| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 缩略语 | 第14-15页 |
| 前言 | 第15-19页 |
| 研究现状、成果 | 第15-17页 |
| 研究目的、方法 | 第17-19页 |
| 对象和方法 | 第19-42页 |
| 1.1 实验材料 | 第19-25页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第19页 |
| 1.1.2 细胞系 | 第19页 |
| 1.1.3 主要仪器设备 | 第19-20页 |
| 1.1.4 实验试剂 | 第20-22页 |
| 1.1.5 引物 | 第22-25页 |
| 1.1.6 主要分析工具软件 | 第25页 |
| 1.2 实验方法 | 第25-42页 |
| 1.2.1 试剂配制 | 第25-28页 |
| 1.2.2 细胞培养建系 | 第28-32页 |
| 1.2.3 细胞RNA的提取 | 第32页 |
| 1.2.4 RT-PCR | 第32-33页 |
| 1.2.5 半定量PCR扩增 | 第33-34页 |
| 1.2.6 细胞免疫荧光,共聚焦 | 第34页 |
| 1.2.7 细胞肝糖原染色(PAS染色) | 第34-35页 |
| 1.2.8 吲哚菁绿(ICG)摄入排出实验 | 第35页 |
| 1.2.9 油红染色 | 第35页 |
| 1.2.10 CYP诱导实验 | 第35-36页 |
| 1.2.11 细胞核型染色分析 | 第36页 |
| 1.2.12 细胞基因组提取 | 第36-37页 |
| 1.2.13 狨猴TP53 sgRNA的构建 | 第37页 |
| 1.2.14 裸鼠皮下成瘤实验 | 第37页 |
| 1.2.15 动物瘤块组织蛋白的提取 | 第37-38页 |
| 1.2.16 TP53蛋白western检测 | 第38页 |
| 1.2.17 组织包埋,切片 | 第38页 |
| 1.2.18 组织病理染色(HE染色) | 第38-39页 |
| 1.2.19 胶回收 | 第39页 |
| 1.2.20 细胞系3D培养 | 第39-40页 |
| 1.2.21 肝细胞脾脏移植FAH小鼠 | 第40页 |
| 1.2.22 FAH肝脏免疫组化 | 第40-42页 |
| 结果 | 第42-60页 |
| 2.1 狨猴原代肝细胞的分离,稳定传代细胞系的建立 | 第42-57页 |
| 2.1.1 狨猴原代肝细胞的分离和传代培养 | 第42页 |
| 2.1.2 狨猴肝细胞建系方法的优化 | 第42-43页 |
| 2.1.3 狨猴肝细胞系的建立 | 第43-45页 |
| 2.1.4 狨猴肝细胞系染色体稳定性及成瘤性检测 | 第45-47页 |
| 2.1.5 狨猴肝细胞系相关基因表达谱分析 | 第47-48页 |
| 2.1.6 狨猴肝细胞系超微结构分析和基本生理功能的验证 | 第48-50页 |
| 2.1.7 狨猴肝细胞系一级药物代谢和排出功能测试 | 第50-53页 |
| 2.1.8 狨猴肝细胞系在FAH缺陷小鼠上的功能验证 | 第53-55页 |
| 2.1.9 狨猴肝细胞系干性相关特性研究 | 第55-57页 |
| 2.2 Crispr-cas9在狨猴原代肝细胞的应用研究 | 第57-60页 |
| 2.2.1 Crispr-cas9敲除系统的验证 | 第57-58页 |
| 2.2.2 TP53 knock-out狨猴肝细胞基因表达及成瘤性检测 | 第58-60页 |
| 讨论 | 第60-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第67-68页 |
| 综述 肝细胞的来源,应用以及在基础医学的展望 | 第68-77页 |
| 综述参考文献 | 第73-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 个人简历 | 第78页 |
