |
| 3 总结 | 第65-66页 |
| 第五章 小结 | 第66-67页 |
| 1 论文试验总结 | 第66页 |
| 2 下一步工作计划 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 附录 | 第74-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
