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斑马鱼Somatostatin-3基因敲降胚胎的营救及功能验证

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
第一章 文献综述第11-21页
    1.1 模式生物斑马鱼第11-13页
        1.1.1 斑马鱼作为模式生物的优势第11-12页
        1.1.2 斑马鱼模式生物的应用第12-13页
    1.2 生长抑素研究进展第13-18页
        1.2.1 生长抑素的前体加工第14-15页
        1.2.2 生长抑素的组织表达第15页
        1.2.3 生长抑素生理机能第15-17页
        1.2.4 生长抑素分泌的调节第17页
        1.2.5 生长抑素家族新成员第17-18页
    1.3 生长抑素受体研究进展第18-21页
        1.3.1 生长抑素受体基因调控第18页
        1.3.2 生长抑素受体信号第18-21页
第二章 引言第21-23页
    2.1 研究目的和意义第21-22页
    2.2 研究范围和内容第22页
    2.3 研究技术路线第22-23页
第三章 实验材料与方法第23-45页
    3.1 材料与试剂第23-28页
        3.1.1 实验材料第23页
        3.1.2 主要试剂第23-27页
        3.1.3 主要仪器第27-28页
    3.2 实验方法第28-45页
        3.2.1 斑马鱼胚胎总RNA的提取第28-29页
        3.2.2 斑马鱼胚胎总RNA的检测第29页
        3.2.3 引物设计和Morpholinos的合成第29-30页
        3.2.4 去除RNA中少量的DNA第30页
        3.2.5 反转录合成cDNA第一链第30-31页
        3.2.6 PCR扩增第31页
        3.2.7 琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物第31页
        3.2.8 PCR扩增产物胶回收第31-32页
        3.2.9 连接反应第32页
        3.2.10 感受态细胞的制备第32-33页
        3.2.11 转化第33-34页
        3.2.12 转化子的培养第34页
        3.2.13 质粒DNA的提取第34-35页
        3.2.14 连接产物测序第35页
        3.2.15 pCS2+EGFP载体的构建第35页
        3.2.16 pCS2+SS3 MO EGFP功效验证载体构建第35-36页
        3.2.17 pCS2+SS3 EGFP融合表达载体构建第36-37页
        3.2.18 pCS2+SS3 kzm载体构建第37-38页
        3.2.19 SS3 mRNA的体外转录第38-41页
        3.2.20 地高辛标记的RNA探针的合成第41-42页
        3.2.21 斑马鱼整胚原位杂交第42-45页
第四章 实验结果分析与讨论第45-65页
    4.1 结果与分析第45-60页
        4.1.1 斑马鱼胚胎总RNA提取的效果检测第45页
        4.1.2 营救基因扩增结果第45-46页
        4.1.3 营救基因扩增测序结果第46-48页
        4.1.4 pCS2+SS3 MO EGFP功效验证载体构建及在体表达第48-51页
        4.1.5 pCS2+SS3 EGFP融合表达载体构建及在体表达第51-54页
        4.1.6 pCS2+SS3 kzm载体构建第54-55页
        4.1.7 体外转录合成的Capped SS3 mRNA的完整性检测第55页
        4.1.8 体外合成地高辛标记的RNA探针检测第55-56页
        4.1.9 SS3和SS4敲降及营救胚胎胰岛素mRNA表达分析第56-58页
        4.1.10 SS3和SS4双敲降以及SS3 mRNA营救后胚胎表型的变化第58-60页
    4.2 结果讨论第60-65页
        4.2.1 反义吗啉环寡聚核苷酸敲降技术第60页
        4.2.2 SS3 MOs功效验证第60页
        4.2.3 斑马鱼胚胎SS3基因对胰岛素基因的表达调节第60-62页
        4.2.4 SS3 MOs和SS4 MOs双敲降后对胚胎表型影响及SS3 mRNA表型营救第62-65页
第五章 结论第65-67页
参考文献第67-81页
致谢第81-83页
攻读硕士学位期间发表论文及参与科研项目第83-85页
缩写词第85页

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