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MEF2A基因原核表达系统构建及黄牛MEF2A、DLK1和CLPG基因遗传分析

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-14页
文献综述第14-25页
 第一章 分子标记研究进展第14-17页
   ·DNA 直接测序第14-15页
   ·单链构象多态性第15页
   ·变性高压液相色谱检测第15页
   ·温度梯度凝胶电泳第15页
   ·DNA 芯片第15-16页
   ·全基因组关联分析第16-17页
 第二章 本研究候选基因研究进展第17-25页
   ·骨骼肌的形成和分化及信号调控第17-19页
   ·MEF2A 基因研究进展第19-21页
     ·MEF2 基因的结构第19-20页
     ·MEF2 基因的功能第20-21页
     ·MEF2 基因与bHLH 家族之间相互关系第21页
   ·DLK1 的研究进展第21-22页
     ·DLK1 基因结构第21-22页
     ·DLK1 基因的功能第22页
   ·CLPG 基因的研究进展第22-23页
   ·CLPG 基因和DLK1 之间互作关系的研究进展第23页
   ·本研究的目的意义第23-25页
试验研究第25-83页
 第三章 MEF2A 基因的克隆、原核表达及生物信息学分析第25-43页
   ·试验材料第25页
     ·材料第25页
     ·主要溶液与缓冲液第25页
   ·试验方法第25-29页
     ·DNA 和RNA 的提取第25-26页
     ·引物的设计与合成第26页
     ·退火温度的筛选第26页
     ·第一链的合成第26-27页
     ·扩增MEF2A 基因第27页
     ·目的基因的纯化第27页
     ·pGM-T 连接第27-28页
     ·目的基因的原核表达第28-29页
   ·结果第29-40页
     ·RNA 提取和目的基因克隆第29页
     ·目的片段与表达载体pET-32a 连接第29-30页
     ·诱导表达第30页
     ·MEF2A 基因3'UTR 扩增第30页
     ·MEF2A 基因DNA 序列和推测的蛋白第30-34页
     ·MEF2A 基因的密码子偏好性分析第34-38页
     ·MEF2A 蛋白结构特征分析与结构预测第38-40页
   ·讨论第40-42页
   ·本章小结第42-43页
 第四章 MEF2A 基因遗传多态性及其与生长发育的相关性第43-64页
   ·实验材料和方法第43-44页
     ·实验动物第43-44页
     ·实验试剂第44页
     ·主要溶液及缓冲液及主要仪器设备第44页
     ·实验方法第44页
     ·资料的统计分析方法第44页
   ·结果与分析第44-60页
       ·D NA 池PCR 扩增第44-47页
     ·MEF2A 基因Forced-PCR-RFLP 引物设计第47-48页
     ·MEF2A 遗传变异检测第48-49页
     ·MEF2A 遗传遗传结构分析第49-53页
     ·MEF2A 基因多态性与发育性状之间的相关分析第53-54页
     ·MEF2A 与MRFs 基因家族互作分析第54-59页
     ·基因间连锁不平衡分析第59-60页
   ·讨论第60-63页
     ·中国地方黄牛MEF2A 遗传变异位点分析第60-61页
     ·不同黄牛群体MEF2A 基因多态与群体遗传结构分析第61页
     ·MEF2A 基因的多态性与体尺指标的关系第61-62页
     ·MEF2A 基因11 外显子独特复杂的结构第62页
     ·MEF2A 基因与MRFs 基因家族部分基因之间互作分析第62-63页
   ·小结第63-64页
 第五章 DLK1 基因遗传多态性与生长发育的相关性第64-76页
   ·实验材料和方法第64-65页
     ·实验材料和方法第64页
     ·PCR 引物第64-65页
   ·结果与分析第65-74页
       ·P CR 扩增及电泳检测第65-66页
     ·PCR 产物的SSCP 分析第66-68页
     ·遗传多态性指标第68-69页
     ·DLK1 基因不同SNPs 与表型间相关分析第69-72页
     ·DLK1 基因与MRFs 家族不同位点之间的相互作用第72页
     ·不同群体间的遗传差异及聚类分析第72页
     ·蛋白结构预测第72-74页
   ·讨论第74-75页
   ·小结第75-76页
 第六章 CLPG 遗传多态性及其与生长发育之间的相关分析第76-82页
   ·实验材料和试验方法第76页
   ·结果与分析第76-79页
     ·PCR 产物的检测第76页
     ·遗传多态性指标第76-77页
     ·不同品种/种CLPG 测序结果比较第77-78页
     ·CLPG 突变与表型间相关性分析第78页
     ·CLPG 基因和 DLK1 基因间连锁不平衡分析第78-79页
     ·CLPG 基因和 DLK1 基因间互作分析第79页
   ·讨论第79-80页
     ·秦川牛CLPG 基因多态性及与体尺指标的关系第79-80页
     ·CLPG 群体遗传学分析第80页
     ·CLPG 基因和DLK1 基因间连锁不平衡分析及互作分析第80页
   ·小结第80-82页
 第七章 结论与创新点第82-83页
   ·结论第82页
   ·创新点第82-83页
参考文献第83-93页
附录第93-108页
致谢第108-109页
作者简介第109页

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