| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-29页 |
| 1.1 开花关键整合子 | 第11-16页 |
| 1.1.1 FT | 第13页 |
| 1.1.2 SOC1/AGL24 | 第13-15页 |
| 1.1.3 FLC/SVP | 第15-16页 |
| 1.1.4 FUL | 第16页 |
| 1.2 启动子克隆主要方法 | 第16-19页 |
| 1.2.1 基因组文库筛选法 | 第17页 |
| 1.2.2 启动子探针型载体筛选法 | 第17-18页 |
| 1.2.3 染色体步移法 | 第18-19页 |
| 1.3 启动子功能分析的生物信息学法 | 第19-20页 |
| 1.3.1 Plant CARE | 第19页 |
| 1.3.2 PLACE | 第19-20页 |
| 1.3.3 Plant Prom DB | 第20页 |
| 1.4 DNA与蛋白相互作用的主要研究方法 | 第20-24页 |
| 1.4.1 凝胶阻滞实验 | 第20-21页 |
| 1.4.2 染色质免疫沉淀技术 | 第21页 |
| 1.4.3 酵母单杂交技术 | 第21-24页 |
| 1.5 开花关键基因与蛋白相互作用机理研究进展 | 第24-25页 |
| 1.6 基因研究技术 | 第25-29页 |
| 1.6.1 基因超量表达或异位表达技术 | 第25-26页 |
| 1.6.2 基因反义表达技术 | 第26页 |
| 1.6.3 RNA干扰技术 | 第26-27页 |
| 1.6.4 基因敲除 | 第27-29页 |
| 第2章 引言 | 第29-31页 |
| 第3章 芥菜开花整合子AGL24启动子克隆与生物信息学分析 | 第31-48页 |
| 3.1 材料 | 第31页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第31页 |
| 3.1.2 菌株与载体质粒 | 第31页 |
| 3.1.3 试验试剂及试剂盒 | 第31页 |
| 3.1.4 主要实验仪器 | 第31页 |
| 3.2 方法 | 第31-37页 |
| 3.2.1 实验试剂和培养基的配制 | 第31-32页 |
| 3.2.2 芥菜基因组DNA的提取 | 第32-33页 |
| 3.2.3 AGL24基因的克隆 | 第33页 |
| 3.2.4 AGL24启动子克隆与生物信息学分析 | 第33-37页 |
| 3.3 结果与分析 | 第37-48页 |
| 3.3.1 芥菜基因组DNA的电泳检测 | 第37-38页 |
| 3.3.2 AGL24 DNA的克隆 | 第38页 |
| 3.3.3 AGL24启动子的克隆 | 第38-39页 |
| 3.3.4 AGL24启动子的序列分析 | 第39-46页 |
| 3.3.5 AGL24启动子的分段 | 第46-48页 |
| 第4章 芥菜AGL24启动子截短体与SOC1蛋白的相互作用 | 第48-60页 |
| 4.1 材料 | 第48页 |
| 4.1.1 菌株及载体质粒 | 第48页 |
| 4.1.2 试验试剂 | 第48页 |
| 4.1.3 主要实验仪器 | 第48页 |
| 4.2 方法 | 第48-55页 |
| 4.2.1 试验试剂与培养基配制 | 第48-49页 |
| 4.2.2 AGL24 pro 3 个亚克隆片段和SOC1的引物设计 | 第49-50页 |
| 4.2.3 AGL24 pro分段亚克隆和SOC1的亚克隆 | 第50页 |
| 4.2.4 酵母单杂表达载体的构建 | 第50-52页 |
| 4.2.5 酵母感受态细胞的制备和转化 | 第52-54页 |
| 4.2.6 酵母菌株AbA抗性浓度的筛选 | 第54页 |
| 4.2.7 AGL24 pro的3个截短体与SOC1蛋白相互作用检测 | 第54-55页 |
| 4.3 结果与分析 | 第55-60页 |
| 4.3.1 芥菜AGL24 pro分段亚克隆和SOC1的亚克隆 | 第55页 |
| 4.3.2 酵母表达载体的鉴定 | 第55-57页 |
| 4.3.3 酵母菌株AbA抗性浓度的筛选 | 第57-58页 |
| 4.3.4 酵母单杂交相互作用检测 | 第58-60页 |
| 第5章 SOC1正反义载体构建及转化芥菜 | 第60-72页 |
| 5.1 材料 | 第60页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第60页 |
| 5.1.2 菌株与载体质粒 | 第60页 |
| 5.1.3 试验试剂 | 第60页 |
| 5.1.4 主要试验仪器 | 第60页 |
| 5.2 方法 | 第60-65页 |
| 5.2.1 试验试剂和培养基的配制 | 第60-61页 |
| 5.2.2 芥菜SOC1基因的亚克隆 | 第61-62页 |
| 5.2.3 芥菜SOC1正反义转基因载体构建 | 第62-63页 |
| 5.2.4 芥菜SOC1正反义表达载体转化农杆菌 | 第63页 |
| 5.2.5 农杆菌介导法转化芥菜 | 第63-65页 |
| 5.2.6 芥菜SOC1正反义转基因植株的检测 | 第65页 |
| 5.3 结果与分析 | 第65-72页 |
| 5.3.1 芥菜SOC1基因亚克隆 | 第65-66页 |
| 5.3.2 芥菜SOC1正反义表达载体鉴定 | 第66-68页 |
| 5.3.3 芥菜SOC1正反义表达载体转化农杆菌鉴定 | 第68页 |
| 5.3.4 芥菜SOC1正反义转基因植株的鉴定 | 第68-72页 |
| 第6章 结论与创新点 | 第72-74页 |
| 6.1 结论 | 第72页 |
| 6.1.1 获得芥菜开花整合子AGL24的启动子 | 第72页 |
| 6.1.2 成功构建AGL24启动子的截短体以及SOC1的酵母重组表达载体 | 第72页 |
| 6.1.3 获得了 SOC1 蛋白与 AGL24 启动子相互作用的区段 | 第72页 |
| 6.1.4 获得芥菜SOC1正反义转基因植株 | 第72页 |
| 6.2 本实验创新点 | 第72-73页 |
| 6.3 下一步研究计划 | 第73-74页 |
| 第7章 讨论与展望 | 第74-76页 |
| 7.1 芥菜AGL24启动子的特征 | 第74-75页 |
| 7.2 利用酵母单杂交系统探讨芥菜AGL24启动子与SOC1蛋白互作 | 第75页 |
| 7.3 芥菜SOC1正反义转基因 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-86页 |
| 附录 | 第86-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 在学期间发表的文章 | 第91-92页 |
| 参加的研究项目 | 第92页 |
