符号说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-25页 |
1.1 泛素-26S蛋白酶体降解途径 | 第12页 |
1.2 泛素连接酶E3的分类及结构特征 | 第12-14页 |
1.2.1 HECT型泛素连接酶 | 第13页 |
1.2.2 RING finger/U-box型泛素连接酶 | 第13页 |
1.2.3 APC复合体 | 第13-14页 |
1.2.4 CUL3-BTB复合体 | 第14页 |
1.2.5 SCF复合体 | 第14页 |
1.3 F-box结构及其功能 | 第14-18页 |
1.3.1 F-box结构 | 第14页 |
1.3.2 F-box功能 | 第14-18页 |
1.3.2.1 F-box对激素信号途径的调节 | 第14-17页 |
1.3.2.2 F-box调节光形态建成 | 第17页 |
1.3.2.3 F-box参与生物钟调节 | 第17-18页 |
1.3.2.4 F-box对植物环境胁迫耐性的调节 | 第18页 |
1.4 植物的盐胁迫耐性及其调节 | 第18-24页 |
1.4.1 高盐对植物的影响 | 第18页 |
1.4.2 植物对高盐胁迫的适应 | 第18-24页 |
1.4.2.1 植物耐盐的差异性 | 第18-19页 |
1.4.2.2 植物避盐机理 | 第19-20页 |
1.4.2.3 植物耐盐机理 | 第20-22页 |
1.4.2.4 盐胁迫的信号转导途径 | 第22-24页 |
1.5 本实验的目的意义 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-40页 |
2.1 实验材料 | 第25-26页 |
2.1.1 植物材料 | 第25页 |
2.1.2 实验材料的培养和处理 | 第25页 |
2.1.3 酶和各种生化试剂 | 第25页 |
2.1.4 PCR引物 | 第25-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-39页 |
2.2.1 转基因烟草和拟南芥突变体的鉴定 | 第26-29页 |
2.2.1.1 CTAB法提取烟草和拟南芥基因组DNA | 第27页 |
2.2.1.2 转基因烟草和拟南芥植物的PCR检测 | 第27-29页 |
2.2.2 转基因烟草基因表达水平的检测 | 第29-31页 |
2.2.2.1 TRIZOL法提取RNA | 第29-30页 |
2.2.2.2 反转录cDNA第一条链的合成 | 第30页 |
2.2.2.3 荧光定量PCR检测基因的表达水平 | 第30-31页 |
2.2.3 转基因烟草F-box蛋白的Western杂交 | 第31-33页 |
2.2.3.1 植物总蛋白的提取 | 第31页 |
2.2.3.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第31-32页 |
2.2.3.3 半干法蛋白转移 | 第32-33页 |
2.2.3.4 封闭与杂交 | 第33页 |
2.2.4 转基因烟草的生理指标检测 | 第33-39页 |
2.2.4.1 烟草种子萌发率统计 | 第33-34页 |
2.2.4.2 叶片相对含水量的测定 | 第34页 |
2.2.4.3 游离脯氨酸含量的测定 | 第34页 |
2.2.4.4 叶绿素含量测定 | 第34页 |
2.2.4.5 光合参数测定 | 第34页 |
2.2.4.6 超氧阴离子自由基及过氧化氢含量测定 | 第34页 |
2.2.4.7 ROS的活体检测 | 第34-35页 |
2.2.4.8 相对电导率和丙二醛含量检测 | 第35页 |
2.2.4.9 抗氧化物酶活性测定 | 第35页 |
2.2.4.10 Na~+和K~+含量测定 | 第35页 |
2.2.4.11 液泡膜的提取及纯化 | 第35-36页 |
2.2.4.12 细胞膜的纯化 | 第36页 |
2.2.4.13 液泡膜和质膜蛋白质含量的测定(Bradford法) | 第36页 |
2.2.4.14 PM H~+-ATP酶活性的测定 | 第36-37页 |
2.2.4.15 V-ATP酶活性的测定 | 第37页 |
2.2.4.16 焦磷酸酶活性的测定 | 第37页 |
2.2.4.17 磷含量的测定 | 第37-38页 |
2.2.4.18 Na~+、K~+在根和叶中的动态运输 | 第38-39页 |
2.3 统计分析 | 第39-40页 |
3 结果与分析 | 第40-54页 |
3.1 转基因株系的鉴定 | 第40-41页 |
3.2 过表达Ta FBA1提高转基因烟草的耐盐性 | 第41-43页 |
3.3 盐胁迫对成年转基因烟草的生物量及光合特性的影响 | 第43-46页 |
3.4 WT和转基因株系在盐胁迫下活性氧的积累和抗氧化能力分析 | 第46页 |
3.5 转基因株系和WT根和叶中的钠和钾含量 | 第46-49页 |
3.6 钠离子转运相关酶活性和胁迫防御相关基因表达对盐胁迫的响应 | 第49-51页 |
3.7 细胞Na~+和K~+离子流对盐胁迫的响应 | 第51-53页 |
3.8 拟南芥突变体atfbw2-4 对盐胁迫的响应 | 第53-54页 |
4 讨论 | 第54-57页 |
4.1 过表达小麦TaFBA1增强了转基因烟草的耐盐性 | 第54页 |
4.2 抗氧化水平的提高可能参与了转基因株系的耐盐性 | 第54-55页 |
4.3 Na~+/K~+离子区域化可能参与转基因株系的耐盐性 | 第55-57页 |
5 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
攻读学位期间发表的论文及成果 | 第71页 |