NDV、IBV和ILTV诊断基因芯片的构建及初步应用
| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第8-13页 |
| 第一章 文献综述及研究的目的意义 | 第13-21页 |
| 1 基因芯片技术在畜禽疾病诊断中的应用 | 第13-15页 |
| 1.1 基因芯片的概念及原理 | 第13页 |
| 1.2 基因芯片实验流程 | 第13页 |
| 1.3 基因芯片技术在畜禽疾病诊断中的应用 | 第13-15页 |
| 1.4 基因芯片技术展望 | 第15页 |
| 2 鸡新城疫病毒及诊断技术进展 | 第15-17页 |
| 2.1 新城疫病毒概述 | 第15页 |
| 2.2 新城疫分子生物学诊断技术 | 第15-17页 |
| 3 鸡传染性支气管炎及诊断技术进展 | 第17-18页 |
| 3.1 传染性支气管炎病毒概述 | 第17页 |
| 3.2 传染性支气管炎分子生物学诊断技术 | 第17-18页 |
| 4 鸡传染性喉气管炎病毒及诊断技术进展 | 第18-20页 |
| 4.1 传染性喉气管炎病毒概述 | 第18-19页 |
| 4.2 传染性喉气管炎分子生物学诊断技术 | 第19-20页 |
| 5 研究的目的意义 | 第20-21页 |
| 第二章 诊断基因芯片探针质粒菌的克隆及鉴定 | 第21-45页 |
| 1 材料 | 第21页 |
| 1.1 生物材料 | 第21页 |
| 1.2 主要试剂与培养基 | 第21页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第21页 |
| 2 实验方法 | 第21-27页 |
| 2.1 探针引物设计和合成 | 第21-22页 |
| 2.2 病毒的增殖培养 | 第22页 |
| 2.3 病毒基因组的抽提 | 第22-23页 |
| 2.4 探针基因的RT-PCR及PCR扩增 | 第23-24页 |
| 2.5 探针基因的胶回收 | 第24-25页 |
| 2.6 探针基因的连接重组 | 第25页 |
| 2.7 感受态细胞的制备及保存 | 第25页 |
| 2.8 连接产物的转化 | 第25-26页 |
| 2.9 探针质粒菌的鉴定及保存 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-42页 |
| 3.1 探针引物设计结果 | 第27页 |
| 3.2 探针基因PCR扩增结果 | 第27-29页 |
| 3.3 探针基因的胶回收 | 第29页 |
| 3.4 探针基因克隆结果 | 第29页 |
| 3.5 探针质粒菌PCR鉴定结果 | 第29-30页 |
| 3.6 探针基因序列分析 | 第30-42页 |
| 4 讨论 | 第42-45页 |
| 4.1 探针的设计 | 第42-43页 |
| 4.2 探针基因的选择 | 第43页 |
| 4.3 探针基因的PCR扩增、克隆和鉴定 | 第43-44页 |
| 4.4 探针基因的序列分析 | 第44-45页 |
| 第三章 诊断基因芯片的构建 | 第45-63页 |
| 1 材料 | 第45页 |
| 1.1 探针质粒菌菌 | 第45页 |
| 1.2 基因芯片材料与试剂 | 第45页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第45页 |
| 2 实验方法 | 第45-52页 |
| 2.1 检测探针和定位探针的制备 | 第45-48页 |
| 2.2 基因芯片检测阵列的设计排布 | 第48页 |
| 2.3 基因芯片的构建 | 第48-49页 |
| 2.4 靶核酸的PCR扩增标记 | 第49-50页 |
| 2.5 基因芯片的杂交、扫描和初检 | 第50-52页 |
| 3 结果与分析 | 第52-58页 |
| 3.1 探针的纯化方法选择结果 | 第52-53页 |
| 3.2 探针的浓度和纯度测定结果 | 第53-54页 |
| 3.3 基因芯片点样的优化结果 | 第54-56页 |
| 3.4 靶核酸的PCR扩增标记结果 | 第56页 |
| 3.5 基因芯片的杂交和结果判定 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-63页 |
| 4.1 基因芯片的阵列设计 | 第58页 |
| 4.2 基因芯片材料的选择与探针纯化 | 第58-59页 |
| 4.3 基因芯片的点制和点样后处理 | 第59-60页 |
| 4.4 基因芯片靶核酸的标记 | 第60页 |
| 4.5 基因芯片的杂交、扫描 | 第60-61页 |
| 4.6 基因芯片的信号点定位和阳性标准的判定 | 第61-63页 |
| 第四章 诊断基因芯片检测技术研究 | 第63-78页 |
| 1 材料 | 第63页 |
| 1.1 基因芯片 | 第63页 |
| 1.2 病毒 | 第63页 |
| 1.3 临床样品 | 第63页 |
| 1.4 其他试剂和仪器设备 | 第63页 |
| 2 实验方法 | 第63-65页 |
| 2.1 基因芯片的制备 | 第63页 |
| 2.2 病毒核酸的提取 | 第63页 |
| 2.3 基因芯片的有效性检测 | 第63页 |
| 2.4 多重PCR标记体系的构建与优化 | 第63-64页 |
| 2.5 基因芯片的特异性检测 | 第64页 |
| 2.6 基因芯片的敏感性检测 | 第64页 |
| 2.7 基因芯片的重复性检测 | 第64页 |
| 2.8 基因芯片的临床样品检测 | 第64-65页 |
| 3 结果与分析 | 第65-75页 |
| 3.1 基因芯片的有效性检测 | 第65-66页 |
| 3.2 多重PCR体系的构建与优化 | 第66-69页 |
| 3.3 基因芯片的特异性检测 | 第69-71页 |
| 3.4 基因芯片的敏感性检测 | 第71-73页 |
| 3.5 基因芯片的稳定性检测 | 第73-74页 |
| 3.6 基因芯片的临床样品检测 | 第74-75页 |
| 4 讨论 | 第75-78页 |
| 4.1 基因芯片的数据处理 | 第75页 |
| 4.2 基因芯片的特异性、敏感性和稳定性 | 第75-76页 |
| 4.3 基因芯片的应用及趋势 | 第76-78页 |
| 第五章 结论 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
