| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 英文缩写符号说明 | 第7-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-17页 |
| 1 食管癌的简介 | 第10页 |
| 2 FLJ22139的概论 | 第10-11页 |
| 3 MRTL的概论 | 第11-12页 |
| 4 基因表达与甲基化 | 第12页 |
| 5 食管癌相关基因甲基化 | 第12-13页 |
| ·食管癌中抑癌基因高甲基化改变 | 第13页 |
| ·食管癌中癌基因低甲基化改变 | 第13页 |
| 6 基因甲基化的研究方法 | 第13-14页 |
| 7 研究内容及意义 | 第14-15页 |
| ·研究内容 | 第14-15页 |
| ·研究目的和意义 | 第15页 |
| 8 研究的创新点 | 第15-16页 |
| 9 研究思路 | 第16-17页 |
| 第二章 实验仪器与材料 | 第17-27页 |
| 1 材料 | 第17-25页 |
| ·细胞株、病毒和质粒 | 第17页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第17-19页 |
| ·常用试剂和配方 | 第19-25页 |
| 2 仪器与设备 | 第25-27页 |
| 第三章 实验方法 | 第27-41页 |
| 1 细胞培养 | 第27-28页 |
| ·食管鳞状细胞癌细胞系(EC-1,EC-109和EC-9706)细胞复苏 | 第27页 |
| ·食管鳞状细胞癌细胞系(EC-1,EC-109和EC-9706)细胞传代 | 第27页 |
| ·食管鳞状细胞癌细胞系(EC-1,EC-109和EC-9706)细胞冻存 | 第27页 |
| ·食管鳞状细胞癌细胞系(EC-1,EC-109和EC-9706)细胞转染 | 第27-28页 |
| 2 RT-PCR | 第28-30页 |
| ·引物设计 | 第28页 |
| ·总RNA抽提 | 第28页 |
| ·总RNA检测 | 第28-29页 |
| ·逆转录 | 第29页 |
| ·荧光定量PCR | 第29-30页 |
| 3 DAC实验 | 第30页 |
| 4 Lucifersae检测 | 第30-31页 |
| 5 基因组DNA抽提 | 第31-32页 |
| 6 DNA甲基化分析 | 第32-34页 |
| ·亚硫酸氢盐修饰基因组 | 第32-33页 |
| ·半定量检测DNA甲基化水平 | 第33-34页 |
| 7 SDS-PAGE | 第34-35页 |
| 8 Western Blot | 第35页 |
| 9 EMSA | 第35-38页 |
| 10 ChIP实验 | 第38-39页 |
| ·引物设计 | 第38-39页 |
| ·实验步骤 | 第39页 |
| 11 TUNEL | 第39-40页 |
| 12 细胞周期检测 | 第40页 |
| 13 MTS法检测细胞增殖 | 第40页 |
| 14 克隆形成实验 | 第40-41页 |
| 第四章 结果与分析 | 第41-55页 |
| 1. FLJ22139在食管癌中的表达差异检测和启动子甲基化分析 | 第41-45页 |
| ·FLJ22139在食管癌中的表达差异检测结果 | 第41页 |
| ·FLJ22139启动子甲基化分析结果 | 第41-43页 |
| ·抑制CGI-131发生甲基化上调FLJ22139在食管鳞状细胞癌中的表达 | 第43-45页 |
| 2. FLJ22139对食管癌的功能分析 | 第45-48页 |
| ·FLJ22139对EC-1细胞增殖的影响 | 第45-47页 |
| ·FLJ22139对EC-1细胞周期的影响 | 第47页 |
| ·FLJ22139对EC-1细胞凋亡的影响 | 第47-48页 |
| 3. FLJ22139的表达调控分析 | 第48-55页 |
| ·MRTL与CGI-131的相互作用抑制FLJ22139的表达 | 第48-53页 |
| ·MRTL招募DNMT3A调控FLJ22139的转录 | 第53-55页 |
| 第五章 讨论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 在读期间发表论文和学术交流情况 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
