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鲫鱼乙酰胆碱酯酶提取、纯化及对有机磷农药的敏感性研究

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-11页
第一章 前言第13-23页
    1 我国有机磷农药的使用情况第13-14页
    2 有机磷农药的残留及危害第14-17页
        2.1 有机磷农药在蔬菜中的残留第14-15页
        2.2 有机磷农药在水体中的残留第15-16页
        2.3 有机磷农药的危害第16-17页
            2.3.1 对神经系统的影响第16页
            2.3.2 致癌作用第16-17页
            2.3.3 引起出生缺陷第17页
            2.3.4 对生殖毒性的影响第17页
    3 有机磷农药残留的检测第17-20页
        3.1 薄层色谱法(TLC)第18页
        3.2 气相色谱法(GC)第18页
        3.3 气相色谱—质谱联用技术(GC-MS)第18-19页
        3.4 高效液相色谱法(HPLC)第19页
        3.5 其它检测方法第19-20页
    4 有机磷农药残留的快速检测—酶抑制法第20-22页
        4.1 方法原理第21页
        4.2 酶源第21页
        4.3 配套检测技术第21-22页
            4.3.1 比色法第21-22页
            4.3.2 酶片技术第22页
            4.3.3 生物传感器第22页
            4.3.4 固相酶速测技术第22页
    5 本课题研究的内容、目的及意义第22-23页
第二章 鲫鱼乙酰胆碱酯酶的提取条件及酶活测定条件的优化研究第23-35页
    引言第23页
    1 材料与方法第23-26页
        1.1 实验材料第23页
        1.2 仪器与试剂第23-24页
            1.2.1 主要试剂第23-24页
            1.2.2 主要仪器设备第24页
        1.3 实验方法第24-26页
            1.3.1 鲫鱼脑、肌肉和肝脏中乙酰胆碱酯酶的提取第24页
            1.3.2 蛋白含量测定第24-25页
            1.3.3 酶活测定第25-26页
            1.3.4 酶液提取正交实验的设计第26页
            1.3.5 酶活测定中心组合实验的设计第26页
    2 结果与分析第26-33页
        2.1 酶液提取正交实验结果第26-28页
        2.2 酶活测定中心组合实验结果第28-33页
            2.2.1 单因素实验结果第28-30页
            2.2.2 中心组合实验结果第30-33页
    3 结论与讨论第33-35页
第三章 鲫鱼乙酰胆碱酯酶的性质研究第35-42页
    引言第35-36页
    1 材料与方法第36-37页
        1.1 主要试剂第36页
        1.2 主要仪器设备第36页
        1.3 实验方法第36-37页
            1.3.1 最适反应温度的测定第36页
            1.3.2 最适pH值的测定第36页
            1.3.3 米氏常数和最大反应速率的测定第36-37页
    2 结果与分析第37-41页
        2.1 AChE的最适反应温度第37页
        2.2 AChE的最适pH值第37-38页
        2.3 AChE的米氏常数和最大反应速率第38-41页
            2.3.1 鱼脑米氏常数和最大反应速率结果第38-39页
            2.3.2 肌肉米氏常数和最大反应速率结果第39-40页
            2.3.3 肝脏米氏常数和最大反应速率结果第40-41页
    3 结论与讨论第41-42页
第四章 鲫鱼乙酰胆碱酯酶对有机磷农药的敏感性研究第42-50页
    引言第42页
    1 材料与方法第42-44页
        1.1 主要试剂第42页
        1.2 主要仪器设备第42-43页
        1.3 实验方法第43-44页
            1.3.1 抑制动力学曲线的绘制第43页
            1.3.2 半数抑制浓度的测定第43页
            1.3.3 双分子速率常数的测定第43-44页
    2 结果与分析第44-49页
        2.1 有机磷农药对AChE的抑制动力学曲线第44-46页
            2.1.1 有机磷农药对鲫鱼脑AChE的抑制动力学曲线第44-45页
            2.1.2 有机磷农药对鲫鱼肌肉AChE的抑制动力学曲线第45页
            2.1.3 有机磷农药对鲫鱼肝脏AChE的抑制动力学曲线第45-46页
        2.2 有机磷农药对AChE的半数抑制浓度第46-48页
        2.3 有机磷农药对AChE的双分子速率常数第48-49页
    3 结论与讨论第49-50页
第五章 鲫鱼脑乙酰胆碱酯酶的纯化研究第50-57页
    引言第50页
    1 材料与方法第50-52页
        1.1 主要试剂第50-51页
        1.2 主要仪器设备第51页
        1.3 实验方法第51-52页
            1.3.1 双水相萃取第51页
            1.3.2 DEAE-Sephadex A-50离子交换层析第51页
            1.3.3 Sephadex G-200凝胶过滤层析第51-52页
    2 结果与分析第52-56页
        2.1 PEG用量及类型选择结果第52-53页
        2.2 离子交换层析结果第53-54页
        2.3 凝胶过滤层析结果第54-56页
    3 结论与讨论第56-57页
第六章 酶抑制法测定蔬菜中有机磷农药残留第57-62页
    引言第57页
    1 材料与方法第57-58页
        1.1 实验材料第57页
        1.2 实验方法第57-58页
            1.2.1 样品准备第57页
            1.2.2 酶活和抑制率计算第57页
            1.2.3 回收率计算第57-58页
    2 结果与分析第58-61页
        2.1 空白蔬菜样品农药残留检测结果第58页
        2.2 加农药蔬菜样品残留检测结果第58-61页
    3 结论与讨论第61-62页
参考文献第62-67页
致谢第67-68页
攻读硕士学位期间成果目录第68页

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