中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第11-29页 |
1.1 蛋白质简介 | 第11-12页 |
1.1.1 氨基酸 | 第11页 |
1.1.2 蛋白质的功能 | 第11-12页 |
1.2 荧光蛋白 | 第12-16页 |
1.2.1 绿色荧光蛋白的发现 | 第12-13页 |
1.2.2 绿色荧光蛋白的空间结构 | 第13-15页 |
1.2.3 绿色荧光蛋白的荧光基团 | 第15-16页 |
1.3 聚合酶链式反应 | 第16-22页 |
1.3.1 常规PCR和突变PCR | 第17-18页 |
1.3.2 大引物PCR | 第18-20页 |
1.3.3 PCR体系和过程 | 第20-22页 |
1.4 荧光共振能量转移(FRET) | 第22-29页 |
1.4.1 FRET的工作原理 | 第22-24页 |
1.4.2 全内反射荧光显微镜(TIR-FM)的基本原理 | 第24-27页 |
1.4.3 基板修饰方法 | 第27-29页 |
第二章 基于红色荧光蛋白的力学传感器 | 第29-43页 |
2.1 引言 | 第29页 |
2.2 材料和方法 | 第29-35页 |
2.2.1 蛋白质的氨基酸序列 | 第29-31页 |
2.2.2 质粒的构建 | 第31-33页 |
2.2.3 蛋白质的表达与纯化 | 第33-34页 |
2.2.4 紫外可见吸收光谱的测量 | 第34-35页 |
2.2.5 荧光强度测量 | 第35页 |
2.3 结果与讨论 | 第35-41页 |
2.3.1 基于红色荧光蛋白的力学传感器 | 第35-38页 |
2.3.2 荧光蛋白β桶结构对发射光谱峰位的影响 | 第38-41页 |
2.4 结论 | 第41-43页 |
第三章 用smFRET研究酶促反应 | 第43-65页 |
3.1 引言 | 第43-44页 |
3.2 材料和方法 | 第44-54页 |
3.2.1 霍利迪交叉简介 | 第44-50页 |
3.2.2 Holliday Junction样品的合成 | 第50-52页 |
3.2.3 样品舱的制备 | 第52-54页 |
3.2.4 除氧体系的介绍 | 第54页 |
3.3 结果与讨论 | 第54-63页 |
3.3.1 五条链的Holliday Junction的FRET研究 | 第54-57页 |
3.3.2 对HJ-BamHI分子酶切前后的FRET研究 | 第57-61页 |
3.3.3 对HJ-BamHI分子酶切过程中动力学的FRET研究 | 第61-63页 |
3.4 结论 | 第63-65页 |
第四章 总结和展望 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-75页 |
致谢 | 第75-76页 |