| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-24页 |
| 1.1 基因治疗 | 第12页 |
| 1.2 基因治疗载体 | 第12-19页 |
| 1.2.1 病毒载体 | 第12-13页 |
| 1.2.2 非病毒载体 | 第13-19页 |
| 1.3 RNAi技术的研究进展 | 第19-22页 |
| 1.3.1 RNAi的简介 | 第19-20页 |
| 1.3.2 RNAi的作用机制 | 第20-21页 |
| 1.3.3 RNAi的作用特点 | 第21页 |
| 1.3.4 RNAi的生物学意义 | 第21-22页 |
| 1.3.5 RNAi在肿瘤治疗中的应用 | 第22页 |
| 1.3.6 RNAi存在的问题 | 第22页 |
| 1.4 ATRP(原子转移自由基聚合)技术在非病毒基因载体研究中的进展 | 第22-23页 |
| 1.5 本论文的选题依据及研究内容 | 第23-24页 |
| 2 阳离子化菊粉(PDIN)的合成 | 第24-32页 |
| 2.1 引言 | 第24-25页 |
| 2.2 试剂及仪器 | 第25页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第25页 |
| 2.2.2 仪器设备 | 第25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-27页 |
| 2.3.1 载体PDIN的合成 | 第25-27页 |
| 2.3.2 核磁共振氢谱(~1H NMR) | 第27页 |
| 2.3.3 透射电镜(TEM) | 第27页 |
| 2.3.4 场发射扫描电镜分析(FESEM) | 第27页 |
| 2.3.5 缓冲能力测试 | 第27页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第27-31页 |
| 2.4.1 阳离子化菊粉的合成与表征 | 第27-29页 |
| 2.4.2 透射电镜(TEM)分析 | 第29页 |
| 2.4.3 场发射扫描电镜(FESEM)分析 | 第29-30页 |
| 2.4.4 缓冲能力 | 第30-31页 |
| 2.5 本章小结 | 第31-32页 |
| 3 PDIN递送外源基因能力的研究 | 第32-53页 |
| 3.1 引言 | 第32页 |
| 3.2 试剂及仪器 | 第32-33页 |
| 3.2.1 主要试剂 | 第32-33页 |
| 3.2.2 仪器设备 | 第33页 |
| 3.3 实验方法 | 第33-40页 |
| 3.3.1 细胞的复苏、培养与冻存 | 第33-34页 |
| 3.3.2 菌体培养及质粒提取 | 第34-35页 |
| 3.3.3 PDIN/pDNA复合物的制备、粒径及ζ-电位 | 第35-36页 |
| 3.3.4 PDIN/pDNA复合物的稳定性 | 第36页 |
| 3.3.5 PDIN/pDNA复合物的DNase I消化保护实验 | 第36页 |
| 3.3.6 PDIN/pDNA的PI竞争实验 | 第36-37页 |
| 3.3.7 溶血实验 | 第37-38页 |
| 3.3.8 细胞毒性实验 | 第38页 |
| 3.3.9 PDIN2/pDNA复合物在不同N/P的体外转染实验 | 第38-39页 |
| 3.3.10 10%血清浓度条件下PDIN2/pDNA复合物的体外转染实验 | 第39-40页 |
| 3.3.11 统计学分析 | 第40页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第40-52页 |
| 3.4.1 PDIN/pDNA复合物的粒径及ξ-电位 | 第40-41页 |
| 3.4.2 PDIN结合pDNA的能力 | 第41-43页 |
| 3.4.3 PDIN/pDNA复合物的DNase I消化保护实验 | 第43-44页 |
| 3.4.4 PDIN/pDNA复合物的PI竞争实验 | 第44-45页 |
| 3.4.5 溶血实验 | 第45-46页 |
| 3.4.6 细胞毒性 | 第46-49页 |
| 3.4.7 不同N/P的PDIN2/pDNA体外转染的定性分析 | 第49页 |
| 3.4.8 不同N/P的PDIN2/pDNA体外转染的定量分析 | 第49-50页 |
| 3.4.9 10%FBS浓度条件下PDIN2/pDNA复合物的体外转染 | 第50-52页 |
| 3.5 本章小结 | 第52-53页 |
| 4 PDIN2转运siRNA的研究 | 第53-62页 |
| 4.1 引言 | 第53页 |
| 4.2 试剂及仪器 | 第53-54页 |
| 4.2.1 主要试剂 | 第53页 |
| 4.2.2 仪器 | 第53-54页 |
| 4.3 实验方法 | 第54-56页 |
| 4.3.1 PDIN/siRNA复合物的制备 | 第54页 |
| 4.3.2 PDIN结合siRNA能力测试 | 第54页 |
| 4.3.3 PDIN转运的siRNA对基因表达沉默的研究 | 第54-55页 |
| 4.3.4 10%浓度FBS对PDIN转运siRNA沉默基因表达的影响 | 第55-56页 |
| 4.3.5 内摄效率 | 第56页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第56-60页 |
| 4.4.1 PDIN结合siRNA的能力 | 第56-57页 |
| 4.4.2 PDIN/siRNA的基因沉默的定性分析 | 第57页 |
| 4.4.3 PDIN/siRNA的基因沉默的定量分析 | 第57-58页 |
| 4.4.4 10%FBS浓度对沉默基因影响的定性分析 | 第58-59页 |
| 4.4.5 10%FBS浓度对沉默基因影响的定量分析 | 第59-60页 |
| 4.4.6 细胞摄取 | 第60页 |
| 4.5 本章小结 | 第60-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 附录A 细胞培养液的配制 | 第71-72页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
