摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
英文缩略词表 | 第9-14页 |
第一章 绪论 | 第14-30页 |
·序言 | 第14页 |
·蛇毒中的毒素及活性因子概述 | 第14-21页 |
·神经毒素(neurotoxin, NT) | 第14-17页 |
·心脏毒素(Cardiotoxin, CTX) | 第17-19页 |
·磷脂酶A_2 (Phospholipase A_2,PL_A2) | 第19-21页 |
·分离纯化原理及主要方法 | 第21-28页 |
·层析前蛋白质预处理 | 第22-23页 |
·离子交换层析 | 第23-24页 |
·凝胶过滤 | 第24-25页 |
·疏水层析 | 第25页 |
·亲和层析 | 第25-26页 |
·舟山眼镜蛇毒的分离纯化 | 第26-28页 |
·本研究的目的和意义 | 第28-29页 |
·技术路线 | 第29-30页 |
第二章 眼镜蛇毒分离纯化方法的建立 | 第30-40页 |
·实验材料 | 第30-31页 |
·蛇毒 | 第30页 |
·主要试剂 | 第30页 |
·主要仪器 | 第30-31页 |
·实验方法 | 第31-34页 |
·蛇粗毒的预处理 | 第31-32页 |
·初级分离纯化方法的建立 | 第32页 |
·浓缩透析 | 第32-33页 |
·二次纯化方法的建立 | 第33-34页 |
·冷冻干燥 | 第34页 |
·分离纯化方法适用性考察 | 第34页 |
·结果与讨论 | 第34-39页 |
·蛇粗毒的预处理 | 第34页 |
·初级分离纯化方法的建立 | 第34-36页 |
·二次分离纯化方法的建立 | 第36-37页 |
·分离纯化方法适用性考察 | 第37-39页 |
·小结 | 第39-40页 |
第三章 眼镜蛇毒分离物的得率及纯度测定 | 第40-47页 |
·实验材料 | 第40-41页 |
·主要试剂 | 第40页 |
·主要仪器 | 第40-41页 |
·实验方法 | 第41-44页 |
·BCA 法测定蛋白含量 | 第41-42页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第42-44页 |
·结果与讨论 | 第44-46页 |
·蛋白浓度及得率 | 第44-45页 |
·SDS-PAGE | 第45-46页 |
·讨论 | 第46页 |
·小结 | 第46-47页 |
第四章 磷脂酶A_2(PLA_2)活性组分的性质鉴定 | 第47-58页 |
·实验材料 | 第47-48页 |
·蛇毒样品 | 第47页 |
·主要试剂 | 第47-48页 |
·主要仪器 | 第48页 |
·实验动物 | 第48页 |
·细胞株 | 第48页 |
·实验方法 | 第48-51页 |
·PLA_2 的纯度与分子量鉴定 | 第48-49页 |
·心脏毒性鉴定(离体蛙心实验) | 第49-50页 |
·磷脂酶A_2 活性的测定 | 第50页 |
·影响PLA_2 酶活性的因素分析 | 第50页 |
·PLA_2 热稳定性的考察 | 第50页 |
·细胞毒性的测定(MTT 法) | 第50-51页 |
·结果与讨论 | 第51-56页 |
·PLA_2 的纯度与分子量鉴定 | 第51-52页 |
·心脏毒性鉴定 | 第52页 |
·磷脂酶A_2 活性测定 | 第52-53页 |
·影响PLA_2 酶活性的因素分析 | 第53-54页 |
·PLA_2 热稳定性考察 | 第54-55页 |
·细胞毒性测定(MTT 法) | 第55页 |
·讨论 | 第55-56页 |
·小结 | 第56-58页 |
第五章 心脏毒素活性组分的性质鉴定 | 第58-68页 |
·实验材料 | 第58-59页 |
·蛇毒样品 | 第58页 |
·主要试剂 | 第58页 |
·主要仪器 | 第58-59页 |
·实验动物 | 第59页 |
·细胞株 | 第59页 |
·实验方法 | 第59-61页 |
·Gl3 的纯度测定(HPLC) | 第59页 |
·Gl3 的分子量测定(质谱法) | 第59页 |
·Gl3 的N 末端蛋白序列测定及同源性检索 | 第59页 |
·急性毒性试验 | 第59-60页 |
·镇痛活性测定 | 第60-61页 |
·细胞毒性测定 | 第61页 |
·结果与讨论 | 第61-67页 |
·纯度测定(HPLC) | 第61页 |
·分子量鉴定 | 第61-62页 |
·N 末端氨基酸序列测定及同源性检索 | 第62-63页 |
·急性毒性实验 | 第63-64页 |
·镇痛实验(热板法) | 第64-65页 |
·细胞毒性测定(MTT 法) | 第65-66页 |
·讨论 | 第66-67页 |
·小结 | 第67-68页 |
结论与展望 | 第68-70页 |
结论 | 第68页 |
展望 | 第68-69页 |
本文的创新之处 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-77页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第77-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
附件 | 第79页 |