| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-23页 |
| 1.1 MADS-box基因家族 | 第9-11页 |
| 1.1.1 MADS-box基因的分布与分类 | 第9-10页 |
| 1.1.2 MADS-box基因的结构特征 | 第10页 |
| 1.1.3 MADS-box基因的生物学功能 | 第10-11页 |
| 1.2 AGL6类基因的研究进展 | 第11-14页 |
| 1.2.1 AGL6基因与相关基因的调控关系 | 第11-12页 |
| 1.2.2 AGL6类基因的克隆及表达特性 | 第12-13页 |
| 1.2.3 AGL6类基因的功能 | 第13-14页 |
| 1.3 植物启动子概述 | 第14-23页 |
| 1.3.1 植物启动子的核心结构及功能 | 第14-16页 |
| 1.3.2 植物启动子的类型 | 第16-17页 |
| 1.3.3 启动子的研究方法 | 第17-23页 |
| 第2章 引言 | 第23-25页 |
| 第3章 材料与方法 | 第25-45页 |
| 3.1 实验材料 | 第25-29页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 3.1.2 菌株与载体 | 第25页 |
| 3.1.3 主要酶及试剂 | 第25-26页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第26页 |
| 3.1.5 实验中主要自配试剂 | 第26-28页 |
| 3.1.6 常用培养基配方 | 第28-29页 |
| 3.2 实验方法 | 第29-45页 |
| 3.2.1 蜡梅基因组DNA的提取 | 第29-30页 |
| 3.2.2 hiTAIL-PCR法扩增CpAGL6基因上游启动子序列 | 第30-35页 |
| 3.2.3 对拼接获得的CpAGL6基因上游启动子序列进行全长克隆 | 第35页 |
| 3.2.4 CpAGL6基因启动子序列的生物信息学分析 | 第35页 |
| 3.2.5 植物表达载体的构建 | 第35-38页 |
| 3.2.6 农杆菌介导转化烟草 | 第38-41页 |
| 3.2.7 转基因植株的筛选鉴定 | 第41页 |
| 3.2.8 转基因烟草的GUS染色分析及GUS酶活性测定 | 第41-44页 |
| 3.2.9 转基因烟草植株的GUS时间表达检测 | 第44-45页 |
| 第4章 结果与分析 | 第45-61页 |
| 4.1 蜡梅CpAGL6基因启动子序列的获得 | 第45-47页 |
| 4.1.1 蜡梅基因组DNA的提取 | 第45页 |
| 4.1.2 蜡梅CpAGL6基因启动子片段的克隆 | 第45-47页 |
| 4.2 启动子序列分析及顺式作用元件预测 | 第47-50页 |
| 4.3 植物表达载体pBI121-CpAGL6pro的构建 | 第50-51页 |
| 4.4 农杆菌验证及GUS基因瞬时表达活性检测 | 第51-52页 |
| 4.4.1 电转化法转入农杆菌验证 | 第51-52页 |
| 4.4.2 瞬时表达技术检测启动子的活性 | 第52页 |
| 4.5 转基因烟草的获得 | 第52-54页 |
| 4.5.1 转基因烟草的再生 | 第52-53页 |
| 4.5.2 转基因烟草叶片的GUS染色检测 | 第53页 |
| 4.5.3 转基因烟草的PCR检测 | 第53-54页 |
| 4.6 转基因烟草的GUS蛋白组织特异性检测 | 第54-55页 |
| 4.7 转基因烟草中GUS基因表达的定量分析 | 第55-59页 |
| 4.7.1 BSA标准曲线的绘制 | 第55页 |
| 4.7.2 4-MU标准曲线的绘制 | 第55-56页 |
| 4.7.3 转基因烟草不同组织GUS酶活力测定 | 第56-57页 |
| 4.7.4 转基因烟草不同花期GUS酶活力测定 | 第57页 |
| 4.7.5 转基因烟草非生物协迫下GUS酶活力测定 | 第57-59页 |
| 4.8 转基因烟草GUS时间表达模式 | 第59-61页 |
| 第5章 结论 | 第61-63页 |
| 第6章 讨论 | 第63-67页 |
| 6.1 hiTAIL-PCR技术在启动子克隆上的应用 | 第63页 |
| 6.2 利用在线软件对CpAGL6基因启动子序列进行预测分析 | 第63-64页 |
| 6.3 CpAGL6基因启动子在转基因烟草中的功能分析 | 第64-65页 |
| 6.4 后续研究 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-79页 |
| 缩略词表 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81-83页 |
| 在校期间发表的文章和参与的项目 | 第83页 |
