石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 | 第3-5页 |
中文摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
中英文缩略词表 | 第8-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
1 病原生物学 | 第12-14页 |
1.1 病原学特征 | 第12-13页 |
1.2 生活史 | 第13页 |
1.3 流行病学 | 第13-14页 |
1.4 临床症状及病理学 | 第14页 |
2 巴贝斯虫研究进展 | 第14-18页 |
2.1 虫体入侵过程及机体的免疫反应 | 第14-16页 |
2.2 巴贝斯虫棒状体与宿主细胞入侵 | 第16-18页 |
2.3 巴贝斯虫的体外培养 | 第18页 |
3 巴贝斯虫检测技术研究现状 | 第18-22页 |
3.1 显微镜检测技术 | 第18-19页 |
3.2 免疫学诊断方法 | 第19-20页 |
3.3 分子生物学诊断方法 | 第20-22页 |
第二章 实验研究 | 第22-50页 |
实验一 双芽巴贝斯虫和牛巴贝斯虫 RAP-1C 基因的序列分析、克隆与表达 | 第22-34页 |
摘要 | 第22页 |
1 材料 | 第22-23页 |
1.1 材料及软件 | 第22-23页 |
1.2 主要仪器 | 第23页 |
1.3 主要试剂 | 第23页 |
2 方法 | 第23-27页 |
2.1 RAP-1 基因的生物信息学分析与基因筛选 | 第23页 |
2.2 RAP-1C 基因特异性引物的设计 | 第23-24页 |
2.3 RAP-1C 基因的 PCR 扩增 | 第24-25页 |
2.4 RAP-1C 基因与 pGEM -T Easy 载体的连接与转化 | 第25页 |
2.5 目的基因与空载体的双酶切 | 第25-26页 |
2.6 目的片段与表达载体的连接 | 第26-27页 |
2.7 重组质粒的诱导表达 | 第27页 |
3 结果 | 第27-32页 |
3.1 RAP-1 基因的抗原表位预测 | 第27-28页 |
3.2 RAP-1 氨基酸序列比对 | 第28页 |
3.3 RAP-1C 基因的扩增 | 第28-29页 |
3.4 重组表达质粒的鉴定 | 第29-30页 |
3.5 重组表达质粒的诱导表达 | 第30-32页 |
4 讨论 | 第32-34页 |
实验二 双芽巴贝斯虫和牛巴贝斯虫 RAP-1C 重组蛋白的纯化与反应原性检测 | 第34-40页 |
摘要 | 第34页 |
1 材料 | 第34-35页 |
1.1 主要仪器 | 第34-35页 |
1.2 主要试剂 | 第35页 |
2 方法 | 第35-36页 |
2.1 重组蛋白的纯化 | 第35-36页 |
2.2 重组蛋白的反应原性检测 | 第36页 |
3 结果 | 第36-39页 |
3.1 重组蛋白的纯化 | 第36-37页 |
3.2 重组蛋白的反应原性检测 | 第37-39页 |
4 讨论 | 第39-40页 |
实验三 双芽巴贝斯虫病间接 ELISA 诊断方法的建立 | 第40-50页 |
摘要 | 第40页 |
1 材料 | 第40-41页 |
1.1 主要仪器 | 第40页 |
1.2 主要试剂 | 第40-41页 |
1.3 血清的采集 | 第41页 |
1.4 标准阴性血清、标准阳性血清和待检血清的处理 | 第41页 |
2 方法 | 第41-44页 |
2.1 间接 ELISA 反应程序 | 第41-42页 |
2.2 ELISA 最佳反应条件的筛选 | 第42-44页 |
3 结果 | 第44-47页 |
3.1 抗原最佳稀释度的测定 | 第44页 |
3.2 血清最佳稀释度的测定 | 第44-45页 |
3.3 酶结合物最佳工作浓度的测定 | 第45页 |
3.4 ELISA 阈值的判定 | 第45-46页 |
3.5 特异性试验 | 第46页 |
3.6 抗体动态曲线的评价 | 第46-47页 |
3.7 ELISA 方法对田间样品的检测 | 第47页 |
4 讨论 | 第47-50页 |
全文结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
作者简介 | 第58页 |
在校期间参与的研究课题 | 第58页 |
论文发表情况 | 第58页 |