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巴贝斯虫RAP-1C基因的克隆、表达及双芽巴贝斯虫病间接ELISA诊断方法的建立

石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表第3-5页
中文摘要第5-6页
Abstract第6-7页
中英文缩略词表第8-12页
第一章 文献综述第12-22页
    1 病原生物学第12-14页
        1.1 病原学特征第12-13页
        1.2 生活史第13页
        1.3 流行病学第13-14页
        1.4 临床症状及病理学第14页
    2 巴贝斯虫研究进展第14-18页
        2.1 虫体入侵过程及机体的免疫反应第14-16页
        2.2 巴贝斯虫棒状体与宿主细胞入侵第16-18页
        2.3 巴贝斯虫的体外培养第18页
    3 巴贝斯虫检测技术研究现状第18-22页
        3.1 显微镜检测技术第18-19页
        3.2 免疫学诊断方法第19-20页
        3.3 分子生物学诊断方法第20-22页
第二章 实验研究第22-50页
    实验一 双芽巴贝斯虫和牛巴贝斯虫 RAP-1C 基因的序列分析、克隆与表达第22-34页
        摘要第22页
        1 材料第22-23页
            1.1 材料及软件第22-23页
            1.2 主要仪器第23页
            1.3 主要试剂第23页
        2 方法第23-27页
            2.1 RAP-1 基因的生物信息学分析与基因筛选第23页
            2.2 RAP-1C 基因特异性引物的设计第23-24页
            2.3 RAP-1C 基因的 PCR 扩增第24-25页
            2.4 RAP-1C 基因与 pGEM -T Easy 载体的连接与转化第25页
            2.5 目的基因与空载体的双酶切第25-26页
            2.6 目的片段与表达载体的连接第26-27页
            2.7 重组质粒的诱导表达第27页
        3 结果第27-32页
            3.1 RAP-1 基因的抗原表位预测第27-28页
            3.2 RAP-1 氨基酸序列比对第28页
            3.3 RAP-1C 基因的扩增第28-29页
            3.4 重组表达质粒的鉴定第29-30页
            3.5 重组表达质粒的诱导表达第30-32页
        4 讨论第32-34页
    实验二 双芽巴贝斯虫和牛巴贝斯虫 RAP-1C 重组蛋白的纯化与反应原性检测第34-40页
        摘要第34页
        1 材料第34-35页
            1.1 主要仪器第34-35页
            1.2 主要试剂第35页
        2 方法第35-36页
            2.1 重组蛋白的纯化第35-36页
            2.2 重组蛋白的反应原性检测第36页
        3 结果第36-39页
            3.1 重组蛋白的纯化第36-37页
            3.2 重组蛋白的反应原性检测第37-39页
        4 讨论第39-40页
    实验三 双芽巴贝斯虫病间接 ELISA 诊断方法的建立第40-50页
        摘要第40页
        1 材料第40-41页
            1.1 主要仪器第40页
            1.2 主要试剂第40-41页
            1.3 血清的采集第41页
            1.4 标准阴性血清、标准阳性血清和待检血清的处理第41页
        2 方法第41-44页
            2.1 间接 ELISA 反应程序第41-42页
            2.2 ELISA 最佳反应条件的筛选第42-44页
        3 结果第44-47页
            3.1 抗原最佳稀释度的测定第44页
            3.2 血清最佳稀释度的测定第44-45页
            3.3 酶结合物最佳工作浓度的测定第45页
            3.4 ELISA 阈值的判定第45-46页
            3.5 特异性试验第46页
            3.6 抗体动态曲线的评价第46-47页
            3.7 ELISA 方法对田间样品的检测第47页
        4 讨论第47-50页
全文结论第50-51页
参考文献第51-57页
致谢第57-58页
作者简介第58页
在校期间参与的研究课题第58页
论文发表情况第58页

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