| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第11-21页 |
| 1.1 CNTN1基因 | 第11-14页 |
| 1.1.1 CNTN1基因的结构 | 第11-12页 |
| 1.1.2 CNTN1基因在非肿瘤疾病中的作用 | 第12页 |
| 1.1.3 CNTN1基因与肿瘤的关系 | 第12-13页 |
| 1.1.4 CNTN1基因在肿瘤中的作用机制 | 第13-14页 |
| 1.2 PI3K/Akt信号通路与肿瘤 | 第14-19页 |
| 1.3 RNAi | 第19-20页 |
| 1.3.1 RNAi的发现 | 第19页 |
| 1.3.2 RNAi作用机制 | 第19-20页 |
| 1.4 本实验研究目的及意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-25页 |
| 2.1.1 菌株、质粒和细胞系 | 第21页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第21页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第21-23页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制 | 第23-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-30页 |
| 2.2.1 犬乳腺肿瘤细胞的复苏、传代及冻存 | 第25页 |
| 2.2.2 犬乳腺肿瘤细胞的转染 | 第25页 |
| 2.2.3 sh RNA质粒转化及菌液保种 | 第25-26页 |
| 2.2.4 sh RNA质粒的提取 | 第26页 |
| 2.2.5 细胞总蛋白提取 | 第26-27页 |
| 2.2.6 BCA法测定蛋白浓度 | 第27页 |
| 2.2.7 Western blot检测细胞转染前后各蛋白含量的变化 | 第27-28页 |
| 2.2.8 CCK8法检测细胞增殖能力 | 第28页 |
| 2.2.9 细胞平板克隆形成实验检测单个细胞增殖能力 | 第28页 |
| 2.2.10 细胞划痕实验检测细胞迁移能力 | 第28-29页 |
| 2.2.11 细胞凋亡实验检测细胞凋亡水平 | 第29页 |
| 2.2.12 实验数据的分析与统计 | 第29-30页 |
| 3 实验结果 | 第30-41页 |
| 3.1 犬乳腺肿瘤细胞CNTN1基因沉默效果 | 第30页 |
| 3.2 转染的CHMm细胞CNTN1基因的表达 | 第30-31页 |
| 3.3 CNTN1基因沉默对CHMm细胞增殖的影响 | 第31-32页 |
| 3.4 CNTN1基因沉默对CHMm细胞凋亡的影响 | 第32-33页 |
| 3.5 CNTN1沉默对CHMm细胞迁移能力的影响 | 第33-35页 |
| 3.6 CNTN1基因沉默对CHMm细胞Akt信号通路相关蛋白影响 | 第35-41页 |
| 3.6.1 CNTN1基因对CHMm细胞中Akt信号通路的影响 | 第35-36页 |
| 3.6.2 CNTN1基因沉默对CHMm细胞Akt通路凋亡蛋白影响 | 第36-37页 |
| 3.6.3 CNTN1沉默对CHMm细胞Akt通路周期蛋白表达的影响 | 第37-39页 |
| 3.6.4 CNTN1基因沉默对CHMm细胞Akt通路转移蛋白表达的影响 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-46页 |
| 4.1 RNAi技术的优势 | 第41页 |
| 4.2 CNTN1基因作为肿瘤治疗的新靶点 | 第41-42页 |
| 4.3 CNTN1基因沉默下调AKT信号通路 | 第42页 |
| 4.4 CNTN1基因沉默通过Akt通路调节细胞凋亡 | 第42-43页 |
| 4.5 CNTN1基因沉默通过Akt通路调节细胞周期 | 第43页 |
| 4.6 CNTN1基因沉默通过Akt通路调节细胞转移 | 第43-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-59页 |
| 附录 | 第59-60页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第60页 |
