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胃癌基因差异表达谱的构建及长链非编码RNA TCONS00068220功能的初步验证

中文摘要第4-8页
abstract第8-11页
英文缩写词表第15-18页
第1章 绪论第18-40页
    1.1 胃癌的研究现状第18-20页
    1.2 转录组学与转录组测序第20-29页
        1.2.1 转录组学第20-22页
        1.2.2 核苷酸测序技术第22-27页
        1.2.3 转录组测序及数据处理第27-29页
    1.3 长链非编码RNA第29-37页
        1.3.1 长链非编码RNA概述第29-34页
        1.3.2 长链非编码RNA与恶性肿瘤第34-35页
        1.3.3 长链非编码RNA与胃癌第35-37页
    1.4 本论文的立题依据第37-40页
第2章 基于RNA-seq数据构建胃癌基因差异表达谱第40-56页
    2.1 引言第40页
    2.2 材料方法第40-47页
        2.2.1 RNA-seq数据来源第40-41页
        2.2.2 数据预处理与读段定位第41-44页
        2.2.3 长链非编码RNA的预测第44-45页
        2.2.4 差异表达基因的筛选第45-47页
    2.3 分析结果第47-52页
        2.3.1 LncRNA预测结果第47页
        2.3.2 差异表达基因的筛选结果第47-52页
    2.4 讨论第52-54页
    2.5 本章小结第54-56页
第3章 胃癌差异表达基因的功能富集及分子互作网络分析第56-84页
    3.1 引言第56页
    3.2 材料方法第56-62页
        3.2.1 基因集功能富集分析第56-57页
        3.2.2 蛋白质互作网络分析第57-61页
        3.2.3 LncRNA分析第61-62页
    3.3 分析结果第62-76页
        3.3.1 差异表达基因的富集分析结果第62页
        3.3.2 差异表达蛋白质的互作网络分析结果第62-72页
        3.3.3 差异表达lncRNA的功能分析结果第72-76页
    3.4 讨论第76-82页
    3.5 本章小结第82-84页
第4章 长链非编码RNA TCONS_00068220功能的初步验证第84-112页
    4.1 引言第84页
    4.2 实验材料第84-87页
        4.2.1 临床标本第84-85页
        4.2.2 细胞系第85页
        4.2.3 主要仪器第85-86页
        4.2.4 主要试剂及耗材第86-87页
    4.3 实验方法第87-101页
        4.3.1 细胞培养第87-88页
        4.3.2 组织及细胞总RNA的抽提第88-89页
        4.3.3 逆转录第89页
        4.3.4 荧光实时定量PCR第89-91页
        4.3.5 TCONS_00068220基因合成第91页
        4.3.6 重组质粒转化到大肠埃希菌第91-92页
        4.3.7 质粒的提取第92-93页
        4.3.8 重组质粒的测序及酶切电泳鉴定第93页
        4.3.9 插入目的载体第93页
        4.3.10 重组质粒转化到大肠埃希菌第93页
        4.3.11 挑选单克隆,提取质粒进行测序及酶切电泳鉴定第93-94页
        4.3.12 中量提取质粒第94-95页
        4.3.13 siRNA的制备第95页
        4.3.14 细胞转染第95-96页
        4.3.15 TCONS_00068220的过表达和干扰表达效果验证第96页
        4.3.16 细胞凋亡检测第96页
        4.3.17 细胞周期检测第96-97页
        4.3.18 台盼蓝染色第97页
        4.3.19 DAPI染色法检测细胞凋亡第97-98页
        4.3.20 Western Blot检测caspase-3蛋白的表达第98-100页
        4.3.21 统计分析第100-101页
    4.4 分析结果第101-107页
        4.4.1 TCONS_00068220在组织及细胞系中的表达水平第101-102页
        4.4.2 TCONS_00068220真核表达质粒构建结果第102-103页
        4.4.3 TCONS_00068220的过表达和干扰表达效果第103-104页
        4.4.4 细胞凋亡检测结果第104-105页
        4.4.5 细胞周期检测结果第105页
        4.4.6 台盼蓝染色检测细胞活性第105页
        4.4.7 凋亡细胞染色及caspase-3蛋白表达量的检测第105-107页
    4.5 讨论第107-110页
    4.6 本章小结第110-112页
第5章 结论第112-114页
参考文献第114-130页
作者简介及科研成果第130-132页
致谢第132-133页

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