摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
文献综述 | 第12-19页 |
1 引言 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-34页 |
2.1 材料 | 第20-23页 |
2.1.1 供试菌株 | 第20-21页 |
2.1.2 主要试验试剂 | 第21-22页 |
2.1.3 主要试验仪器 | 第22页 |
2.1.4 培养基配方 | 第22-23页 |
2.1.5 试剂配制 | 第23页 |
2.2 实验方法 | 第23-34页 |
2.2.1 蝉棒束孢交配型基因片段克隆 | 第23-26页 |
2.2.1.1 蝉棒束孢基因组DNA提取 | 第23-24页 |
2.2.1.2 DNA纯度和浓度检测 | 第24页 |
2.2.1.3 交配型基因扩增反应体系及条件 | 第24-25页 |
2.2.1.4 RCR产物切胶回收 | 第25页 |
2.2.1.5 克隆转化 | 第25-26页 |
2.2.1.6 阳性克隆的菌落PCR验证 | 第26页 |
2.2.1.7 序列测定 | 第26页 |
2.2.2 蝉棒束孢MAT111、MAT121 的克隆 | 第26-31页 |
2.2.2.1 RCEF总RNA的提取 | 第26-27页 |
2.2.2.2 MAT111、MAT1213’RACE模版的合成 | 第27页 |
2.2.2.3 MAT111、MAT1215’RACE模版的合成 | 第27-29页 |
2.2.2.4 MAT111、MAT121cDNA3’/5’端的RACE-PCR扩增 | 第29-30页 |
2.2.2.5 RCR产物切胶回收 | 第30-31页 |
2.2.2.6 克隆转化 | 第31页 |
2.2.2.7 阳性克隆的菌落PCR验证 | 第31页 |
2.2.3 MAT111 和MAT121 序列测定与分析 | 第31页 |
2.2.4 基于交配型基因的系统发育分析 | 第31页 |
2.2.5 氨基酸多序列比对及特异性引物设计 | 第31页 |
2.2.6 安徽地区蝉棒束孢菌株的交配型鉴定 | 第31-32页 |
2.2.6.1 DNA提取 | 第31页 |
2.2.6.2 交配型鉴定引物及反应体系 | 第31-32页 |
2.2.7 蝉棒束孢菌株间营养体亲和性测定 | 第32-34页 |
2.2.7.1 对峙培养法 | 第32-33页 |
2.2.7.2 互补交配型单孢株配对出草实验 | 第33-34页 |
3 结果与分析 | 第34-46页 |
3.1 蝉棒束孢MAT111、MAT121 片段扩增结果 | 第34-35页 |
3.2 RCEF 6213、RCEF 6214 总RNA的提取 | 第35页 |
3.3 蝉棒束孢MAT111、MAT121 的RACE扩增 | 第35-36页 |
3.4 蝉棒束孢MAT111、MAT121cDNA序列的拼接及分析 | 第36-37页 |
3.5 蝉棒束孢MAT111、MAT121 编码蛋白的结构分析 | 第37-39页 |
3.6 基于交配型基因的系统发育分析 | 第39-40页 |
3.7 交配型基因编码蛋白的氨基酸序列比对 | 第40-42页 |
3.8 蝉棒束孢菌株交配型鉴定结果 | 第42-43页 |
3.9 蝉棒束孢不同交配型菌株间营养亲和性分析 | 第43-46页 |
3.9.1 对峙培养结果 | 第43-44页 |
3.9.2 互补交配型单孢分离株配对出草实验 | 第44-46页 |
4 讨论 | 第46-47页 |
5 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
作者简介 | 第55页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第55页 |