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血清4型Ⅰ群禽腺病毒的分离鉴定及流行病学调查

中文摘要第10-12页
ABSTRACT第12-14页
1. 前言第15-25页
    1.1 病原学第15-17页
        1.1.1 I群禽腺病毒分类第15页
        1.1.2 I群禽腺病毒的病原特征第15-16页
        1.1.3 基因组功能第16-17页
    1.2 I群禽腺病毒的流行特点第17-18页
    1.3 I群禽腺病毒的致病性第18-19页
        1.3.1 主要临床症状第18页
        1.3.2 主要剖检变化第18-19页
        1.3.3 组织病理学变化第19页
    1.4 I群禽腺病毒的诊断第19-23页
        1.4.1 血清学检测方法第19-20页
            1.4.1.1 酶联免疫吸附试验第19-20页
            1.4.1.2 琼脂凝胶扩散试验第20页
        1.4.2 分子生物学检测技术第20-23页
            1.4.2.1 PCR检测技术第20-21页
            1.4.2.2 荧光定量PCR检测技术第21-22页
            1.4.2.3 LAMP检测技术第22页
            1.4.2.4 PCR-RFLP诊断技术第22-23页
            1.4.2.5 核酸探针检测技术第23页
    1.5 I群禽腺病毒的防治第23-24页
    1.6 研究目的及意义第24-25页
2. 材料与方法第25-34页
    2.1 试验材料第25-26页
        2.1.1 试验试剂第25页
        2.1.2 试验仪器第25页
        2.1.3 主要试剂配制第25-26页
        2.1.4 鸡胚及菌株第26页
        2.1.5 病毒标准株第26页
    2.2 试验方法第26-34页
        2.2.1 病毒的分离鉴定第26-30页
            2.2.1.1 病料处理与病毒的传代第26页
            2.2.1.2 引物设计第26-27页
            2.2.1.3 病毒DNA的提取和PCR鉴定第27-30页
            2.2.1.4 血凝试验第30页
            2.2.1.5 病毒的毒力和致病力第30页
            2.2.1.6 临床症状及病理变化第30页
            2.2.1.7 抗体水平检测第30页
            2.2.1.8 动物回归试验第30页
        2.2.2 血清4型I群禽腺病毒Taqman荧光定量PCR方法的建立第30-32页
            2.2.2.1 引物与探针的设计合成第30-31页
            2.2.2.2 阳性质粒标准品的制备第31页
            2.2.2.3 Taqman荧光定量PCR反应条件的优化第31-32页
            2.2.2.4 最佳退火温度的优化第32页
            2.2.2.5 标准曲线的建立第32页
            2.2.2.6 特异性试验第32页
            2.2.2.7 敏感性试验第32页
            2.2.2.8 重复性试验第32页
            2.2.2.9 临床样品检测第32页
        2.2.3. 血清4型I群禽腺病毒的流行病学调查第32-34页
            2.2.3.1 病料采集第32页
            2.2.3.2 引物的设计与合成第32-33页
            2.2.3.3 病毒核酸的提取第33页
            2.2.3.4 病毒PCR扩增第33页
            2.2.3.5 结果统计第33-34页
3. 结果第34-47页
    3.1 病毒的分离鉴定结果第34-38页
        3.1.1 病料的剖检变化第34页
        3.1.2 组织病理学变化第34-35页
        3.1.3 分离株的毒力测定第35-36页
        3.1.4 血凝试验结果第36页
        3.1.5 Hexon基因序列分析第36-37页
        3.1.6 抗体检测结果第37页
        3.1.7 动物回归试验第37-38页
    3.2 血清4型I群禽腺病毒Taqman荧光定量PCR方法的建立结果第38-42页
        3.2.1 重组质粒的PCR鉴定及其测序鉴定结果第38-39页
        3.2.2 Taqman荧光定量PCR反应条件的优化第39页
        3.2.3 Taqman荧光定量PCR标准曲线的建立第39-40页
        3.2.4 特异性试验结果第40页
        3.2.5 敏感性试验结果第40-41页
        3.2.6 重复性试验结果第41-42页
        3.2.7 临床样品检测结果第42页
    3.3 血清4型I群禽腺病毒的流行病学调查结果第42-47页
        3.3.1 FAV4感染情况第42页
        3.3.2 蛋(种)鸡感染FAV4的病毒混合感染情况第42-44页
        3.3.3 商品鸡感染FAV4的病毒混合感染情况第44-45页
        3.3.4 蛋(种)鸭感染FAV4的病毒混合感染情况第45-46页
        3.3.5 商品鸭感染FAV4的病毒混合感染情况第46-47页
4. 讨论第47-52页
5. 结论第52-53页
参考文献第53-61页
致谢第61-62页
攻读硕士学位期间发表论文情况第62-63页

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