摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略语表 | 第10-12页 |
1 文献综述 | 第12-22页 |
1.1 弓形虫病及危害 | 第12-13页 |
1.2 弓形虫生活史 | 第13-14页 |
1.3 弓形虫与宿主免疫应答 | 第14-15页 |
1.4 弓形虫速殖子和缓殖子的体内外转化 | 第15-17页 |
1.4.1 弓形虫速殖子和缓殖子的体内转化 | 第15-16页 |
1.4.2 弓形虫速殖子和缓殖子的体外转化 | 第16-17页 |
1.5 弓形虫速殖子和缓殖子的差异 | 第17-19页 |
1.5.1 弓形虫速殖子和缓殖子形态结构上的差异 | 第17页 |
1.5.2 弓形虫速殖子和缓殖子分子水平上的差异 | 第17-19页 |
1.6 应激与机体免疫调节 | 第19-22页 |
1.6.1 应激与运输应激 | 第19页 |
1.6.2 应激与机体免疫调节 | 第19-20页 |
1.6.3 应激与疾病预后 | 第20-22页 |
2 研究目的与意义 | 第22-23页 |
3 材料与方法 | 第23-35页 |
3.1 实验材料 | 第23-26页 |
3.1.1 实验动物 | 第23页 |
3.1.2 弓形虫虫株 | 第23页 |
3.1.3 主要试剂 | 第23页 |
3.1.4 ELISA缓冲液 | 第23-24页 |
3.1.5 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)缓冲液 | 第24页 |
3.1.6 双向电泳试剂 | 第24-25页 |
3.1.7 酶标二抗 | 第25页 |
3.1.8 主要仪器 | 第25-26页 |
3.2 实验方法 | 第26-35页 |
3.2.1 PCR引物的设计和合成 | 第26页 |
3.2.2 弓形虫PRU株组织包囊的动物接种与收集纯化 | 第26-27页 |
3.2.3 运输应激的模拟 | 第27页 |
3.2.4 Total RNA的提取 | 第27-28页 |
3.2.5 Real-time PCR检测弓形虫BAG1 和SAG1 基因mRN A相对水平 | 第28-29页 |
3.2.6 TCA-酚法提取蛋白 | 第29-30页 |
3.2.7 蛋白质浓度定量测定 | 第30页 |
3.2.8 模拟运输应激对弓形虫慢性感染小鼠细胞因子的影响 | 第30-31页 |
3.2.9 双向电泳实验样品的收集与处理 | 第31-32页 |
3.2.10 弓形虫包囊蛋白的双向电泳分析 | 第32-33页 |
3.2.11 双向电泳数据分析 | 第33页 |
3.2.12 差异蛋白的质谱分析 | 第33-34页 |
3.2.13 质谱结果分析鉴定 | 第34页 |
3.2.14 差异蛋白的Real-time PCR验证 | 第34-35页 |
4 结果与分析 | 第35-50页 |
4.1 弓形虫PRU株脑组织包囊的纯化与收集 | 第35页 |
4.2 弓形虫PRU株慢性感染小鼠模型的建立 | 第35-36页 |
4.3 运输应激诱发慢性感染小鼠脑组织包囊的再活化 | 第36-38页 |
4.4 运输应激条件下弓形虫慢性感染小鼠细胞因子的检测 | 第38-40页 |
4.4.1 荧光信号的采集 | 第38页 |
4.4.2 弓形虫慢性感染小鼠细胞因子的变化 | 第38-39页 |
4.4.3 运输应激条件下弓形虫慢性感染小鼠细胞因子的变化 | 第39-40页 |
4.5 运输应激条件下弓形虫缓殖子向速殖子转化差异蛋白的筛选 | 第40-45页 |
4.5.1 运输应激条件下弓形虫PRU株脑组织包囊的纯化与收集 | 第40-41页 |
4.5.2 不同应激时间脑组织包囊的蛋白提取及浓度测定 | 第41-42页 |
4.5.3 不同应激时间包囊蛋白的SDS-聚丙烯酰胺分析 | 第42-43页 |
4.5.4 不同应激时间包囊蛋白的双向电泳分析 | 第43-45页 |
4.6 弓形虫缓殖子向速殖子转化差异蛋白的质谱鉴定 | 第45-50页 |
4.6.1 鼠源蛋白的质谱鉴定 | 第45-47页 |
4.6.2 弓形虫相关蛋白的质谱鉴定 | 第47-49页 |
4.6.3 差异蛋白的Real-time PCR验证 | 第49-50页 |
5 讨论 | 第50-55页 |
5.1 运输应激影响弓形虫速殖子和缓殖子的相互转化 | 第50-51页 |
5.2 运输应激影响弓形虫慢性感染小鼠的免疫水平 | 第51-52页 |
5.3 运输应激条件下弓形虫缓殖子向速殖子转化差异蛋白的筛选及鉴定 | 第52-55页 |
6 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
附录 | 第67页 |