| 符号说明 | 第27-29页 |
| 中文摘要 | 第29-32页 |
| Abstract | 第32-35页 |
| 第一章 前言 | 第36-56页 |
| 一、肺结核防治研究进展 | 第36-38页 |
| 1. 结核病的流行情况 | 第36页 |
| 2. 结核病与免疫 | 第36-37页 |
| 3. 结核病的治疗现状 | 第37-38页 |
| 二、益肺通络颗粒 | 第38-41页 |
| 1. 组方依据与功能组成 | 第38-39页 |
| 2. 处方组成与中医方解 | 第39-40页 |
| 3. 益肺通络方研究进展 | 第40-41页 |
| 三、中药复方制剂有效性评价 | 第41-42页 |
| 1. 非临床有效性评价 | 第41-42页 |
| 2. 临床研究的评价 | 第42页 |
| 四、物质基础研究及质量控制体系的问题 | 第42-46页 |
| 1. 中药物质基础研究的思路与特点 | 第43-44页 |
| 2. 中药物质基础研究的主要方法和技术 | 第44-46页 |
| 五、本课题研究内容意义和创新性 | 第46-49页 |
| 1. 研究内容意义 | 第46-48页 |
| 2. 本课题的创新之处 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 第二章 益肺通络颗粒的药理作用机制研究 | 第56-95页 |
| 第一节 体外抗结核杆菌活性检测 | 第56-65页 |
| 一、材料与仪器 | 第56-57页 |
| 1. 实验材料 | 第56-57页 |
| 1.1 试剂 | 第56页 |
| 1.2 实验菌株 | 第56-57页 |
| 1.3 实验药品 | 第57页 |
| 2. 实验仪器 | 第57页 |
| 二、实验方法与结果 | 第57-63页 |
| 1. 供试样品与药品的配制 | 第57-58页 |
| 1.1 供试样品的准备 | 第57-58页 |
| 1.2 对照药品与试剂的配制 | 第58页 |
| 1.3 接种菌株的准备 | 第58页 |
| 2. 供试样品对结核杆菌药物敏感性实验 | 第58-63页 |
| 三、讨论 | 第63-64页 |
| 1. 药敏实验方法选择 | 第63页 |
| 2. 中药与传统结核治疗的相关性 | 第63-64页 |
| 四、小结 | 第64-65页 |
| 第二节 体外免疫和抗氧化活性研究 | 第65-74页 |
| 一、材料与仪器 | 第65-66页 |
| 1. 实验材料 | 第65-66页 |
| 1.1 试剂 | 第65-66页 |
| 1.2 实验细胞 | 第66页 |
| 1.3 实验药品 | 第66页 |
| 2. 实验仪器 | 第66页 |
| 二、实验方法与结果 | 第66-71页 |
| 1. 供试品和所需药品溶液配制 | 第66-67页 |
| 1.1 供试品样品制备 | 第66-67页 |
| 1.2 溶液配制 | 第67页 |
| 2. 体外抗氧化活性评价 | 第67-69页 |
| 2.1 DPPH自由基清除率的测定 | 第67-68页 |
| 2.2 ABTS自由基清除能力测定 | 第68-69页 |
| 3. 体外细胞活性评价 | 第69-71页 |
| 3.1 供试品对细胞增殖及细胞活性的影响 | 第69-70页 |
| 3.2 对巨噬细胞吞噬能力的影响 | 第70-71页 |
| 三、讨论 | 第71-73页 |
| 1. 体外活性评价方法选择 | 第71页 |
| 2. DPPH自由基清除测定原理 | 第71-72页 |
| 3. ABTS自由基清除测定原理 | 第72-73页 |
| 4. RAW 264.7巨噬细胞的选择 | 第73页 |
| 四、小结 | 第73-74页 |
| 第三节 对免疫抑制小鼠免疫调节作用的研究 | 第74-91页 |
| 一、材料与仪器 | 第74-75页 |
| 1. 实验材料 | 第74页 |
| 1.1 试剂 | 第74页 |
| 1.2 实验动物 | 第74页 |
| 2. 实验仪器 | 第74-75页 |
| 二、实验方法与结果 | 第75-87页 |
| 1. 供试品和所需药品溶液配制 | 第75页 |
| 1.1 供试品样品制备 | 第75页 |
| 1.2 药品溶液配制 | 第75页 |
| 2. 实验动物分组及给药 | 第75-76页 |
| 3. 动物标本采集 | 第76-77页 |
| 3.1 血清标本采集 | 第76页 |
| 3.2 腹腔巨噬细胞收集 | 第76页 |
| 3.3 脾细胞悬液的制备 | 第76页 |
| 3.4 脾脏混悬液的制备 | 第76-77页 |
| 4. 免疫指标检测 | 第77-78页 |
| 4.1 对生长性能的影响 | 第77页 |
| 4.2 胸腺、脾脏指数测定 | 第77-78页 |
| 5. 巨噬细胞吞噬功能测定 | 第78-79页 |
| 6. 血清中多种因子的水平测定 | 第79-82页 |
