中英文缩略词表 | 第6-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
第一部分 尾侧型同源转录因子2慢病毒载体的构建及其转染骨髓间充质干细胞 | 第14-40页 |
1 引言 | 第14页 |
2 材料和方法 | 第14-30页 |
2.1 主要试剂与仪器 | 第14-16页 |
2.2 目的基因获取、扩增及鉴定 | 第16-17页 |
2.3 重组Ubi-CDX2-MCS-3FLAG-CMV-EGFP GV365质粒的构建与鉴定 | 第17-20页 |
2.4 Western blot检测质粒载体的表达 | 第20-23页 |
2.5 慢病毒的包装与浓缩 | 第23-24页 |
2.6 荧光法测定慢病毒滴度 | 第24-25页 |
2.7 大鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养与鉴定 | 第25-26页 |
2.8 慢病毒转染大鼠BMSCs及分组 | 第26页 |
2.9 RT-PCR及Western Blot技术检测大鼠BMSCs中CDX2基因的表达 | 第26-30页 |
2.10 统计学方法 | 第30页 |
3 结果 | 第30-36页 |
3.1 目的基因PCR扩增产物的鉴定 | 第30-31页 |
3.2 重组Ubi-CDX2-MCS-3FLAG-CMV-EGFP质粒的鉴定 | 第31-33页 |
3.3 慢病毒浓缩后滴度测定 | 第33页 |
3.4 大鼠BMSCs的培养及流式细胞术鉴定结果 | 第33-34页 |
3.5 慢病毒转染大鼠BMSCs的荧光表达 | 第34页 |
3.6 RT-PCR及Western Blot检测大鼠BMSCs中CDX2的表达 | 第34-36页 |
4 讨论 | 第36-38页 |
5 结论 | 第38页 |
6 参考文献 | 第38-40页 |
第二部分 CDX2基因过表达对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠组织中MUC2蛋白的作用 | 第40-67页 |
1 引言 | 第40-42页 |
2 材料与方法 | 第42-51页 |
2.1 实验动物 | 第42页 |
2.2 实验试剂与器材 | 第42-44页 |
2.3 病毒转染后细胞免疫表型鉴定 | 第44页 |
2.4 UC模型的建立、分组处理及大鼠疾病活动指数(DAI)评分 | 第44-45页 |
2.5 结肠组织取材及检测 | 第45-47页 |
2.6 逆转录PCR技术定性检测SRY基因的表达; | 第47-48页 |
2.7 荧光定量PCR检测结肠组织中CDX2 mRNA水平; | 第48-49页 |
2.8 Western Blot技术检测结肠组织中CDX2与MUC2蛋白的表达水平 | 第49-51页 |
2.9 统计学方法 | 第51页 |
3 结果 | 第51-57页 |
3.1 慢病毒转染后细胞的鉴定 | 第51-52页 |
3.2 大鼠溃疡性结肠炎模型的建立及不同组别DAI评分 | 第52-53页 |
3.3 结肠组织的病理改变及冰冻切片中EGFP荧光蛋白的表达情况 | 第53-54页 |
3.4 SRY基因的逆转录PCR定性检测 | 第54-55页 |
3.5 荧光定量PCR技术定量检测大鼠结肠组织中CDX2基因的表达 | 第55-56页 |
3.6 WB技术检测CDX2和MUC2蛋白的表达 | 第56-57页 |
4 讨论 | 第57-62页 |
4.1 肠粘膜屏障与肠道炎症的关系 | 第57-58页 |
4.2 溃疡性结肠炎的机制及治疗 | 第58页 |
4.3 慢病毒及骨髓间充质干细胞工具的应用 | 第58-59页 |
4.4 溃疡性结肠炎模型的构建 | 第59页 |
4.5 干细胞移植成功 | 第59-60页 |
4.6 CDX2基因过表达对大鼠UC症状、病理的改善及其作用机制 | 第60-61页 |
4.7 CDX2基因过表达对MUC2蛋白的作用 | 第61-62页 |
5 结论 | 第62页 |
6 参考文献 | 第62-67页 |
附录 | 第67-68页 |
1 本人简历 | 第67页 |
2 在学期间的研究成果 | 第67页 |
3 致谢 | 第67-68页 |
综述 CDX2与消化道疾病的关系 | 第68-82页 |
1 CDX2基因在正常胚胎和成人体内表达 | 第69-70页 |
1.1 CDX2在胚胎中的表达 | 第69-70页 |
1.2 CDX2在肠道发育和成熟中的作用 | 第70页 |
2 CDX2在食管和胃肠道中的作用 | 第70-77页 |
2.1 CDX2与食管病变的关系 | 第70-72页 |
2.2 CDX2与胃部病变的关系 | 第72-74页 |
2.3 CDX2与肠道病变的关系 | 第74-77页 |
3 展望 | 第77页 |
4 参考文献 | 第77-82页 |