致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略词表 | 第10-14页 |
1 引言 | 第14-25页 |
1.1 植物对温度逆境响应概述 | 第14-16页 |
1.1.1 温度逆境对植物的影响 | 第14-15页 |
1.1.2 植物应对温度胁迫的响应机制 | 第15-16页 |
1.2 油菜素内酯在植物逆境响应中的作用 | 第16-18页 |
1.2.1 BRs的生物学功能 | 第17页 |
1.2.2 BRs对植物体内氧化还原的调控 | 第17-18页 |
1.3 谷氧还蛋白(GRXs)概述 | 第18-24页 |
1.3.1 GRXs性质及分类 | 第18-20页 |
1.3.2 蛋白可逆化修饰和GRXs功能 | 第20-21页 |
1.3.3 GRXs的作用机制和对抗逆响应的研究进展 | 第21-24页 |
1.4 本文的研究目的和意义 | 第24-25页 |
2 番茄谷氧还蛋白(GRXs)家族基因的全基因组分析 | 第25-46页 |
2.1 方法 | 第26-29页 |
2.1.1 番茄GRX基因的鉴定 | 第26页 |
2.1.2 番茄GRX基因的氨基酸序列比对和系统发育分析 | 第26-27页 |
2.1.3 番茄GRXs的蛋白结构分析 | 第27页 |
2.1.4 番茄GRXs基因染色体定位 | 第27页 |
2.1.5 植物材料培养 | 第27页 |
2.1.6 病毒诱导的基因沉默(VIGS)载体构建 | 第27-28页 |
2.1.7 荧光定量PCR分析 | 第28-29页 |
2.1.8 非生物胁迫处理 | 第29页 |
2.2 结果与分析 | 第29-43页 |
2.2.1 番茄谷氧还蛋白家族基因的鉴定 | 第29-31页 |
2.2.2 番茄谷氧还蛋白GRXs家族的系统进化树 | 第31-32页 |
2.2.3 番茄GRXs蛋白质序列分析 | 第32-36页 |
2.2.4 番茄GRXs染色体定位 | 第36-37页 |
2.2.5 番茄GRXs基因沉默植物表型差异分析 | 第37-38页 |
2.2.6 番茄GRXs基因沉默对PSⅡ量子效率、PSⅠ电子传递和光保护能力的影响 | 第38-42页 |
2.2.7 番茄GRXs基因沉默植株非生物抗性分析 | 第42-43页 |
2.3 讨论 | 第43-46页 |
3 GRXs在番茄高温胁迫响应中的作用 | 第46-62页 |
3.1 材料与方法 | 第47-51页 |
3.1.1 番茄GRXs基因沉默植株筛选及实验设计 | 第47页 |
3.1.2 光合气体交换参数和叶绿素荧光测定 | 第47-48页 |
3.1.3 叶片相对电导率(REC)的测定 | 第48页 |
3.1.4 谷氧还蛋白GRX活性测定 | 第48页 |
3.1.5 Rubisco、Rubisco活化酶及FBPase活性的测定 | 第48-49页 |
3.1.6 可溶性/不可溶蛋白的分离和测定及Western杂交分析 | 第49页 |
3.1.7 O_2~(·-)和H_2O_2组织化学染色和H_2O_2含量的测定 | 第49-50页 |
3.1.8 抗氧化酶活性测定 | 第50页 |
3.1.9 谷胱甘肽及抗坏血酸含量的测定 | 第50-51页 |
3.2 结果与分析 | 第51-59页 |
3.2.0 SlGRX基因沉默增加番茄对高温胁迫的敏感性 | 第51-53页 |
3.2.1 高温处理和SlGRX基因沉默对植株生长和GRX蛋白活性的影响 | 第53-54页 |
3.2.2 高温处理对SlGRX基因沉默植株卡尔文循环关键基因表达及酶活的影响 | 第54-55页 |
3.2.3 SlGRX基因沉默对高温胁迫下可溶性蛋白氧化状态和HSP70蛋白的影响 | 第55-57页 |
3.2.4 SlGRX基因沉默对番茄高温胁迫下活性氧积累的影响 | 第57页 |
3.2.5 SlGRX基因沉默对番茄高温胁迫下酶类及非酶类抗氧化物质代谢和基因表达的的影响 | 第57-59页 |
3.3 讨论 | 第59-62页 |
4 GRXs和RBOH在BRs调控番茄低温胁迫响应中的作用 | 第62-80页 |
4.1 材料与方法 | 第63-65页 |
4.1.1 材料培养和处理 | 第63页 |
4.1.2 叶绿素荧光测定 | 第63-64页 |
4.1.3 叶片相对电导率(REC)的测定 | 第64页 |
4.1.4 荧光定量PCR分析 | 第64页 |
4.1.5 抗氧化酶活性测定 | 第64-65页 |
4.1.6 谷胱甘肽及抗坏血酸含量的测定 | 第65页 |
4.1.7 非还原性SDS-PAGE及Western杂交分析 | 第65页 |
4.2 结果与分析 | 第65-78页 |
4.2.1 油菜素内酯增强番茄低温胁迫抗性 | 第65-66页 |
4.2.2 BR对番茄低温胁迫下酶类及非酶类抗氧化物质代谢的影响 | 第66-69页 |
4.2.3 BR对番茄低温胁迫下GRXs基因表达和2-CP蛋白氧化还原状态的影响 | 第69-70页 |
4.2.4 EBR处理对RBOH-RNAi植株低温抗性的影响 | 第70-71页 |
4.2.5 EBR处理对RBOH-RNAi植株低温胁迫下酶类及非酶类物质的代谢的影响 | 第71-73页 |
4.2.6 EBR处理对RBOH-RNAi植株低温胁迫下2-CP蛋白氧化还原状态及GRX基因表达的影响 | 第73-74页 |
4.2.7 EBR处理对GRXs基因沉默植株低温抗性的影响 | 第74-76页 |
4.2.8 EBR处理对GRXs基因沉默植株低温胁迫下酶类及非酶类抗氧化物质代谢的影响 | 第76-78页 |
4.3 讨论 | 第78-80页 |
5 结论 | 第80-82页 |
1. 番茄GRXs蛋白家族包含44个成员,GRXs参与调控植株光合电子传递和氧化胁迫抗性 | 第80页 |
2. GRXs参与番茄高温胁迫响应作用 | 第80-81页 |
3. RBOH基因和GRXs在BRs调控植物低温抗性中的作用 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-91页 |
作者简历 | 第91页 |