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MiR-127-3p在C2C12成肌细胞增殖和分化的作用及调控机制的研究

论文部分缩写词的中英文对照第3-4页
摘要第4-6页
SUMMARY第6-7页
第一章 文献综述第11-23页
    1 肌肉发育与形成机制第11-16页
        1.1 肌肉的形成及发育第11-12页
        1.2 骨骼肌发生过程中的生肌调控因子第12-16页
            1.2.1 生肌调控因子(myogenic regulatory factors,MRFS)第12-13页
            1.2.2 成肌细胞增强因子 2(Myocyte enhancer factor2,MEF2)第13-14页
            1.2.3 Pax基因 (Paired box,Pax)第14-15页
            1.2.4 肌肉生长抑制因子 (Myostatin,MSTN)第15-16页
    2 miRNA生物学特征第16-22页
        2.1 miRNA的发现第16页
        2.2 miRNA的生成第16-17页
        2.3 miRNA的作用机制第17-18页
        2.4 miRNA与骨骼肌发育的关系第18-20页
        2.5 miRNA调控肌纤维类型第20-21页
        2.6 miR1273p的研究现状第21-22页
    3 研究目的及意义第22-23页
第二章 试验研究第23-64页
    试验一 miR1273p保守性及组织表达分析第23-30页
        1 材料与方法第23-27页
            1.1 试验材料第23-24页
                1.1.1 组织样品第23页
                1.1.2 仪器设备第23-24页
                1.1.3 试剂耗材第24页
            1.2 方法第24-27页
                1.2.1 组织样品采集第24页
                1.2.2 总RNA的提取及检测第24-25页
                1.2.3 RNA的质量检测第25-26页
                1.2.4 RT-qPCR检测miR1273p的表达第26-27页
        2 结果与分析第27-28页
            2.1 miR1273p序列的同源性分析第27页
            2.2 miR1273p在不同山羊品种间的组织表达谱第27-28页
        3 讨论第28-30页
    试验二 miR1273p对C2C12成肌细胞增殖和分化的作用第30-50页
        1 材料与方法第30-35页
            1.1 试验材料第30-31页
                1.1.1 细胞系第30页
                1.1.2 仪器设备第30-31页
                1.1.3 试剂耗材第31页
            1.2 方法第31-35页
                1.2.1 C2C12细胞培养第31-32页
                1.2.2 miR1273p模拟物/抑制剂转染C2C12成肌细胞第32页
                1.2.3 融合指数和分化指数计数第32页
                1.2.4 RT-qPCR检测miR1273p的表达第32-33页
                1.2.5 RT-qPCR检测肌源性标记基因mRNA的变化第33-35页
        2 结果与分析第35-48页
            2.1 miR1273p对C2C12成肌细胞增殖的影响第35-41页
                2.1.1 miR1273p在C2C12成肌细胞增殖过程中的动态变化第35-36页
                2.1.2 过表达miR1273p抑制C2C12成肌细胞增殖第36-39页
                2.1.3 干扰miR1273p促进C2C12成肌细胞增殖第39-41页
            2.2 miR1273p对C2C12成肌细胞分化的影响第41-48页
                2.2.1 miR1273p在C2C12成肌细胞分化不同时期的动态变化第41-42页
                2.2.2 过表达miR1273p促进C2C12细胞成肌分化第42-45页
                2.2.3 干扰miR1273p抑制C2C12细胞生肌分化第45-48页
        3 讨论第48-50页
    试验三 miR1273p的靶基因分析与鉴定第50-64页
        1 材料与方法第51-59页
            1.1 试验材料第51-53页
                1.1.1 细胞系第51页
                1.1.2 菌株及载体第51-52页
                1.1.3 仪器设备第52页
                1.1.4 试剂耗材第52页
                1.1.5 常用溶液配制第52-53页
                1.1.6 分子生物学相关软件第53页
            1.2 方法第53-59页
                1.2.1 生物信息学预测miR1273p靶基因第53-54页
                1.2.2 靶基因野生型和突变型的 3′UTR的扩增第54页
                1.2.3 靶基因野生型和突变型的 3′UTR片段胶回收第54-55页
                1.2.4 靶基因野生型和突变型的 3′UTR片段双酶切第55-56页
                1.2.5 靶基因野生型和突变型的 3′UTR片段连接第56页
                1.2.6 靶基因野生型和突变型的 3′UTR片段转化第56-57页
                1.2.7 质粒的提取第57-58页
                1.2.8 双荧光素酶报告基因检测试验第58-59页
        2 结果与分析第59-62页
            2.1 利用软件预测miR1273p的靶基因第59页
            2.2 miR1273p抑制其靶基因荧光素酶活性第59-60页
            2.3 miR1273p抑制其靶基因mRNA的表达第60-62页
        3 讨论第62-64页
结论第64-65页
    本研究获得的结果第64页
    本研究的创新点与特色第64-65页
参考文献第65-74页
致谢第74-75页
个人简介第75-76页
导师简介第76-77页

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