| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| 1.1 概述 | 第11-18页 |
| 1.1.1 重金属污染概述 | 第11-12页 |
| 1.1.2 镉的环境危害及微生物吸附 | 第12-14页 |
| 1.1.3 生物吸附 | 第14-16页 |
| 1.1.4 重金属离子转运泵Czc蛋白 | 第16页 |
| 1.1.5 研究目的 | 第16-18页 |
| 第二章 重金属抗性特征研究 | 第18-25页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 实验菌株 | 第18页 |
| 2.1.2 相关试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-20页 |
| 2.2.1 不同离子浓度下抑菌圈大小分析 | 第19-20页 |
| 2.2.2 不同离子浓度下生长情况鉴定 | 第20页 |
| 2.3 实验结果及分析 | 第20-24页 |
| 2.3.1 抑菌圈直径比较 | 第20-22页 |
| 2.3.2 各浓度细菌生长情况 | 第22-24页 |
| 2.4 讨论与分析 | 第24-25页 |
| 2.4.1 抑菌圈直径比较 | 第24页 |
| 2.4.2 各浓度细菌生长情况 | 第24-25页 |
| 第三章 重金属吸附性特征研究 | 第25-42页 |
| 3.1 实验材料和设备 | 第25页 |
| 3.1.1 实验菌株 | 第25页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第25页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第25页 |
| 3.2 实验方法 | 第25-28页 |
| 3.2.1 生长曲线测定 | 第25-26页 |
| 3.2.2 扫描电镜（SEM）及能谱分析（EDAX） | 第26页 |
| 3.2.3 重金属吸附测定 | 第26-28页 |
| 3.2.4 等温吸附实验 | 第28页 |
| 3.3 实验结果及分析 | 第28-40页 |
| 3.3.1 胁迫生长曲线 | 第28-29页 |
| 3.3.2 扫描电镜（SEM）和能谱分析（EDAX）结果 | 第29-30页 |
| 3.3.3 Klebsiella sp. Yangling I2生物吸附单因素分析 | 第30-35页 |
| 3.3.4 吸附时间对生物吸附的影响 | 第35-36页 |
| 3.3.5 吸附等温模型 | 第36-40页 |
| 3.3.6 Klebsiella sp. Yangling I2与其他菌株的对比 | 第40页 |
| 3.4 讨论与分析 | 第40-42页 |
| 第四章 重金属抗性蛋白CzcA表达研究 | 第42-53页 |
| 4.1 实验材料与设备 | 第42-43页 |
| 4.1.1 菌株与载体 | 第42页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第42页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第42-43页 |
| 4.1.4 自配试剂 | 第43页 |
| 4.2 实验步骤 | 第43-47页 |
| 4.2.1 细菌全基因组DNA抽提 | 第43-44页 |
| 4.2.2 PCR扩增目的片段 | 第44-45页 |
| 4.2.3 胶回收目的DNA片段 | 第45页 |
| 4.2.4 载体与目的片段Czc A的双酶切 | 第45页 |
| 4.2.5 CzcA与载体p ET-22b的粘端连接 | 第45页 |
| 4.2.6 CaCl2法大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第45页 |
| 4.2.7 挑取阳性克隆PCR检测 | 第45页 |
| 4.2.8 CzcA-Pet22b重组质粒抽提 | 第45-46页 |
| 4.2.9 重组质粒的检测 | 第46页 |
| 4.2.10 提取重组质粒转化 | 第46页 |
| 4.2.11 目的蛋白Czc A的诱导表达 | 第46页 |
| 4.2.12 细胞膜组分分离和目的蛋白Czc A的抽提 | 第46-47页 |
| 4.2.13 Western检测蛋白表达量和表达位置 | 第47页 |
| 4.2.14 Ni柱亲和层析 | 第47页 |
| 4.3 实验结果及分析 | 第47-52页 |
| 4.3.1 表达载体PCR阳性检测结果 | 第47-48页 |
| 4.3.2 重组载体单双酶切阳性检测结果 | 第48-49页 |
| 4.3.3 构建表达载体的测序结果 | 第49页 |
| 4.3.4 CzcA蛋白诱导表达及膜蛋白提取结果 | 第49-50页 |
| 4.3.5 CzcA蛋白Western Blot结果 | 第50-51页 |
| 4.3.6 CzcA蛋白N i柱亲和层析结果 | 第51-52页 |
| 4.4 讨论与分析 | 第52-53页 |
| 第五章 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简介 | 第60页 |
