| 摘要 | 第3-5页 |
| Summary | 第5-6页 |
| 缩略语表 | 第7-11页 |
| 第一篇 文献综述 | 第11-18页 |
| 1 牛结核病的病原学 | 第11-12页 |
| 2 国内外牛结核病的地域分布以及流行情况 | 第12-14页 |
| 2.1 发达国家牛结核病的分布及流行情况 | 第12-13页 |
| 2.2 发展中国家牛结核病的流行情况 | 第13页 |
| 2.3 我国的牛结核病流行情况 | 第13-14页 |
| 3 牛结核病的危害 | 第14-15页 |
| 4 牛分枝杆菌致病机理及致病性 | 第15页 |
| 5 牛分枝杆菌免疫机理 | 第15-16页 |
| 6 牛结核病的防制 | 第16页 |
| 7 hbha基因研究进展 | 第16-17页 |
| 8 本课题研究及意义 | 第17-18页 |
| 第二篇 试验部分 | 第18-46页 |
| 第一章 牛分枝杆菌hbha基因的克隆表达及黏附性试验 | 第18-34页 |
| 1 材料与方法 | 第18-29页 |
| 1.1 材料 | 第18-21页 |
| 1.2 M.bovis基因组的提取 | 第21页 |
| 1.3 M.bovis hbha基因引物设计 | 第21页 |
| 1.4 M.bovis hbha基因的扩增 | 第21页 |
| 1.5 hbha基因的PCR扩增产物纯化 | 第21-22页 |
| 1.6 pET28a(+)载体质粒的提取 | 第22-23页 |
| 1.7 hbha基因回收产物与pET28a(+)表达载体双酶切 | 第23页 |
| 1.8 大肠杆菌DH5α 感受态的制备 | 第23页 |
| 1.9 hbha基因回收产物与pET28a(+)表达载体的连接转化 | 第23-24页 |
| 1.10 HBHA蛋白原核表达及纯化 | 第24-26页 |
| 1.11 HBHA多克隆抗体的制备 | 第26-27页 |
| 1.12 HBHA多克隆抗体效价的检测 | 第27页 |
| 1.13 HBHA的Western blot验证 | 第27-28页 |
| 1.14 A549细胞的培养与传代 | 第28页 |
| 1.15 HBHA蛋白的黏附性检测 | 第28-29页 |
| 2 结果 | 第29-33页 |
| 2.1 hbha基因PCR扩增结果 | 第29页 |
| 2.2 pET-hbha重组表达质粒的鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3 rMbHBHA的SDS-PAGE电泳分析 | 第30-31页 |
| 2.4 HBHA多克隆抗体效价检测 | 第31页 |
| 2.5 HBHA的western-blot验证 | 第31-32页 |
| 2.6 HBHA蛋白的黏附性检测 | 第32-33页 |
| 3 讨论 | 第33-34页 |
| 第二章 肝素结合血凝素的黏附功能鉴定 | 第34-46页 |
| 1 材料与方法 | 第34-40页 |
| 1.1 材料 | 第34-35页 |
| 1.2 hbha基因片段与pMV361载体的连接转化 | 第35页 |
| 1.3 重组耻垢分枝杆菌HBHA-mc~2155的构建与鉴定 | 第35-37页 |
| 1.4 重组蛋白表达的检测 | 第37页 |
| 1.5 HBHA蛋白在HBHA-mc~2155中的分布 | 第37页 |
| 1.6 HBHA- mc~2155的黏附和黏附阻断试验 | 第37-39页 |
| 1.7 HBHA- mc~2155动物致病性试验 | 第39-40页 |
| 2 结果 | 第40-44页 |
| 2.1 HBHA-mc~2155的鉴定 | 第40-41页 |
| 2.2 HBHA蛋白在HBHA-mc~2155中的分布 | 第41-42页 |
| 2.3 HBHA-mc~2155对A549细胞的黏附及黏附阻断试验 | 第42-43页 |
| 2.4 HBHA-mc~2155对小鼠致病性试验 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-46页 |
| 全文总结 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55-56页 |
| 导师简介 | 第56-57页 |
