摘要 | 第3-4页 |
abstract | 第4-5页 |
缩略词表 | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-29页 |
1.1 玉米甘蔗花叶病毒病研究进展 | 第12-19页 |
1.1.1 玉米矮花叶病的分布与危害 | 第12-13页 |
1.1.2 玉米矮花叶病的致病病原菌 | 第13页 |
1.1.3 甘蔗花叶病毒分子生物学特性 | 第13-16页 |
1.1.4 玉米甘蔗花叶病毒病的病症及防治措施 | 第16-17页 |
1.1.5 玉米甘蔗花叶病毒病的抗性鉴定方法 | 第17-18页 |
1.1.6 玉米甘蔗花叶病毒病抗病种质资源筛与选抗性遗传研究 | 第18-19页 |
1.1.7 玉米甘蔗花叶病毒病的抗病机理研究 | 第19页 |
1.2 植物抗病研究进展 | 第19-21页 |
1.2.1 植物抗病R基因研究进展 | 第19-20页 |
1.2.2 植物数量抗性位点(QRL)研究进展 | 第20页 |
1.2.3 植物抗病机理研究进展 | 第20-21页 |
1.3 植物抗病毒研究进展 | 第21-23页 |
1.3.1 植物RNA沉默介导的抗病机制 | 第21-22页 |
1.3.2 植物隐性基因介导的被动抗性 | 第22页 |
1.3.3 植物显性基因介导的主动抗性 | 第22-23页 |
1.4 植物硫氧还蛋白研究进展 | 第23-27页 |
1.4.1 植物中Trxh的分类 | 第23-24页 |
1.4.2 植物中Trxh的多重性与亚细胞定位 | 第24页 |
1.4.3 植物中Trxh蛋白的氧化还原活性 | 第24-25页 |
1.4.4 植物中Trxh蛋白的分子伴侣活性 | 第25-26页 |
1.4.5 植物中Trxh蛋白的信号分子功能 | 第26页 |
1.4.6 Trxh与植物抗病 | 第26-27页 |
1.5 研究目的与意义 | 第27-29页 |
第二章 玉米抗甘蔗花叶病毒病主效QTL位点Scmv1精细定位及候选基因预测 | 第29-43页 |
2.1 前言 | 第29页 |
2.2 材料 | 第29页 |
2.2.1 玉米材料 | 第29页 |
2.2.2 接种病原物 | 第29页 |
2.3 实验方法 | 第29-35页 |
2.3.1 性状调查 | 第29-30页 |
2.3.2 分子标记开发 | 第30页 |
2.3.3 基因型鉴定 | 第30-32页 |
2.3.4 BAC文库筛选及覆盖Scmv1的BAC重叠群构建 | 第32-33页 |
2.3.5 BAC序列分析与候选基因预测 | 第33页 |
2.3.6 候选基因半定量检测 | 第33-35页 |
2.4 结果与分析 | 第35-41页 |
2.4.1 两个F_6代RILs群体中Scmv1区段的验证 | 第35-36页 |
2.4.2 利用两个F_6代RIL群体进一步精细定位 | 第36-38页 |
2.4.3 BAC文库筛选及覆盖Scmv1区段的BAC重叠群构建 | 第38-39页 |
2.4.4 候选基因预测 | 第39-40页 |
2.4.5 候选基因的确定 | 第40-41页 |
2.5 讨论 | 第41-43页 |
第三章 ZmTrxh基因的功能验证 | 第43-55页 |
3.1 前言 | 第43页 |
3.2 材料 | 第43-45页 |
3.2.1 植物材料 | 第43页 |
3.2.2 玉米BAC阳性克隆 | 第43页 |
3.2.3 SCMV病原菌 | 第43页 |
3.2.4 转基因互补载体 | 第43-44页 |
3.2.5 RNA干扰载体 | 第44页 |
3.2.6 农杆菌株系及转基因受体 | 第44页 |
3.2.7 试剂 | 第44-45页 |
3.3 实验方法 | 第45-49页 |
3.3.1 互补载体的构建与转化 | 第45-48页 |
3.3.2 RNA干扰载体的构建与转化 | 第48页 |
3.3.3 互补转基因植株的抗性鉴定 | 第48页 |
3.3.4 互补转基因植株的基因型鉴定 | 第48-49页 |
