论文部分缩写词的中英文对照 | 第3-4页 |
摘要 | 第4-6页 |
SUMMARY | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第11-23页 |
1 肌肉发育与形成机制 | 第11-16页 |
1.1 肌肉的形成及发育 | 第11-12页 |
1.2 骨骼肌发生过程中的生肌调控因子 | 第12-16页 |
1.2.1 生肌调控因子(myogenic regulatory factors,MRFS) | 第12-13页 |
1.2.2 成肌细胞增强因子 2(Myocyte enhancer factor2,MEF2) | 第13-14页 |
1.2.3 Pax基因 (Paired box,Pax) | 第14-15页 |
1.2.4 肌肉生长抑制因子 (Myostatin,MSTN) | 第15-16页 |
2 miRNA生物学特征 | 第16-22页 |
2.1 miRNA的发现 | 第16页 |
2.2 miRNA的生成 | 第16-17页 |
2.3 miRNA的作用机制 | 第17-18页 |
2.4 miRNA与骨骼肌发育的关系 | 第18-20页 |
2.5 miRNA调控肌纤维类型 | 第20-21页 |
2.6 miR1273p的研究现状 | 第21-22页 |
3 研究目的及意义 | 第22-23页 |
第二章 试验研究 | 第23-64页 |
试验一 miR1273p保守性及组织表达分析 | 第23-30页 |
1 材料与方法 | 第23-27页 |
1.1 试验材料 | 第23-24页 |
1.1.1 组织样品 | 第23页 |
1.1.2 仪器设备 | 第23-24页 |
1.1.3 试剂耗材 | 第24页 |
1.2 方法 | 第24-27页 |
1.2.1 组织样品采集 | 第24页 |
1.2.2 总RNA的提取及检测 | 第24-25页 |
1.2.3 RNA的质量检测 | 第25-26页 |
1.2.4 RT-qPCR检测miR1273p的表达 | 第26-27页 |
2 结果与分析 | 第27-28页 |
2.1 miR1273p序列的同源性分析 | 第27页 |
2.2 miR1273p在不同山羊品种间的组织表达谱 | 第27-28页 |
3 讨论 | 第28-30页 |
试验二 miR1273p对C2C12成肌细胞增殖和分化的作用 | 第30-50页 |
1 材料与方法 | 第30-35页 |
1.1 试验材料 | 第30-31页 |
1.1.1 细胞系 | 第30页 |
1.1.2 仪器设备 | 第30-31页 |
1.1.3 试剂耗材 | 第31页 |
1.2 方法 | 第31-35页 |
1.2.1 C2C12细胞培养 | 第31-32页 |
1.2.2 miR1273p模拟物/抑制剂转染C2C12成肌细胞 | 第32页 |
1.2.3 融合指数和分化指数计数 | 第32页 |
1.2.4 RT-qPCR检测miR1273p的表达 | 第32-33页 |
1.2.5 RT-qPCR检测肌源性标记基因mRNA的变化 | 第33-35页 |
2 结果与分析 | 第35-48页 |
2.1 miR1273p对C2C12成肌细胞增殖的影响 | 第35-41页 |
2.1.1 miR1273p在C2C12成肌细胞增殖过程中的动态变化 | 第35-36页 |
2.1.2 过表达miR1273p抑制C2C12成肌细胞增殖 | 第36-39页 |
2.1.3 干扰miR1273p促进C2C12成肌细胞增殖 | 第39-41页 |
2.2 miR1273p对C2C12成肌细胞分化的影响 | 第41-48页 |
2.2.1 miR1273p在C2C12成肌细胞分化不同时期的动态变化 | 第41-42页 |
2.2.2 过表达miR1273p促进C2C12细胞成肌分化 | 第42-45页 |
2.2.3 干扰miR1273p抑制C2C12细胞生肌分化 | 第45-48页 |
3 讨论 | 第48-50页 |
试验三 miR1273p的靶基因分析与鉴定 | 第50-64页 |
1 材料与方法 | 第51-59页 |
1.1 试验材料 | 第51-53页 |
1.1.1 细胞系 | 第51页 |
1.1.2 菌株及载体 | 第51-52页 |
1.1.3 仪器设备 | 第52页 |
1.1.4 试剂耗材 | 第52页 |
1.1.5 常用溶液配制 | 第52-53页 |
1.1.6 分子生物学相关软件 | 第53页 |
1.2 方法 | 第53-59页 |
1.2.1 生物信息学预测miR1273p靶基因 | 第53-54页 |
1.2.2 靶基因野生型和突变型的 3′UTR的扩增 | 第54页 |
1.2.3 靶基因野生型和突变型的 3′UTR片段胶回收 | 第54-55页 |
1.2.4 靶基因野生型和突变型的 3′UTR片段双酶切 | 第55-56页 |
1.2.5 靶基因野生型和突变型的 3′UTR片段连接 | 第56页 |
1.2.6 靶基因野生型和突变型的 3′UTR片段转化 | 第56-57页 |
1.2.7 质粒的提取 | 第57-58页 |
1.2.8 双荧光素酶报告基因检测试验 | 第58-59页 |
2 结果与分析 | 第59-62页 |
2.1 利用软件预测miR1273p的靶基因 | 第59页 |
2.2 miR1273p抑制其靶基因荧光素酶活性 | 第59-60页 |
2.3 miR1273p抑制其靶基因mRNA的表达 | 第60-62页 |
3 讨论 | 第62-64页 |
结论 | 第64-65页 |
本研究获得的结果 | 第64页 |
本研究的创新点与特色 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
个人简介 | 第75-76页 |
导师简介 | 第76-77页 |