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广东舟山眼镜蛇(Naja naja atra)蛇毒心脏毒素和磷脂酶A2的分离纯化与性质鉴定

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
英文缩略词表第9-14页
第一章 绪论第14-30页
   ·序言第14页
   ·蛇毒中的毒素及活性因子概述第14-21页
     ·神经毒素(neurotoxin, NT)第14-17页
     ·心脏毒素(Cardiotoxin, CTX)第17-19页
     ·磷脂酶A_2 (Phospholipase A_2,PL_A2)第19-21页
   ·分离纯化原理及主要方法第21-28页
     ·层析前蛋白质预处理第22-23页
     ·离子交换层析第23-24页
     ·凝胶过滤第24-25页
     ·疏水层析第25页
     ·亲和层析第25-26页
     ·舟山眼镜蛇毒的分离纯化第26-28页
   ·本研究的目的和意义第28-29页
   ·技术路线第29-30页
第二章 眼镜蛇毒分离纯化方法的建立第30-40页
   ·实验材料第30-31页
     ·蛇毒第30页
     ·主要试剂第30页
     ·主要仪器第30-31页
   ·实验方法第31-34页
     ·蛇粗毒的预处理第31-32页
     ·初级分离纯化方法的建立第32页
     ·浓缩透析第32-33页
     ·二次纯化方法的建立第33-34页
     ·冷冻干燥第34页
     ·分离纯化方法适用性考察第34页
   ·结果与讨论第34-39页
     ·蛇粗毒的预处理第34页
     ·初级分离纯化方法的建立第34-36页
     ·二次分离纯化方法的建立第36-37页
     ·分离纯化方法适用性考察第37-39页
   ·小结第39-40页
第三章 眼镜蛇毒分离物的得率及纯度测定第40-47页
   ·实验材料第40-41页
     ·主要试剂第40页
     ·主要仪器第40-41页
   ·实验方法第41-44页
     ·BCA 法测定蛋白含量第41-42页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第42-44页
   ·结果与讨论第44-46页
     ·蛋白浓度及得率第44-45页
     ·SDS-PAGE第45-46页
     ·讨论第46页
   ·小结第46-47页
第四章 磷脂酶A_2(PLA_2)活性组分的性质鉴定第47-58页
   ·实验材料第47-48页
     ·蛇毒样品第47页
     ·主要试剂第47-48页
     ·主要仪器第48页
     ·实验动物第48页
     ·细胞株第48页
   ·实验方法第48-51页
     ·PLA_2 的纯度与分子量鉴定第48-49页
     ·心脏毒性鉴定(离体蛙心实验)第49-50页
     ·磷脂酶A_2 活性的测定第50页
     ·影响PLA_2 酶活性的因素分析第50页
     ·PLA_2 热稳定性的考察第50页
     ·细胞毒性的测定(MTT 法)第50-51页
   ·结果与讨论第51-56页
     ·PLA_2 的纯度与分子量鉴定第51-52页
     ·心脏毒性鉴定第52页
     ·磷脂酶A_2 活性测定第52-53页
     ·影响PLA_2 酶活性的因素分析第53-54页
     ·PLA_2 热稳定性考察第54-55页
     ·细胞毒性测定(MTT 法)第55页
     ·讨论第55-56页
   ·小结第56-58页
第五章 心脏毒素活性组分的性质鉴定第58-68页
   ·实验材料第58-59页
     ·蛇毒样品第58页
     ·主要试剂第58页
     ·主要仪器第58-59页
     ·实验动物第59页
     ·细胞株第59页
   ·实验方法第59-61页
     ·Gl3 的纯度测定(HPLC)第59页
     ·Gl3 的分子量测定(质谱法)第59页
     ·Gl3 的N 末端蛋白序列测定及同源性检索第59页
     ·急性毒性试验第59-60页
     ·镇痛活性测定第60-61页
     ·细胞毒性测定第61页
   ·结果与讨论第61-67页
     ·纯度测定(HPLC)第61页
     ·分子量鉴定第61-62页
     ·N 末端氨基酸序列测定及同源性检索第62-63页
     ·急性毒性实验第63-64页
     ·镇痛实验(热板法)第64-65页
     ·细胞毒性测定(MTT 法)第65-66页
     ·讨论第66-67页
   ·小结第67-68页
结论与展望第68-70页
 结论第68页
 展望第68-69页
 本文的创新之处第69-70页
参考文献第70-77页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第77-78页
致谢第78-79页
附件第79页

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