| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 缩略词 | 第11-12页 |
| 1 绪论 | 第12-22页 |
| 1.1 引言 | 第12-13页 |
| 1.2 国内外研究进展 | 第13-20页 |
| 1.2.1 莱氏野村菌的概况 | 第13页 |
| 1.2.2 莱氏野村菌的生长、发育条件 | 第13-14页 |
| 1.2.3 莱氏野村菌的致病性及侵染机理 | 第14-15页 |
| 1.2.4 丝状真菌菌核的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.2.5 菌核的氧胁迫诱导机制 | 第17-18页 |
| 1.2.6 NADH 氧化酶的研究进展 | 第18-20页 |
| 1.3 研究目的、内容及技术路线 | 第20-21页 |
| 1.3.1 研究目的 | 第20页 |
| 1.3.2 研究内容 | 第20-21页 |
| 1.3.3 技术路线 | 第21页 |
| 1.4 本研究的创新点 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-40页 |
| 2.1 试验材料及主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.1 供试菌株 | 第22页 |
| 2.1.2 主要试剂和试剂盒 | 第22页 |
| 2.1.3 主要培养基 | 第22-23页 |
| 2.1.4 主要仪器设备及厂家 | 第23页 |
| 2.1.5 使用的主要生物学软件 | 第23页 |
| 2.2 试验方法 | 第23-40页 |
| 2.2.1 活化菌种 | 第23-24页 |
| 2.2.2 孢悬液的配制及微菌核的诱导培养 | 第24页 |
| 2.2.3 外源氧化剂和抗氧化剂的诱导处理 | 第24页 |
| 2.2.4 微菌核产量及菌体总生物量的测定 | 第24-25页 |
| 2.2.5 微菌核各生长期胞内过氧化氢含量的测定 | 第25-26页 |
| 2.2.6 微菌核总 RNA 的提取 | 第26页 |
| 2.2.7 莱氏野村菌基因组 DNA 的提取 | 第26-27页 |
| 2.2.8 PCR 产物的连接、转化及测序 | 第27-28页 |
| 2.2.9 RACE 扩增 Nox 基因全长 cDNA 序列 | 第28-33页 |
| 2.2.10 Nox 的生物信息学分析 | 第33-34页 |
| 2.2.11 实时荧光定量分析 Nox 的表达特性 | 第34-35页 |
| 2.2.12 鱼藤酮抑制剂处理 | 第35-36页 |
| 2.2.13 Nox 的 RNA 干扰 | 第36-39页 |
| 2.2.14 RNA 干扰效率检测 | 第39页 |
| 2.2.15 过氧化氢含量测定 | 第39页 |
| 2.2.16 毒力测定 | 第39-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-59页 |
| 3.1 微菌核与氧胁迫的关系 | 第40-43页 |
| 3.1.1 氧化剂促进微菌核分化 | 第40-42页 |
| 3.1.2 抗氧化剂抑制微菌核分化 | 第42-43页 |
| 3.2 微菌核的发育与过氧化氢有关 | 第43-45页 |
| 3.3 3 ′–，5′–RACE 克隆 Nox 全长 cDNA 序列 | 第45-52页 |
| 3.3.1 RACE 扩增 Nox 的 3′–，5′–末端序列 | 第45-46页 |
| 3.3.2 Nox 基因的测通验证及基因组结构 | 第46-47页 |
| 3.3.3 Nox 基因编码氨基酸序列的特性 | 第47-50页 |
| 3.3.4 Nox 蛋白的同源比对及进化分析 | 第50-52页 |
| 3.4 莱氏野村菌 Nox 在微菌核发育中的表达特性 | 第52-54页 |
| 3.5 鱼藤酮对 Nox 基因及微菌核发育的影响 | 第54-56页 |
| 3.5.1 鱼藤酮抑制微菌核的形成 | 第54-55页 |
| 3.5.2 鱼藤酮抑制 Nox 基因的表达 | 第55-56页 |
| 3.6 RNA 干扰 Nox 基因的表达 | 第56-59页 |
| 3.6.1 RT–qPCR 定量检测 RNA 干扰效率 | 第56页 |
| 3.6.2 生物统计分析 RNA 干扰效果 | 第56-57页 |
| 3.6.3 Nox 基因影响过氧化氢的产生 | 第57-58页 |
| 3.6.4 Nox 基因影响莱氏野村菌的毒力 | 第58-59页 |
| 4 讨论 | 第59-62页 |
| 4.1 ROS 促进微菌核的分化 | 第59页 |
| 4.2 Nox 影响微菌核的发育 | 第59-61页 |
| 4.3 Nox 影响微菌核的毒力 | 第61-62页 |
| 5 主要结论与展望 | 第62-64页 |
| 5.1 主要研究结论 | 第62-63页 |
| 5.2 后续工作建议 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 附录 | 第72-73页 |
| A 作者硕士学习期间发表论文目录 | 第72页 |
| B Nox 全长 cDNA 序列 | 第72-73页 |
