摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-13页 |
引言 | 第13-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-36页 |
1 昆虫的卵子发生 | 第15-25页 |
·果蝇卵子发生 | 第15-21页 |
·果蝇卵子发生的基本过程 | 第15页 |
·原卵区 | 第15-16页 |
·干细胞 | 第16-17页 |
·卵室的分裂和极化 | 第17-18页 |
·卵母细胞的极化 | 第18-19页 |
·细胞骨架极性和RNA 定位 | 第19-20页 |
·极质 | 第20页 |
·上皮细胞极性和形态发生 | 第20-21页 |
·蜜蜂卵子发生 | 第21-24页 |
·蜜蜂卵子发生的基本过程 | 第21页 |
·不同级型的蜜蜂产卵力有显著差异 | 第21-22页 |
·蜜蜂卵子发生的起始区很可能在端丝而非原卵区 | 第22-23页 |
·处女蜂王和有王工蜂卵子发生的起始期没有受到抑制 | 第23页 |
·卵黄生成素参与保育工蜂的社会行为 | 第23-24页 |
·家蚕的卵子发生 | 第24-25页 |
2 与果蝇卵巢发育相关基因的研究 | 第25-28页 |
·ovo 基因的研究 | 第25-27页 |
·果蝇ovo 基因的结构、转录及表达调控 | 第25页 |
·OVO 蛋白家族的结构及功能 | 第25-27页 |
·卵巢肿瘤(ovarian tumor gene, otu)基因的研究 | 第27-28页 |
·果蝇otu 基因的结构及转录 | 第27页 |
·Otu 蛋白的结构及功能 | 第27-28页 |
参考文献 | 第28-36页 |
第二章 研究目的与研究内容 | 第36-40页 |
1 研究的目的和意义 | 第36-37页 |
2 研究的主要内容 | 第37-38页 |
·家蚕ovo 基因的克隆、鉴定及表达分析 | 第37页 |
·上调和下调家蚕ovo 基因表达对生殖腺发育的影响 | 第37页 |
·家蚕otu 基因及其可变剪接 | 第37-38页 |
3 技术路线 | 第38-40页 |
·家蚕ovo 基因研究的技术路线 | 第38-39页 |
·家蚕otu 基因研究的技术路线 | 第39-40页 |
第三章 实验材料与方法 | 第40-56页 |
1 实验材料 | 第40-45页 |
·载体与菌种 | 第40页 |
·生物材料 | 第40页 |
·工具酶及试剂盒 | 第40页 |
·其它试剂 | 第40-41页 |
·主要实验试剂与配制 | 第41-45页 |
2 常用仪器 | 第45-46页 |
3 试验常用方法 | 第46-54页 |
·感受态细胞的制备 | 第46页 |
·DNA 的连接反应体系 | 第46页 |
·连接产物的转化 | 第46-47页 |
·重组质粒的筛选 | 第47页 |
·碱裂解法少量制备质粒DNA | 第47-48页 |
·DNA 的酶切反应体系 | 第48页 |
·基因组DNA 提取 | 第48-49页 |
·目的片段的分离和回收 | 第49页 |
·PCR 扩增目的片段 | 第49-50页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第50页 |
·SDS-PAGE 蛋白质电泳 | 第50页 |
·SDS-PAGE 凝胶的染色和脱色 | 第50页 |
·Western blotting | 第50-52页 |
·过柱纯化蛋白 | 第52页 |
·免疫小鼠,制备多克隆抗体 | 第52-53页 |
·总RNA 提取 | 第53页 |
·RNA 反转录成cDNA | 第53页 |
·细胞的培养和保存 | 第53-54页 |
·实时定量PCR(Real-Time PCR) | 第54页 |
·碱性磷酸酶(CIAP)处理载体 | 第54页 |
参考文献 | 第54-56页 |
第四章 家蚕ovo 基因的克隆、鉴定及表达谱分析 | 第56-90页 |
1 材料与方法 | 第57-61页 |
·材料与试剂 | 第57-58页 |
·实验方法 | 第58-61页 |
2 结果与分析 | 第61-82页 |
·Bmovo 的电子克隆 | 第61页 |
·Bmovo ORF 的克隆与序列测定 | 第61-65页 |
·BmOVO 的高级结构分析 | 第65-67页 |
·BmOVO 的信号肽序列分析 | 第67页 |
·BmOVO 的同源性比较与进化分析 | 第67-68页 |
·Bmovo 表达谱分析 | 第68-74页 |
·Bmovo 重组表达载体的克隆与鉴定 | 第74-79页 |
·BmOVO-1 重组蛋白的表达和纯化 | 第79-80页 |
·Western Blotting 检测BmOVO-1 多克隆抗体 | 第80页 |
·家蚕主要组织Western blotting 检测 | 第80-81页 |
·BmOVO 的细胞定位 | 第81-82页 |
3 讨论 | 第82-86页 |
·BmOVO 的不同亚型是具有不同活性的转录因子 | 第82-84页 |
·Bmovo-2 是否表达 | 第84-85页 |
·BmOVO 潜在的功能 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-90页 |
第五章 家蚕ovo 基因表达上调、下调对家蚕性状的影响 | 第90-103页 |
1 材料与方法 | 第91-93页 |
·材料与试剂 | 第91页 |
·实验方法 | 第91-93页 |
2 结果与分析 | 第93-100页 |
·下调Bmovo 水平对雌蚕造卵数的影响 | 第93-95页 |
·注射Bmovo-dsRNA 对蚕茧产量的影响 | 第95页 |
·转基因载体的构建与鉴定 | 第95-98页 |
·转基因家蚕的筛选与鉴定 | 第98-100页 |
3 讨论 | 第100-102页 |
·BmOVO 可能参与家蚕卵子的形成 | 第100-101页 |
·下调 Bmovo 水平对雌蚕雄蚕产丝量的影响 | 第101-102页 |
参考文献 | 第102-103页 |
第六章 家蚕otu 基因及其可变剪接 | 第103-116页 |
1 材料与方法 | 第104-106页 |
·材料 | 第104-105页 |
·RNA 提取及cDNA 制备 | 第105页 |
·Bmotu 的克隆 | 第105页 |
·生物信息学分析 | 第105页 |
·系统进化分析 | 第105-106页 |
·表达谱分析 | 第106页 |
2 结果与分析 | 第106-111页 |
·Bmotu 基因的cDNA 克隆与序列测定 | 第106-107页 |
·Bmotu 基因及其推导的氨基酸序列分析 | 第107-108页 |
·Bmotu 基因的基因组分析 | 第108页 |
·Bmotu 基因的组织表达谱 | 第108-109页 |
·BmOtu 同源比对与进化分析 | 第109-111页 |
3 讨论 | 第111-112页 |
参考文献 | 第112-116页 |
结论 | 第116-117页 |
在校期间发表论文情况 | 第117-118页 |
附录 | 第118-125页 |
致谢 | 第125-127页 |