摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩略词表 | 第12-13页 |
前言 | 第13-17页 |
第一部分 生物信息学分析—对IL-10 启动子进行分析 | 第17-23页 |
1 实验材料 | 第17页 |
2 实验方法 | 第17页 |
3 实验结果 | 第17-21页 |
3.1 用于预测转录因子结合位点的小鼠IL-10 启动子序列 | 第17-18页 |
3.2 预测PAX5, Bc l6 and Prdm1在IL-10 启动子上的结合位点 | 第18-19页 |
3.3 预测Foxd3在IL-10 启动子上的结合位点 | 第19-21页 |
4 讨论 | 第21-23页 |
第二部分 鉴定FOXD3与IL-10 启动子的关系 | 第23-37页 |
1 实验材料 | 第23-24页 |
1.1 实验动物和细胞系 | 第23页 |
1.2 质粒和感受态 | 第23页 |
1.3 试剂与耗材 | 第23-24页 |
1.4 实验仪器 | 第24页 |
2 实验方法 | 第24-31页 |
2.1 小鼠调节性B细胞的获取 | 第24-25页 |
2.2 染色质免疫共沉淀-PCR | 第25-29页 |
2.3 Foxd3与IL-10 启动子结合报告基因检测 | 第29-30页 |
2.4 IL-10 启动子截断体构建 | 第30页 |
2.5 Foxd3截断体构建 | 第30-31页 |
2.6 数据统计学处理 | 第31页 |
3 实验结果 | 第31-34页 |
3.1 Foxd3直接结合IL-10 启动子 | 第31-32页 |
3.2 报告系统分析Foxd3对IL-10 启动子的影响 | 第32-34页 |
4 讨论 | 第34-37页 |
第三部分 FOXD3对调节性B细胞的产生及IL-10 表达的影响 | 第37-47页 |
1 实验材料 | 第37-38页 |
1.1 实验动物 | 第37页 |
1.2 质粒 | 第37页 |
1.3 试剂与耗材 | 第37-38页 |
1.4 实验仪器 | 第38页 |
2 实验方法 | 第38-42页 |
2.1 小鼠调节性B细胞的获取 | 第38页 |
2.2 细胞流式技术 | 第38-39页 |
2.3 Quantitative Real-Time PCR | 第39-40页 |
2.4 Western blot | 第40-41页 |
2.5 ELISA检测 | 第41-42页 |
2.6 慢病毒感染原代细胞 | 第42页 |
2.7 数据统计学处理 | 第42页 |
3 实验结果 | 第42-44页 |
3.1 LPS活化的B细胞中Foxd3的表达情况 | 第42-43页 |
3.2 敲低Foxd3对调节性B细胞分泌IL-10 的影响 | 第43-44页 |
4 讨论 | 第44-47页 |
第四部分 FOXD3及调节性B细胞在自身免疫病中的意义 | 第47-53页 |
1 实验材料 | 第47-48页 |
1.1 实验动物 | 第47-48页 |
1.2 试剂与耗材 | 第48页 |
1.3 实验仪器 | 第48页 |
1.4 试剂的配制 | 第48页 |
2 实验方法 | 第48页 |
2.1 数据统计学处理 | 第48页 |
3 实验结果 | 第48-50页 |
3.1 MRL/lpr模型鼠发病症状 | 第48-49页 |
3.2 系统性红斑狼疮小鼠中Foxd3表达量与IL-10~+的调节性B细胞百分比呈反比 | 第49-50页 |
4 讨论 | 第50-53页 |
结论 | 第53-55页 |
创新与展望 | 第55-57页 |
1 创新 | 第55页 |
2 展望 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
致谢 | 第61-63页 |
攻读学位期间发表的论文目录 | 第63-64页 |