摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 绪论 | 第10-19页 |
1.1 马立克氏病研究概况 | 第10-11页 |
1.2 miRNA研究概述 | 第11-15页 |
1.2.1 miRNA的生成与作用机制 | 第11-12页 |
1.2.2 miRNA在适应性免疫中的作用 | 第12-13页 |
1.2.3 miRNA在先天免疫中的作用 | 第13页 |
1.2.4 miRNA在自身免疫中的作用 | 第13-14页 |
1.2.5 miRNA在感染性疾病中的作用 | 第14页 |
1.2.6 miRNA在癌症中的作用 | 第14-15页 |
1.3 miRNA在马立克氏病中的研究概况 | 第15页 |
1.4 miR-21 与肿瘤发生的研究概述 | 第15-17页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第17-19页 |
第2章 gga-miR215p和gga-miR-146b-5p表达规律分析 | 第19-26页 |
2.1 材料和方法 | 第19-22页 |
2.1.1 实验动物与毒株 | 第19页 |
2.1.2 主要试剂 | 第19页 |
2.1.3 主要仪器与设备 | 第19页 |
2.1.4 引物设计与合成 | 第19-21页 |
2.1.5 数据分析 | 第21-22页 |
2.2 结果 | 第22-26页 |
2.2.1 gga-miR215p与gga-miR1465p实时荧光定量PCR验证高通量测序结果 | 第22页 |
2.2.2 gga-miR215p和gga-miR-146b-5p在法氏囊中的表达规律分析 | 第22-23页 |
2.2.3 gga-miR215p和gga-miR-146b-5p在脾脏中的表达规律分析 | 第23-26页 |
第3章 gga-miR215p和gga-miR-146b-5p靶基因筛选及体外验证 | 第26-40页 |
3.1 材料和方法 | 第26-27页 |
3.1.1 细胞 | 第26页 |
3.1.2 主要试剂 | 第26页 |
3.1.3 主要仪器与设备 | 第26-27页 |
3.2 方法 | 第27-35页 |
3.2.1 miRNA靶基因生物学预测 | 第27页 |
3.2.2 引物设计与合成 | 第27-29页 |
3.2.3 预测靶基因 3’-UTR区序列扩增鉴定 | 第29页 |
3.2.4 候选靶基因表达载体构建 | 第29-31页 |
3.2.5 双荧光素酶实验 | 第31-32页 |
3.2.6 候选靶基因突变载体构建 | 第32-34页 |
3.2.7 Western blot | 第34-35页 |
3.2.8 数据分析 | 第35页 |
3.3 结果 | 第35-40页 |
3.3.1 靶基因预测结果 | 第35页 |
3.3.2 候选把基因扩增结果 | 第35-37页 |
3.3.3 突变载体的构建 | 第37页 |
3.3.4 双荧光素酶实验结果 | 第37页 |
3.3.5 Wstern blot结果 | 第37-40页 |
第4章 gga-miRNA215p对MSB-1 细胞增殖和迁移的影响 | 第40-45页 |
4.1 材料和方法 | 第40页 |
4.1.1 细胞 | 第40页 |
4.1.2 主要试剂 | 第40页 |
4.1.3 主要仪器与设备 | 第40页 |
4.2 方法 | 第40-43页 |
4.2.1 细胞培养 | 第40-41页 |
4.2.2 细胞转染及分组 | 第41页 |
4.2.3 细胞增殖实验 | 第41-42页 |
4.2.4 细胞迁移实验 | 第42-43页 |
4.3 实验结果 | 第43-45页 |
4.3.1 gga-miR215p对MSB-1 细胞增殖的影响 | 第43-44页 |
4.3.2 gga-miR215p对MSB-1 细胞迁移的影响 | 第44-45页 |
第5章 讨论 | 第45-48页 |
第6章 结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
攻读学位期间发表论文 | 第63页 |