| 7. 脾淋巴细胞的转化实验 | 第82-83页 |
| 8. 脾细胞自然杀伤活性的测定 | 第83-84页 |
| 8.1 效应细胞和靶细胞的制备 | 第83页 |
| 8.2 脾细胞活性的测定 | 第83-84页 |
| 9. 流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群 | 第84-86页 |
| 10. 乳酸脱氢酶及酸性磷酸酶活性测定 | 第86-87页 |
| 三、讨论 | 第87-91页 |
| 1. 结核病的免疫治疗 | 第87-89页 |
| 2. 实验模型的选择 | 第89-90页 |
| 3. 小鼠免疫低下模型建立 | 第90页 |
| 4. 益肺通络颗粒活性评价 | 第90-91页 |
| 四、小结 | 第91页 |
| 参考文献 | 第91-95页 |
| 第三章 益肺通络方的不同波长下的指纹图谱研究 | 第95-122页 |
| 一、材料与仪器 | 第95-96页 |
| 1. 实验材料 | 第95-96页 |
| 1.1 试剂 | 第95页 |
| 1.2 对照品与药品 | 第95-96页 |
| 2. 实验仪器 | 第96页 |
| 二、实验方法与结果 | 第96-119页 |
| 1. 色谱条件的选择 | 第96-100页 |
| 1.1 流动相的选择 | 第96-98页 |
| 1.2 检测波长的选择 | 第98-99页 |
| 1.3 柱温的选择 | 第99-100页 |
| 2. 供试品溶液制备方法 | 第100-102页 |
| 3. 指纹图谱方法学考察 | 第102-108页 |
| 3.1 精密度试验 | 第103-104页 |
| 3.2 稳定性试验 | 第104-106页 |
| 3.3 重复性试验 | 第106-108页 |
| 4. 复方指纹图谱的建立以及归属 | 第108-119页 |
| 4.1 相关参数的设置以及相似的的意义 | 第108-109页 |
| 4.2 272 nm液相色谱指纹图谱 | 第109-112页 |
| 4.3 300 nm液相色谱指纹图谱 | 第112-115页 |
| 4.4 原料药材与制剂指纹图谱相关性分析 | 第115-119页 |
| 三、讨论 | 第119-120页 |
| 1. 液相色谱条件的选择 | 第119页 |
| 2. 供试品制备方法的选择 | 第119页 |
| 3. 指纹图谱结果分析 | 第119-120页 |
| 4. 根据指纹图谱对复方中成分进行归属 | 第120页 |
| 四、小结 | 第120-121页 |
| 参考文献 | 第121-122页 |
| 第四章 益肺通络颗粒中效应部位成分分析 | 第122-139页 |
| 第一节 复方颗粒制剂主要化学成分液相色谱分析 | 第122-128页 |
| 一、材料与仪器 | 第122-123页 |
| 1. 实验材料 | 第122-123页 |
| 1.1 试剂 | 第122页 |
| 1.2 对照品与药品 | 第122-123页 |
| 2. 实验仪器 | 第123页 |
| 二、实验方法与结果 | 第123-127页 |
| 1. 液相色谱条件 | 第123-124页 |
| 2. 供试品及对照品溶液配制 | 第124页 |
| 2.1 对照品溶液的制备 | 第124页 |
| 2.2 供试品溶液制备 | 第124页 |
| 3. 部分共有峰的HPLC-UV的鉴定 | 第124-127页 |
| 三、讨论 | 第127页 |
| 1. 对照样品的选择 | 第127页 |
| 2. HPLC-UV法鉴定指纹图谱中的主要成分 | 第127页 |
| 四、小结 | 第127-128页 |
| 第二节 LC-ESI-HRMS鉴定复方中化学成分 | 第128-135页 |
| 一、材料与仪器 | 第128-129页 |
| 1. 实验材料 | 第128-129页 |
| 1.1 试剂 | 第128页 |
| 1.2 对照品与药品 | 第128-129页 |
| 2. 实验仪器 | 第129页 |
| 二、实验方法与结果 | 第129-134页 |
| 1. 色谱分析条件 | 第129页 |
| 1.1 液相条件 | 第129页 |
| 1.2 质谱条件 | 第129页 |
| 2. 供试品溶液制备 | 第129-130页 |
| 3. 供试样品质谱分析 | 第130-134页 |
| 4. 复方中化学成分鉴定 | 第134页 |
| 三、讨论与小结 | 第134-135页 |
| 第三节 益肺通络颗粒多糖成分分析 | 第135-137页 |
| 一、材料与仪器 | 第135页 |
| 1. 实验材料 | 第135页 |
| 1.1 试剂 | 第135页 |
| 1.2 对照品与药品 | 第135页 |
| 2. 实验仪器 | 第135页 |
| 二、实验方法与结果 | 第135-137页 |
| 1. 供试样品的制备 | 第135-136页 |
| 2. 总糖含量测定 | 第136-137页 |
