摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
符号及缩略语表 | 第14-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-33页 |
第一节 PLD研究进展 | 第15-21页 |
1 高等植物PLD | 第15-17页 |
2 动物PLD | 第17-21页 |
2.1 PLD1和PLD2 | 第18-19页 |
2.2 线粒体PLD(mitoPLD) | 第19-21页 |
第二节 三酰甘油(TAG)合成途径 | 第21-29页 |
1 三酰甘油合成途径 | 第21-29页 |
1.1 脂肪酸合成 | 第21-23页 |
1.2 三酰甘油合成 | 第23-29页 |
第三节 独脚金内酯合成 | 第29-31页 |
第四节 种子特异性启动子 | 第31-33页 |
第二章 GmPLD基因组分析及GmPLDγ在盐胁迫中的作用 | 第33-61页 |
第一节 GmPLD基因组分析 | 第33-48页 |
摘要 | 第33页 |
引言 | 第33-34页 |
1 材料与方法 | 第34-38页 |
1.1 基因组分析 | 第34页 |
1.2 植物材料培养 | 第34页 |
1.3 定量分析 | 第34-35页 |
1.4 PCR扩增和载体连接 | 第35-36页 |
1.5 蛋白表达 | 第36页 |
1.6 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳和western blotting | 第36-38页 |
1.7 PLD活性测定 | 第38页 |
2 结果与分析 | 第38-47页 |
2.1 大豆PLD家族成员 | 第38-42页 |
2.2 GmPLDs在各个器官中表达水平的鉴定 | 第42-44页 |
2.3 NaC1和ABA胁迫对GmPLD表达的影响 | 第44-45页 |
2.4 GmPLDα1酶特性 | 第45-47页 |
3 讨论 | 第47-48页 |
第二节 GmPLDγ特性及其在调节拟南芥耐盐性中的作用 | 第48-61页 |
摘要 | 第48页 |
引言 | 第48-49页 |
1 材料与方法 | 第49-54页 |
1.1 拟南芥和大豆的培养 | 第49页 |
1.2 基因的克隆和载体连接 | 第49-50页 |
1.3 拟南芥转基因 | 第50-51页 |
1.4 蛋白表达 | 第51页 |
1.5 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳和western blotting | 第51-52页 |
1.6 PLD活性测定 | 第52页 |
1.7 定量分析 | 第52-53页 |
1.8 拟南芥种子油含量提取和测定 | 第53-54页 |
2 结果与分析 | 第54-58页 |
2.1 GmPLDγ在大豆中受盐胁迫诱导 | 第54-55页 |
2.2 GmPLDγ水解特性 | 第55-56页 |
2.3 GmPLDγ定位于线粒体 | 第56页 |
2.4 过量表达GmLDγ提高盐胁迫下拟南芥种子萌发 | 第56-58页 |
2.5 过量表达GmPLDγ提高拟南芥种子油含量 | 第58页 |
3 讨论 | 第58-61页 |
第三章 过表达GmDGAT1A提高拟南芥分枝数和种子油含量 | 第61-75页 |
摘要 | 第61页 |
引言 | 第61-62页 |
1 材料与方法 | 第62-66页 |
1.1 拟南芥的培养 | 第62页 |
1.2 DGAT活性检测 | 第62-65页 |
1.3 转基因植株RT-PCR检测 | 第65页 |
1.4 拟南芥种子油脂提取及测定 | 第65-66页 |
1.5 定量分析 | 第66页 |
2 结果与分析 | 第66-73页 |
2.1 在过表达植株中GmDGAT1A,GmDGAT1B可以提高油含量 | 第66-69页 |
2.2 GmDGAT1A可以提高拟南芥分枝数 | 第69-70页 |
2.3 GmDGAT1A影响拟南芥独脚金内酯合成基因的表达 | 第70-73页 |
3 讨论 | 第73-75页 |
第四章 大豆溶血磷脂酸酰基转移酶(GmLPAT)功能的初步鉴定 | 第75-83页 |
摘要 | 第75页 |
引言 | 第75-76页 |
1 材料与方法 | 第76-78页 |
1.1 基因组分析 | 第76页 |
1.2 拟南芥和大豆的培养 | 第76页 |
1.3 基因克隆 | 第76-77页 |
1.4 拟南芥转基因 | 第77-78页 |
2 结果与分析 | 第78-82页 |
2.1 GmLPAT成员的确定 | 第78-80页 |
2.2 GmLPAT转基因植株 | 第80-81页 |
2.3 在拟南芥过表达GmLPAT4B提高分枝数 | 第81-82页 |
3 讨论 | 第82-83页 |
第五章 全文结论和创新之处 | 第83-85页 |
全文结论 | 第83页 |
创新之处 | 第83-85页 |
参考文献 | 第85-101页 |
附录 一个大豆油体蛋白种子特异性启动子的克隆和鉴定 | 第101-113页 |
摘要 | 第101页 |
引言 | 第101-102页 |
1 材料与方法 | 第102-105页 |
1.1 油体蛋白基因启动子的确定 | 第102页 |
1.2 油体蛋白基因半定量检测 | 第102-103页 |
1.3 启动子的克隆和载体连接 | 第103页 |
1.4 农杆菌侵染拟南芥 | 第103-105页 |
1.5 GUS染色 | 第105页 |
2 结果与分析 | 第105-107页 |
2.1 ole7-11基因半定量分析 | 第105-106页 |
2.2 ole8启动子的克隆和连接PBI101载体 | 第106-107页 |
2.3 GUS基因的检测 | 第107页 |
3 讨论 | 第107-113页 |
博士期间发表和完成的论文 | 第113-115页 |
致谢 | 第115页 |