3.4 结果与分析 | 第49-53页 |
3.4.1 BAC克隆及载体的大量酶切 | 第49页 |
3.4.2 互补表达载体连接及电击转化 | 第49-50页 |
3.4.3 互补表达载体阳性克隆的检测与鉴定 | 第50-51页 |
3.4.4 互补表达载体的农杆菌转化及转基因实验 | 第51页 |
3.4.5 互补转基因植株基因型与抗性鉴定 | 第51-53页 |
3.4.6 RNA干扰载体的构建与转化 | 第53页 |
3.5 讨论 | 第53-55页 |
第四章 ZmTrxh基因特征与蛋白功能分析 | 第55-75页 |
4.1 前言 | 第55页 |
4.2 材料与试剂配制 | 第55-58页 |
4.2.1 植物材料 | 第55页 |
4.2.2 载体 | 第55-56页 |
4.2.3 试剂 | 第56页 |
4.2.4 溶液配制 | 第56-58页 |
4.3 实验方法 | 第58-64页 |
4.3.1 病毒接种 | 第58页 |
4.3.2 植物组织RNA提取及表达检测 | 第58页 |
4.3.3 RACE反应引物的设计 | 第58页 |
4.3.4 ZmTrxh全长cDNA序列获得 | 第58-61页 |
4.3.5 载体构建 | 第61页 |
4.3.6 亚细胞定位 | 第61-62页 |
4.3.7 玉米中TRX基因家族的聚类分析 | 第62页 |
4.3.8 三维结构预测 | 第62页 |
4.3.9 ZmTrxh蛋白活性测定 | 第62-64页 |
4.4 结果与分析 | 第64-72页 |
4.4.1 ZmTrxh基因编码区及启动子序列分析 | 第64页 |
4.4.2 ZmTrxh基因的表达模式研究 | 第64-66页 |
4.4.3 ZmTrxh全长cDNA的获得 | 第66-67页 |
4.4.4 ZmTrxh蛋白系统发生树构建 | 第67-69页 |
4.4.5 ZmTrxh蛋白的亚细胞定位 | 第69-70页 |
4.4.6 ZmTrxh三维结构的预测 | 第70-71页 |
4.4.7 ZmTrxh蛋白活性测定 | 第71-72页 |
4.5 讨论 | 第72-75页 |
第五章 ZmTrxh介导的抗病机理研究 | 第75-91页 |
5.1 前言 | 第75页 |
5.2 材料 | 第75-76页 |
5.2.1 植物材料 | 第75页 |
5.2.2 菌株与载体 | 第75-76页 |
5.2.3 试剂与溶液配制 | 第76页 |
5.3 实验方法 | 第76-83页 |
5.3.1 SCMV病毒粒子及RNA提取 | 第76-77页 |
5.3.2 玉米瞬时表达系统 | 第77页 |
5.3.3 抗病自交系酵母文库构建与筛选 | 第77-81页 |
5.3.4 SCMV编码蛋白文库的构建与筛选 | 第81页 |
5.3.5 蛋白互作验证 | 第81-82页 |
5.3.6 SA和JA相关途径的基因表达 | 第82-83页 |
5.4 结果与分析 | 第83-89页 |
5.4.1 ZmTrxh瞬时过量表达对SCMV RNA的影响 | 第83页 |
5.4.2 酵母文库的构建与筛选 | 第83-84页 |
5.4.3 ZmTrxh与寄主蛋白的互作 | 第84-86页 |
5.4.4 ZmTrxh与SCMV编码蛋白的互作 | 第86-87页 |
5.4.5 SCMV编码蛋白与寄主蛋白的互作 | 第87-88页 |
5.4.6 SA和JA抗病途径中相关基因的表达变化 | 第88页 |
5.4.7 ZmTrxh抗病毒分子机制模型 | 第88-89页 |
5.5 讨论 | 第89-91页 |
第六章 结论 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-102页 |
附录 | 第102-108页 |
附表1. 本研究所用引物序列 | 第102-104页 |
附表2. 玉米基因组中ZmTrxh同源蛋白的分布 | 第104-105页 |
附表3. 96份国内玉米自交系表型及分群 | 第105-108页 |
致谢 | 第108-110页 |
个人简历 | 第110-111页 |