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人参皂苷Ⅰ型酶酶反应动力学研究

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第一章 文献综述第10-23页
    1.1 人参概述第10-11页
        1.1.1 人参的种类第10页
        1.1.2 人参的生长环境和植物形态第10-11页
        1.1.3 人参的化学成分第11页
    1.2 人参皂苷概述第11-17页
        1.2.1 人参皂苷的分类第11-12页
        1.2.2 人参皂苷的结构第12-15页
        1.2.3 人参皂苷的理化性质第15页
        1.2.4 人参皂苷的生理活性第15页
        1.2.5 稀有人参皂苷C-K第15-17页
            1.2.5.1 稀有人参皂苷C-K的结构第15-16页
            1.2.5.2 稀有人参皂苷C-K的药理第16-17页
    1.3 人参皂苷的分离、提纯与分析的方法第17-19页
        1.3.1 AB-8大孔吸附树脂第18页
        1.3.2 硅胶柱层析第18页
        1.3.3 结晶第18页
        1.3.4 薄层层析(TLC)第18页
        1.3.5 高效液相色谱(HPLC)第18-19页
    1.4 人参皂苷的生物转化第19-22页
    1.5 本论文主要研究内容与意义第22-23页
第二章 材料与方法第23-32页
    2.1 实验材料第23页
        2.1.1 主要实验设备第23页
        2.1.2 材料与试剂第23页
    2.2 实验方法第23-32页
        2.2.1 人参皂苷检测方法第23-24页
            2.2.1.1 薄层层析法(TLC)第23-24页
            2.2.1.2 高效液相色谱检测皂苷第24页
        2.2.2 酶反应底物的制备第24-25页
            2.2.2.1 大孔吸附树脂法分离人参总皂苷第24-25页
            2.2.2.2 硅胶柱分离人参二醇类皂苷第25页
        2.2.3 人参皂苷糖苷酶Ⅰ型酶的纯化第25-28页
            2.2.3.1 培养基第25页
            2.2.3.2 菌体培养第25页
            2.2.3.3 酶的提取第25-26页
            2.2.3.4 酶的纯化第26页
            2.2.3.5 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定分子量第26-28页
        2.2.4 酶反应动力学第28-30页
            2.2.4.1 底物的配置第28页
            2.2.4.2 底物的酶解反应第28-29页
            2.2.4.3 酶催化底物反应转化率的测定第29页
            2.2.4.4 米氏方程的计算第29页
            2.2.4.5 人参皂苷Ⅰ型酶酶解人参皂苷单体的反应第29-30页
        2.2.5 酶转化PPD大量制备人参皂苷C-K第30-32页
            2.2.5.1 大批量酶反应第30页
            2.2.5.2 AB-8大孔吸附树脂处理酶解产物第30页
            2.2.5.3 硅胶柱层析法分离F2、C-K第30-31页
            2.2.5.4 结晶精制人参皂苷C-K第31-32页
第三章 结果与讨论第32-79页
    3.1 酶反应底物的制备第32-35页
        3.1.1 AB-8大孔吸附树脂分离人参总皂苷第32-33页
        3.1.2 硅胶柱分离制备人参皂苷Rb1、Rc、Rd第33-35页
    3.2 酶的纯化及蛋白分子量的确定第35-42页
        3.2.2 HPLC法验证酶纯度及其分子量第39-42页
    3.3 人参皂苷Ⅰ型酶的酶反应动力学第42-71页
        3.3.1 以Rb1为底物的酶反应动力学研究第42-47页
        3.3.2 以Rc为底物的酶反应动力学研究第47-52页
        3.3.3 以Rd为底物的酶反应动力学研究第52-58页
        3.3.4 以F2为底物的酶反应动力学研究第58-62页
        3.3.5 以Rg3为底物的酶反应动力学研究第62-67页
        3.3.6 人参皂苷Ⅰ型酶酶反应动力学研究小结第67-68页
        3.3.7 人参皂苷Ⅰ型酶对不同底物酶活力的定性分析第68-71页
    3.4 酶转化PPD大量制备人参皂苷C-K第71-79页
        3.4.1 酶法大批量转化稀有人参皂苷第71-73页
        3.4.2 AB-8大孔吸附树脂初步分离纯化酶解产物C-K第73-74页
        3.4.3 硅胶柱层析法提纯C-K第74-77页
        3.4.4 人参皂苷C-K的精制第77-79页
第四章 结论第79-80页
参考文献第80-83页
致谢第83页

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