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三嵌段聚合物胶束共转运阿霉素和siRNA用于逆转耐药和协同抗癌的研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
引言第11-29页
第一章 嵌段聚合物载体的合成第29-41页
    材料第29-30页
    方法与结果第30-39页
        一、聚合物的合成与表征第30-34页
            1. 聚合物的合成第30-31页
            2. 聚合物的表征第31-34页
        二、聚合物理化性质的分析第34-36页
            1. 临界胶束浓度(CMC)的测定第34-36页
            2. 粒径和表面电位测定第36页
        三、聚合物的安全性评价第36-39页
            1. 体外溶血实验第36-38页
            2. 细胞毒性试验第38-39页
    讨论与小结第39-41页
第二章 载药胶束的制备及细胞摄取特性研究第41-62页
    材料第41-42页
    方法与结果第42-60页
        一、Dox-micelle的制备及工艺优化第42-51页
            1. 分析方法第42-44页
            2. Dox-micelle的制备方法第44-45页
            3. Dox-micelle的质量评价第45-46页
            4. Dox-micelle制备工艺的优化第46-49页
            5. Dox-micelle的体外释放第49-51页
        二、Dox-micelle的细胞摄取特性第51-55页
            1. 流式细胞术检测Dox-micelle的细胞摄取第51-52页
            2. 激光共聚焦显微镜观察Dox-micelle在细胞内的摄入与分布第52-53页
            3. 载药胶束的细胞内吞机制研究第53-55页
        三、细胞间P-gp的传递作用第55-60页
            1. Dox-micelle的细胞毒性第55-56页
            2. MTT实验考察细胞间P-gp的传递第56页
            3. 流式细胞术观察细胞间P-gp的传递第56-57页
            4. 激光共聚焦显微镜观察细胞间P-gp的传递第57-58页
            5. RT-PCR及Western blot分析细胞间P-gp的传递第58-60页
    讨论与小结第60-62页
第三章 聚合物胶束递送siRNA沉默靶基因的研究第62-78页
    材料第62-63页
    方法与结果第63-76页
        一、siRNA-micelle理化性质的研究第63-70页
            1. 琼脂糖凝胶电泳试验检验胶束结合siRNA的能力第63-64页
            2. siRNA-micelle的肝素解络试验第64-65页
            3. siRNA-micelle血清稳定学试验第65-66页
            4. RNase酶稳定性评价第66-67页
            5. 荧光替代(EB displacement)实验第67-68页
            6. siRNA-micelle的体外释放第68-69页
            7. MTT试验检测si RNA-micelle的生物相容性第69-70页
        二、siRNA-micelle的细胞摄取与亚细胞分布第70-72页
            1. 流式细胞术检测siRNA-micelle的细胞摄取第70-71页
            2. 激光共聚焦显微镜观察siRNA-micelle在细胞内的摄入与分布第71-72页
        三、siRNA-micelle下调P-gp表达的研究第72-76页
            1. RT-PCR技术分析细胞内mdr1 mRNA的表达第72-74页
            2. Western blot分析细胞内P-gp的表达第74-76页
    讨论与小结第76-78页
第四章 聚合物胶束共转运阿霉素和siRNA的研究第78-97页
    材料第78-79页
    方法与结果第79-95页
        一、siRNA-Dox-micell理化性质的考察第79-81页
            1. siRNA-Dox-micelle的制备与表征第79-80页
            2. siRNA-Dox-micelle稳定性考察第80-81页
        二、siRNA-Dox-micelle的细胞摄取特性第81-86页
            1. 双色流式细胞术考察Dox和siRNA的共转运第81-82页
            2. 激光共聚焦显微镜观察Dox-siRNA-micelle在细胞内的摄入与分布第82-83页
            3. 活细胞工作站观察Dox-siRNA-micelle在细胞内的累积与分布第83-84页
            4. 定量测定Dox在细胞内的摄取动力学第84-86页
        三、Dox-siRNA-micell的体外药效学考察第86-91页
            1. MTT法考察给药时间间隔及siRNA浓度对体外药效学的影响第86-88页
            2. MTT法考察不同Dox制剂的细胞毒性第88-90页
            3. 激光共聚焦显微镜和流式细胞仪考察细胞内Dox的累积第90-91页
        四、体内药效学与靶向性考察第91-95页
            1. siRNA-Dox-micelle的体内药效学第91-93页
            2. 近红外小动物成像研究siRNA-Dox-micelle的体内靶向性第93-95页
    讨论与小结第95-97页
全文总结第97-100页
参考文献第100-112页
攻读学位期间发表的论文与其它第112-114页
英文缩略词表第114-115页
致谢第115-116页

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