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红色荧光蛋白力学传感器和基于smFRET的单分子酶促反应的研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 绪论第11-29页
    1.1 蛋白质简介第11-12页
        1.1.1 氨基酸第11页
        1.1.2 蛋白质的功能第11-12页
    1.2 荧光蛋白第12-16页
        1.2.1 绿色荧光蛋白的发现第12-13页
        1.2.2 绿色荧光蛋白的空间结构第13-15页
        1.2.3 绿色荧光蛋白的荧光基团第15-16页
    1.3 聚合酶链式反应第16-22页
        1.3.1 常规PCR和突变PCR第17-18页
        1.3.2 大引物PCR第18-20页
        1.3.3 PCR体系和过程第20-22页
    1.4 荧光共振能量转移(FRET)第22-29页
        1.4.1 FRET的工作原理第22-24页
        1.4.2 全内反射荧光显微镜(TIR-FM)的基本原理第24-27页
        1.4.3 基板修饰方法第27-29页
第二章 基于红色荧光蛋白的力学传感器第29-43页
    2.1 引言第29页
    2.2 材料和方法第29-35页
        2.2.1 蛋白质的氨基酸序列第29-31页
        2.2.2 质粒的构建第31-33页
        2.2.3 蛋白质的表达与纯化第33-34页
        2.2.4 紫外可见吸收光谱的测量第34-35页
        2.2.5 荧光强度测量第35页
    2.3 结果与讨论第35-41页
        2.3.1 基于红色荧光蛋白的力学传感器第35-38页
        2.3.2 荧光蛋白β桶结构对发射光谱峰位的影响第38-41页
    2.4 结论第41-43页
第三章 用smFRET研究酶促反应第43-65页
    3.1 引言第43-44页
    3.2 材料和方法第44-54页
        3.2.1 霍利迪交叉简介第44-50页
        3.2.2 Holliday Junction样品的合成第50-52页
        3.2.3 样品舱的制备第52-54页
        3.2.4 除氧体系的介绍第54页
    3.3 结果与讨论第54-63页
        3.3.1 五条链的Holliday Junction的FRET研究第54-57页
        3.3.2 对HJ-BamHI分子酶切前后的FRET研究第57-61页
        3.3.3 对HJ-BamHI分子酶切过程中动力学的FRET研究第61-63页
    3.4 结论第63-65页
第四章 总结和展望第65-67页
参考文献第67-75页
致谢第75-76页

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