| 摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| 1.1 白僵菌的研究概况 | 第14-15页 |
| 1.1.1 白僵菌作为昆虫病原真菌的概述 | 第14-15页 |
| 1.1.2 白僵菌在其它方面的应用 | 第15页 |
| 1.2 白僵菌的生物学特征 | 第15-16页 |
| 1.3 球孢白僵菌的致病机理 | 第16-20页 |
| 1.3.1 球孢白僵菌的致病过程 | 第16-18页 |
| 1.3.2 白僵菌致病相关基因的研究 | 第18-20页 |
| 1.4 球孢白僵菌蛋白酶的研究进展 | 第20-24页 |
| 1.4.1 蛋白酶的概述 | 第20页 |
| 1.4.2 球孢白僵菌中蛋白酶的作用 | 第20-22页 |
| 1.4.3 Endothiapepsin蛋白 | 第22-24页 |
| 第二章 引言 | 第24-28页 |
| 2.1 研究背景与意义 | 第24-25页 |
| 2.2 研究内容 | 第25-26页 |
| 2.3 研究技术路线 | 第26-28页 |
| 第三章 BbeapA基因的克隆和生物信息学分析 | 第28-40页 |
| 3.1 实验材料 | 第28-29页 |
| 3.1.1 实验菌株 | 第28页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第28-29页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第29页 |
| 3.2 实验方法 | 第29-33页 |
| 3.2.1 球孢白僵菌的培养及基因组DNA的提取 | 第29-30页 |
| 3.2.2 BbeapA基因的克隆 | 第30-33页 |
| 3.2.3 BbeapA基因的生物信息学分析 | 第33页 |
| 3.3 结果与分析 | 第33-38页 |
| 3.3.1 BbeapA基因的克隆 | 第33-34页 |
| 3.3.2 BbeapA基因的序列分析 | 第34-35页 |
| 3.3.3 BbeapA蛋白疏水性/亲水性预测和分析 | 第35-36页 |
| 3.3.4 BbeapA蛋白信号肽预测 | 第36-37页 |
| 3.3.5 BbeapA蛋白跨膜区域预测 | 第37页 |
| 3.3.6 BbeapA蛋白结构域预测 | 第37-38页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第38-40页 |
| 第四章 球孢白僵菌基因BbeapA敲除株和回补株的构建 | 第40-54页 |
| 4.1 实验材料 | 第40-41页 |
| 4.1.1 实验菌株 | 第40页 |
| 4.1.2 质粒载体 | 第40页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第40-41页 |
| 4.1.4 实验仪器 | 第41页 |
| 4.2 实验方法 | 第41-46页 |
| 4.2.1 基因BbeapA左右同源臂的克隆 | 第41页 |
| 4.2.2 基因BbeapA回补片段的克隆 | 第41-42页 |
| 4.2.3 基因BbeapA表达载体的构建 | 第42-43页 |
| 4.2.4 表达载体的农杆菌转化 | 第43-44页 |
| 4.2.5.农杆菌介导的球孢白僵菌遗传转化 | 第44页 |
| 4.2.6 转化子的筛选和鉴定 | 第44-46页 |
| 4.3 结果与分析 | 第46-52页 |
| 4.3.1 基因BbeapA左右同源臂的PCR克隆 | 第46-47页 |
| 4.3.2 基因BbeapA敲除载体的构建 | 第47-49页 |
| 4.3.3 基因BbeapA回补片段的克隆 | 第49页 |
| 4.3.4 基因BbeapA回补载体的构建 | 第49-50页 |
| 4.3.5 基因BbeapA转化子的筛选和鉴定 | 第50-52页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第52-54页 |
| 第五章 基因BbeapA的功能研究 | 第54-64页 |
| 5.1 实验材料 | 第54-55页 |
| 5.1.1 实验菌株及试验昆虫 | 第54页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第54-55页 |
| 5.2 实验方法 | 第55-57页 |
| 5.2.1 球孢白僵菌的培养 | 第55页 |
| 5.2.2 球孢白僵菌菌落形态的观察及生长速率的测定 | 第55页 |
| 5.2.3 球孢白僵菌分生孢子产孢量的测定 | 第55页 |
| 5.2.4 碳氮源对球孢白僵菌生长影响的测定 | 第55-56页 |
| 5.2.5 金属离子胁迫对球孢白僵菌生长影响的测定 | 第56页 |
| 5.2.6 不同胁迫因子对球孢白僵菌生长影响的测定 | 第56页 |
| 5.2.7 对球孢白僵菌毒力的测定 | 第56-57页 |
| 5.3 实验结果 | 第57-62页 |
| 5.3.1 基因BbeapA对球孢白僵菌菌落形态和生长速率的影响 | 第57-58页 |
| 5.3.2 基因BbeapA对球孢白僵菌分生孢子产孢量影响 | 第58-59页 |
| 5.3.3 碳氮源对球孢白僵菌生长的影响 | 第59页 |
| 5.3.4 金属离子对球孢白僵菌生长的影响 | 第59-60页 |
| 5.3.5 不同胁迫因子对球孢白僵菌生长的影响 | 第60-61页 |
| 5.3.6 基因BbeapA对球孢白僵菌毒力的影响 | 第61-62页 |
| 5.4 小结与讨论 | 第62-64页 |
| 第六章 全文总结 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
| 硕士期间发表的文章及参研课题 | 第78页 |
