摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-17页 |
1.1 中度嗜盐菌的嗜盐机理 | 第12-15页 |
1.1.1 相容性溶质 | 第12页 |
1.1.2 Na~+/H~+逆向转运蛋白 | 第12-15页 |
1.2 中度嗜盐菌的研究 | 第15页 |
1.3 喜盐芽孢杆菌NEAU-ST10-40~T | 第15-16页 |
1.4 UPF0118家族蛋白 | 第16页 |
1.5 论文研究的目标及研究内容 | 第16-17页 |
1.5.1 研究目标 | 第16页 |
1.5.2 研究内容 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-34页 |
2.1 喜盐芽孢杆菌NEAU-ST10-40T中相关基因的克隆 | 第17-23页 |
2.1.1 实验所需材料 | 第17-18页 |
2.1.2 实验方法 | 第18-23页 |
2.2 外源基因片段的测序及序列分析 | 第23页 |
2.3 外源基因的功能研究 | 第23-27页 |
2.3.1 材料 | 第23-24页 |
2.3.2 方法 | 第24-27页 |
2.4 表达载体pET28b-UPF0118,pET22b-UPF0118的构建 | 第27-30页 |
2.4.1 材料 | 第27页 |
2.4.2 方法 | 第27-30页 |
2.5 pET22b-UPF0118的表达及Western blot实验 | 第30-34页 |
2.5.1 材料 | 第30-32页 |
2.5.2 方法 | 第32-34页 |
3 结果与分析 | 第34-53页 |
3.1 喜盐芽孢杆菌NEAU-ST10-40~T钠离子输出相关基因的克隆 | 第34-35页 |
3.1.1 基因组DNA的部分酶切 | 第34页 |
3.1.2 阳性克隆的筛选 | 第34-35页 |
3.2 外源基因的测序及序列分析 | 第35-46页 |
3.2.1 KNabc/p UC-DP61携带的外源基因的测序及序列分析 | 第35-43页 |
3.2.2 UPF0118的亚克隆与耐盐碱测试 | 第43-46页 |
3.3 反转膜活性的测定 | 第46-48页 |
3.3.1 E.coli KNabc中阳离子/H~+逆向转运活性的测定结果 | 第46-47页 |
3.3.2 pH值范围(pH profile)的测定结果 | 第47-48页 |
3.3.3 K_(0.5)值的测定结果 | 第48页 |
3.4 重组表达载体pET-22b-UPF0118的构建和表达 | 第48-53页 |
3.4.1 重组表达载体pET-22b-UPF0118的构建 | 第48-51页 |
3.4.2 重组表达载体pET-22b-UPF0118在大肠杆菌中的诱导表达 | 第51-53页 |
4 讨论 | 第53-55页 |
5 结论 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第63页 |