中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
引言 | 第11-29页 |
第一章 嵌段聚合物载体的合成 | 第29-41页 |
材料 | 第29-30页 |
方法与结果 | 第30-39页 |
一、聚合物的合成与表征 | 第30-34页 |
1. 聚合物的合成 | 第30-31页 |
2. 聚合物的表征 | 第31-34页 |
二、聚合物理化性质的分析 | 第34-36页 |
1. 临界胶束浓度(CMC)的测定 | 第34-36页 |
2. 粒径和表面电位测定 | 第36页 |
三、聚合物的安全性评价 | 第36-39页 |
1. 体外溶血实验 | 第36-38页 |
2. 细胞毒性试验 | 第38-39页 |
讨论与小结 | 第39-41页 |
第二章 载药胶束的制备及细胞摄取特性研究 | 第41-62页 |
材料 | 第41-42页 |
方法与结果 | 第42-60页 |
一、Dox-micelle的制备及工艺优化 | 第42-51页 |
1. 分析方法 | 第42-44页 |
2. Dox-micelle的制备方法 | 第44-45页 |
3. Dox-micelle的质量评价 | 第45-46页 |
4. Dox-micelle制备工艺的优化 | 第46-49页 |
5. Dox-micelle的体外释放 | 第49-51页 |
二、Dox-micelle的细胞摄取特性 | 第51-55页 |
1. 流式细胞术检测Dox-micelle的细胞摄取 | 第51-52页 |
2. 激光共聚焦显微镜观察Dox-micelle在细胞内的摄入与分布 | 第52-53页 |
3. 载药胶束的细胞内吞机制研究 | 第53-55页 |
三、细胞间P-gp的传递作用 | 第55-60页 |
1. Dox-micelle的细胞毒性 | 第55-56页 |
2. MTT实验考察细胞间P-gp的传递 | 第56页 |
3. 流式细胞术观察细胞间P-gp的传递 | 第56-57页 |
4. 激光共聚焦显微镜观察细胞间P-gp的传递 | 第57-58页 |
5. RT-PCR及Western blot分析细胞间P-gp的传递 | 第58-60页 |
讨论与小结 | 第60-62页 |
第三章 聚合物胶束递送siRNA沉默靶基因的研究 | 第62-78页 |
材料 | 第62-63页 |
方法与结果 | 第63-76页 |
一、siRNA-micelle理化性质的研究 | 第63-70页 |
1. 琼脂糖凝胶电泳试验检验胶束结合siRNA的能力 | 第63-64页 |
2. siRNA-micelle的肝素解络试验 | 第64-65页 |
3. siRNA-micelle血清稳定学试验 | 第65-66页 |
4. RNase酶稳定性评价 | 第66-67页 |
5. 荧光替代(EB displacement)实验 | 第67-68页 |
6. siRNA-micelle的体外释放 | 第68-69页 |
7. MTT试验检测si RNA-micelle的生物相容性 | 第69-70页 |
二、siRNA-micelle的细胞摄取与亚细胞分布 | 第70-72页 |
1. 流式细胞术检测siRNA-micelle的细胞摄取 | 第70-71页 |
2. 激光共聚焦显微镜观察siRNA-micelle在细胞内的摄入与分布 | 第71-72页 |
三、siRNA-micelle下调P-gp表达的研究 | 第72-76页 |
1. RT-PCR技术分析细胞内mdr1 mRNA的表达 | 第72-74页 |
2. Western blot分析细胞内P-gp的表达 | 第74-76页 |
讨论与小结 | 第76-78页 |
第四章 聚合物胶束共转运阿霉素和siRNA的研究 | 第78-97页 |
材料 | 第78-79页 |
方法与结果 | 第79-95页 |
一、siRNA-Dox-micell理化性质的考察 | 第79-81页 |
1. siRNA-Dox-micelle的制备与表征 | 第79-80页 |
2. siRNA-Dox-micelle稳定性考察 | 第80-81页 |
二、siRNA-Dox-micelle的细胞摄取特性 | 第81-86页 |
1. 双色流式细胞术考察Dox和siRNA的共转运 | 第81-82页 |
2. 激光共聚焦显微镜观察Dox-siRNA-micelle在细胞内的摄入与分布 | 第82-83页 |
3. 活细胞工作站观察Dox-siRNA-micelle在细胞内的累积与分布 | 第83-84页 |
4. 定量测定Dox在细胞内的摄取动力学 | 第84-86页 |
三、Dox-siRNA-micell的体外药效学考察 | 第86-91页 |
1. MTT法考察给药时间间隔及siRNA浓度对体外药效学的影响 | 第86-88页 |
2. MTT法考察不同Dox制剂的细胞毒性 | 第88-90页 |
3. 激光共聚焦显微镜和流式细胞仪考察细胞内Dox的累积 | 第90-91页 |
四、体内药效学与靶向性考察 | 第91-95页 |
1. siRNA-Dox-micelle的体内药效学 | 第91-93页 |
2. 近红外小动物成像研究siRNA-Dox-micelle的体内靶向性 | 第93-95页 |
讨论与小结 | 第95-97页 |
全文总结 | 第97-100页 |
参考文献 | 第100-112页 |
攻读学位期间发表的论文与其它 | 第112-114页 |
英文缩略词表 | 第114-115页 |
致谢 | 第115-116页 |