| 中文摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第一章 引言 | 第13-36页 |
| 1.1 癌症现状与放射治疗 | 第13页 |
| 1.2 肿瘤细胞辐射敏感性相关因素 | 第13-14页 |
| 1.3 IR-诱导的DDR | 第14-15页 |
| 1.4 MicroRNA | 第15-19页 |
| 1.4.1 MiRNA生物合成及作用机理 | 第16-17页 |
| 1.4.2 MiRNA的功能 | 第17-19页 |
| 1.5 IR应答中的mi RNA | 第19-21页 |
| 1.6 DDR与miRNA的相互调控作用 | 第21-34页 |
| 1.6.1 IR-诱导的DDR调控miRNA表达 | 第21-24页 |
| 1.6.2 MiRNA调控IR-诱导的DDR | 第24-34页 |
| 1.7 本论文目的和意义 | 第34-35页 |
| 1.8 实验方案设计 | 第35-36页 |
| 第二章 不同LET的碳离子辐射对miRNAs表达的影响 | 第36-55页 |
| 2.1 前言 | 第36页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第36-41页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第36页 |
| 2.2.2 辐照条件 | 第36-37页 |
| 2.2.3 细胞克隆存活分析 | 第37页 |
| 2.2.4 流式细胞术检测细胞周期分布 | 第37页 |
| 2.2.5 Annexin V/PI双染 | 第37-38页 |
| 2.2.6 Hoechst33258染色 | 第38页 |
| 2.2.7 RNA提取及浓度检测 | 第38页 |
| 2.2.8 MicroRNA表达谱分析 | 第38-39页 |
| 2.2.9 荧光实时定量PCR分析 | 第39-41页 |
| 2.2.10 统计学分析 | 第41页 |
| 2.3 结果 | 第41-52页 |
| 2.3.1 不同LET碳离子对细胞辐射敏感性的影响 | 第41-42页 |
| 2.3.2 不同LET碳离子辐照对细胞周期分布的影响 | 第42-43页 |
| 2.3.3 不同LET碳离子辐照对细胞凋亡的影响 | 第43-45页 |
| 2.3.4 不同LET碳离子辐照后miRNA表达谱分析 | 第45-47页 |
| 2.3.5 不同LET碳离子辐照后miRNA表达谱聚类分析 | 第47-48页 |
| 2.3.6 不同LET碳离子辐照导致不同的miRNA表达 | 第48-50页 |
| 2.3.7 荧光实时定量PCR验证差异表达的miRNAs | 第50-51页 |
| 2.3.8 MiR-449a靶基因预测 | 第51-52页 |
| 2.4 讨论 | 第52-55页 |
| 第三章 MiR-449a通过靶向c-Myc增强前列腺癌细胞的电离辐射敏感性 | 第55-87页 |
| 3.1 前言 | 第55-61页 |
| 3.1.1 MiR-449a | 第55-57页 |
| 3.1.2 MiR-449a抑癌基因功能 | 第57-59页 |
| 3.1.3 MiR-449a与肿瘤诊断和预后 | 第59页 |
| 3.1.4 MiR-449a对肿瘤细胞放/化疗效果的影响 | 第59-60页 |
| 3.1.5 c-Myc功能与人类癌症 | 第60-61页 |
| 3.2 材料与方法 | 第61-73页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第61-62页 |
| 3.2.2 试剂/试剂盒 | 第62-63页 |
| 3.2.3 主要仪器 | 第63页 |
| 3.2.4 实验方法 | 第63-73页 |
| 3.3 结果 | 第73-85页 |
| 3.3.1 抑制miR-449a减弱IR-诱导的细胞生长阻滞 | 第73-74页 |
| 3.3.2 MiR-449a表达质粒构建 | 第74-76页 |
| 3.3.3 过表达miR-449a增强IR-诱导的细胞生长阻滞 | 第76-78页 |
| 3.3.4 MiR-449a靶基因验证 | 第78-81页 |
| 3.3.5 c-Myc高表达与miR-449a下调有关 | 第81-82页 |
| 3.3.6 IR应答中的miR-449a和c-Myc表达 | 第82-83页 |
| 3.3.7 敲低c-Myc使LNCaP细胞对IR敏感 | 第83-85页 |
| 3.4 讨论 | 第85-87页 |
| 第四章 MiR-449a增强前列腺癌细胞IR敏感性的分子机制研究 | 第87-102页 |
| 4.1 前言 | 第87页 |
| 4.2 材料与方法 | 第87-88页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第87页 |
| 4.2.2 主要试剂和试剂盒 | 第87-88页 |
| 4.2.3 主要仪器 | 第88页 |
| 4.2.4 方法 | 第88页 |
| 4.3 结果 | 第88-98页 |
| 4.3.1 不同前列腺癌细胞的辐射敏感性不同 | 第88-89页 |
| 4.3.2 IR后miR-449a表达变化不同 | 第89-90页 |
| 4.3.3 在DU-145 和PC-3 细胞中成功转染表达miR-449a质粒 | 第90-91页 |
| 4.3.4 MiR-449a对前列腺癌细胞辐射敏感性的影响 | 第91-92页 |
| 4.3.5 敲低c-Myc对前列腺癌细胞辐射敏感性的影响 | 第92-93页 |
| 4.3.6 MiR-449a对IR-诱导的G2/M阻滞的影响 | 第93-94页 |
| 4.3.7 MiR-449a对IR-诱导的细胞凋亡的影响 | 第94-96页 |
| 4.3.8 前列腺癌细胞中p53和Rb蛋白的表达 | 第96页 |
| 4.3.9 MiR-449a通过Rb/E2F通路增强IR-诱导的G2/M期阻滞 | 第96-97页 |
| 4.3.10 MiR-449a通过调控线粒体通路增强IR-诱导的细胞凋亡 | 第97-98页 |
| 4.4 讨论 | 第98-102页 |
| 第五章 全文小结及展望 | 第102-105页 |
| 参考文献 | 第105-126页 |
| 致谢 | 第126-128页 |
| 在学期间的研究成果 | 第128-129页 |
| 在学期间主持及参与的课题 | 第129页 |
