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UPF0118家族中一个具有钠/氢逆向转运活性的未知功能蛋白基因的克隆与功能分析

摘要第8-10页
英文摘要第10-11页
1 前言第12-17页
    1.1 中度嗜盐菌的嗜盐机理第12-15页
        1.1.1 相容性溶质第12页
        1.1.2 Na~+/H~+逆向转运蛋白第12-15页
    1.2 中度嗜盐菌的研究第15页
    1.3 喜盐芽孢杆菌NEAU-ST10-40~T第15-16页
    1.4 UPF0118家族蛋白第16页
    1.5 论文研究的目标及研究内容第16-17页
        1.5.1 研究目标第16页
        1.5.2 研究内容第16-17页
2 材料与方法第17-34页
    2.1 喜盐芽孢杆菌NEAU-ST10-40T中相关基因的克隆第17-23页
        2.1.1 实验所需材料第17-18页
        2.1.2 实验方法第18-23页
    2.2 外源基因片段的测序及序列分析第23页
    2.3 外源基因的功能研究第23-27页
        2.3.1 材料第23-24页
        2.3.2 方法第24-27页
    2.4 表达载体pET28b-UPF0118,pET22b-UPF0118的构建第27-30页
        2.4.1 材料第27页
        2.4.2 方法第27-30页
    2.5 pET22b-UPF0118的表达及Western blot实验第30-34页
        2.5.1 材料第30-32页
        2.5.2 方法第32-34页
3 结果与分析第34-53页
    3.1 喜盐芽孢杆菌NEAU-ST10-40~T钠离子输出相关基因的克隆第34-35页
        3.1.1 基因组DNA的部分酶切第34页
        3.1.2 阳性克隆的筛选第34-35页
    3.2 外源基因的测序及序列分析第35-46页
        3.2.1 KNabc/p UC-DP61携带的外源基因的测序及序列分析第35-43页
        3.2.2 UPF0118的亚克隆与耐盐碱测试第43-46页
    3.3 反转膜活性的测定第46-48页
        3.3.1 E.coli KNabc中阳离子/H~+逆向转运活性的测定结果第46-47页
        3.3.2 pH值范围(pH profile)的测定结果第47-48页
        3.3.3 K_(0.5)值的测定结果第48页
    3.4 重组表达载体pET-22b-UPF0118的构建和表达第48-53页
        3.4.1 重组表达载体pET-22b-UPF0118的构建第48-51页
        3.4.2 重组表达载体pET-22b-UPF0118在大肠杆菌中的诱导表达第51-53页
4 讨论第53-55页
5 结论第55-56页
致谢第56-57页
参考文献第57-63页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第63页

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