| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-15页 |
| 1.布鲁氏菌病原 | 第8页 |
| 2.布病的危害 | 第8-9页 |
| 3.布病的治疗与防护 | 第9-12页 |
| 4.布鲁氏菌的QS系统 | 第12-13页 |
| 5.布病病原的诊断 | 第13-14页 |
| 6.布鲁氏菌突变株的构建方法 | 第14-15页 |
| 第二章 引言 | 第15-16页 |
| 第三章 利用T载体克隆快速构建布鲁氏菌vjbR缺失标记株 | 第16-23页 |
| ·材料 | 第16-17页 |
| ·菌株和质粒 | 第16页 |
| ·引物 | 第16页 |
| ·主要试剂 | 第16-17页 |
| ·主要仪器 | 第17页 |
| ·方法 | 第17-19页 |
| ·融合PCR法构建突变载体 | 第17-18页 |
| ·布鲁氏菌的电转化 | 第18-19页 |
| ·突变体的筛选与鉴定 | 第19页 |
| ·结果 | 第19-22页 |
| ·基于T载体克隆构建缺失突变株的原理 | 第19-20页 |
| ·目的片段的扩增 | 第20-21页 |
| ·缺失突变盒的构建 | 第21页 |
| ·缺失突变载体的构建 | 第21页 |
| ·突变体的筛选与鉴定 | 第21-22页 |
| ·讨论 | 第22-23页 |
| 第四章 布鲁氏菌基因标记疫苗株16M△vjbR的免疫保护性分析 | 第23-30页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·菌株、细胞、小鼠 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| ·方法 | 第24-25页 |
| ·菌液制备 | 第24页 |
| ·免疫保护实验 | 第24页 |
| ·体液免疫反应水平 | 第24-25页 |
| ·细胞因子水平测量 | 第25页 |
| ·结果 | 第25-28页 |
| ·16MAvjbR的免疫保护作用 | 第25-26页 |
| ·16M△vjbR诱导的体液免疫反应 | 第26-27页 |
| ·16M△vjbR的细胞免疫反应 | 第27-28页 |
| ·讨论 | 第28-30页 |
| 第五章 VjbR表达及基因标记株16M△vjbR的鉴别诊断 | 第30-39页 |
| ·材料 | 第30-31页 |
| ·菌株与载体 | 第30页 |
| ·引物 | 第30-31页 |
| ·主要试剂与溶液配制 | 第31页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-34页 |
| ·表达载体的构建及重组蛋白的表达 | 第31-33页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第33页 |
| ·Western Blot检测 | 第33页 |
| ·间接ELISA检测 | 第33-34页 |
| ·结果 | 第34-38页 |
| ·目的基因的扩增 | 第34页 |
| ·入门克隆的构建 | 第34页 |
| ·表达载体的构建 | 第34-35页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第35页 |
| ·重组蛋白表达形式的确定 | 第35-36页 |
| ·重组蛋白纯化结果 | 第36页 |
| ·重组蛋白免疫原性分析 | 第36-38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| 第六章 研究总结与创新点 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-45页 |
| 附录 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-48页 |
| 发表论文情况 | 第48页 |
