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谷氧还蛋白GRX在番茄温度胁迫响应中的作用

致谢第5-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-9页
缩略词表第10-14页
1 引言第14-25页
    1.1 植物对温度逆境响应概述第14-16页
        1.1.1 温度逆境对植物的影响第14-15页
        1.1.2 植物应对温度胁迫的响应机制第15-16页
    1.2 油菜素内酯在植物逆境响应中的作用第16-18页
        1.2.1 BRs的生物学功能第17页
        1.2.2 BRs对植物体内氧化还原的调控第17-18页
    1.3 谷氧还蛋白(GRXs)概述第18-24页
        1.3.1 GRXs性质及分类第18-20页
        1.3.2 蛋白可逆化修饰和GRXs功能第20-21页
        1.3.3 GRXs的作用机制和对抗逆响应的研究进展第21-24页
    1.4 本文的研究目的和意义第24-25页
2 番茄谷氧还蛋白(GRXs)家族基因的全基因组分析第25-46页
    2.1 方法第26-29页
        2.1.1 番茄GRX基因的鉴定第26页
        2.1.2 番茄GRX基因的氨基酸序列比对和系统发育分析第26-27页
        2.1.3 番茄GRXs的蛋白结构分析第27页
        2.1.4 番茄GRXs基因染色体定位第27页
        2.1.5 植物材料培养第27页
        2.1.6 病毒诱导的基因沉默(VIGS)载体构建第27-28页
        2.1.7 荧光定量PCR分析第28-29页
        2.1.8 非生物胁迫处理第29页
    2.2 结果与分析第29-43页
        2.2.1 番茄谷氧还蛋白家族基因的鉴定第29-31页
        2.2.2 番茄谷氧还蛋白GRXs家族的系统进化树第31-32页
        2.2.3 番茄GRXs蛋白质序列分析第32-36页
        2.2.4 番茄GRXs染色体定位第36-37页
        2.2.5 番茄GRXs基因沉默植物表型差异分析第37-38页
        2.2.6 番茄GRXs基因沉默对PSⅡ量子效率、PSⅠ电子传递和光保护能力的影响第38-42页
        2.2.7 番茄GRXs基因沉默植株非生物抗性分析第42-43页
    2.3 讨论第43-46页
3 GRXs在番茄高温胁迫响应中的作用第46-62页
    3.1 材料与方法第47-51页
        3.1.1 番茄GRXs基因沉默植株筛选及实验设计第47页
        3.1.2 光合气体交换参数和叶绿素荧光测定第47-48页
        3.1.3 叶片相对电导率(REC)的测定第48页
        3.1.4 谷氧还蛋白GRX活性测定第48页
        3.1.5 Rubisco、Rubisco活化酶及FBPase活性的测定第48-49页
        3.1.6 可溶性/不可溶蛋白的分离和测定及Western杂交分析第49页
        3.1.7 O_2~(·-)和H_2O_2组织化学染色和H_2O_2含量的测定第49-50页
        3.1.8 抗氧化酶活性测定第50页
        3.1.9 谷胱甘肽及抗坏血酸含量的测定第50-51页
    3.2 结果与分析第51-59页
        3.2.0 SlGRX基因沉默增加番茄对高温胁迫的敏感性第51-53页
        3.2.1 高温处理和SlGRX基因沉默对植株生长和GRX蛋白活性的影响第53-54页
        3.2.2 高温处理对SlGRX基因沉默植株卡尔文循环关键基因表达及酶活的影响第54-55页
        3.2.3 SlGRX基因沉默对高温胁迫下可溶性蛋白氧化状态和HSP70蛋白的影响第55-57页
        3.2.4 SlGRX基因沉默对番茄高温胁迫下活性氧积累的影响第57页
        3.2.5 SlGRX基因沉默对番茄高温胁迫下酶类及非酶类抗氧化物质代谢和基因表达的的影响第57-59页
    3.3 讨论第59-62页
4 GRXs和RBOH在BRs调控番茄低温胁迫响应中的作用第62-80页
    4.1 材料与方法第63-65页
        4.1.1 材料培养和处理第63页
        4.1.2 叶绿素荧光测定第63-64页
        4.1.3 叶片相对电导率(REC)的测定第64页
        4.1.4 荧光定量PCR分析第64页
        4.1.5 抗氧化酶活性测定第64-65页
        4.1.6 谷胱甘肽及抗坏血酸含量的测定第65页
        4.1.7 非还原性SDS-PAGE及Western杂交分析第65页
    4.2 结果与分析第65-78页
        4.2.1 油菜素内酯增强番茄低温胁迫抗性第65-66页
        4.2.2 BR对番茄低温胁迫下酶类及非酶类抗氧化物质代谢的影响第66-69页
        4.2.3 BR对番茄低温胁迫下GRXs基因表达和2-CP蛋白氧化还原状态的影响第69-70页
        4.2.4 EBR处理对RBOH-RNAi植株低温抗性的影响第70-71页
        4.2.5 EBR处理对RBOH-RNAi植株低温胁迫下酶类及非酶类物质的代谢的影响第71-73页
        4.2.6 EBR处理对RBOH-RNAi植株低温胁迫下2-CP蛋白氧化还原状态及GRX基因表达的影响第73-74页
        4.2.7 EBR处理对GRXs基因沉默植株低温抗性的影响第74-76页
        4.2.8 EBR处理对GRXs基因沉默植株低温胁迫下酶类及非酶类抗氧化物质代谢的影响第76-78页
    4.3 讨论第78-80页
5 结论第80-82页
    1. 番茄GRXs蛋白家族包含44个成员,GRXs参与调控植株光合电子传递和氧化胁迫抗性第80页
    2. GRXs参与番茄高温胁迫响应作用第80-81页
    3. RBOH基因和GRXs在BRs调控植物低温抗性中的作用第81-82页
参考文献第82-91页
作者简历第91页

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