| 2.1 所需试剂的配制 | 第136页 |
| 2.2 标准曲线的绘制 | 第136页 |
| 2.3 样品测定 | 第136-137页 |
| 三、讨论与小结 | 第137页 |
| 参考文献 | 第137-139页 |
| 第五章 LC-MS/MS法测定益肺通络颗粒中主要成分的含量 | 第139-157页 |
| 一、材料与仪器 | 第139-140页 |
| 1. 实验材料 | 第139-140页 |
| 1.1 试剂 | 第139页 |
| 1.2 对照品与药品 | 第139-140页 |
| 2. 实验仪器 | 第140页 |
| 二、实验方法与结果 | 第140-153页 |
| 1. LC-ESI-MS色谱分析条件 | 第140-141页 |
| 1.1 液相色谱条件 | 第140-141页 |
| 1.2 质谱条件 | 第141页 |
| 2. 供试品溶液制备 | 第141-142页 |
| 2.1 对照品溶液的制备 | 第141页 |
| 2.2 内标溶液的制备 | 第141页 |
| 2.3 供试品溶液制备 | 第141-142页 |
| 3. 对照品MRM参数优化 | 第142-144页 |
| 4. 方法学分析 | 第144-152页 |
| 4.1 线性关系考察 | 第144-148页 |
| 4.2 检测限与定量限 | 第148页 |
| 4.3 精密度试验 | 第148页 |
| 4.4 重复性试验 | 第148页 |
| 4.5 稳定性试验 | 第148-152页 |
| 4.6 加样回收率试验 | 第152页 |
| 5. 样品含量测定 | 第152-153页 |
| 三、讨论 | 第153-154页 |
| 1. 测定方法的选择 | 第153页 |
| 2. 液相色谱条件的优化 | 第153-154页 |
| 3. 质谱条件的优化 | 第154页 |
| 4. 内标物的选择 | 第154页 |
| 四、小结 | 第154-155页 |
| 参考文献 | 第155-157页 |
| 第六章 益肺通络颗粒药效成分的体内药代动力学研究 | 第157-180页 |
| 一、材料与仪器 | 第157-158页 |
| 1. 实验材料 | 第157-158页 |
| 1.1 试剂 | 第157-158页 |
| 1.2 对照品与药品 | 第158页 |
| 2. 实验仪器 | 第158页 |
| 3. 实验动物 | 第158页 |
| 二、实验方法与结果 | 第158-174页 |
| 1. 样品准备和含量确定 | 第158-159页 |
| 2. 药动学实验方案 | 第159页 |
| 3. 对照品与内标溶液的配制 | 第159页 |
| 3.1 对照品溶液配制 | 第159页 |
| 3.2 内标溶液的配制 | 第159页 |
| 4. 血浆样本测定方法 | 第159-160页 |
| 4.1 液相色谱条件 | 第159-160页 |
| 4.2 质谱条件 | 第160页 |
| 5. 血浆样品前处理方法 | 第160页 |
| 6. 方法学分析 | 第160-174页 |
| 6.1 方法专属性 | 第160-162页 |
| 6.2 标准曲线的绘制与线性范围 | 第162-164页 |
| 6.3 基质效应与提取回收率 | 第164-165页 |
| 6.4 准确度与精密度 | 第165-166页 |
| 6.5 定量限与检测限 | 第166-167页 |
| 6.6 稳定性考察 | 第167-170页 |
| 6.7 药物动力学研究 | 第170-174页 |
| 三、讨论 | 第174-176页 |
| 1. 血浆样品前处理方法的选择 | 第174-175页 |
| 2. 沉淀剂与添加剂的确定 | 第175页 |
| 3. 药代动力学研究的意义 | 第175-176页 |
| 4. 药-时曲线的双峰现象 | 第176页 |
| 四、小结 | 第176-177页 |
| 参考文献 | 第177-180页 |
| 第七章 益肺通络颗粒中君药白芨活性成分研究 | 第180-222页 |
| 第一节 君药白芨单方中各化学部位的制备 | 第180-184页 |
| 一、材料与仪器 | 第180-181页 |
| 1. 实验材料 | 第180页 |
| 1.1 试剂 | 第180页 |
| 1.2 药品与对照品 | 第180页 |
| 2. 实验仪器 | 第180-181页 |
| 二、试验方法与结果 | 第181页 |
| 1. 白芨化学部位的提取与分离 | 第181页 |
| 三、讨论与小结 | 第181-184页 |
| 第二节 白芨中药中各组分的体外活性研究 | 第184-192页 |
| 一、材料与仪器 | 第184-185页 |
| 1. 实验材料 | 第184-185页 |
| 1.1 试剂 | 第184-185页 |
| 1.2 实验细胞 | 第185页 |
| 1.3 对照品与药品 | 第185页 |
| 2. 实验仪器 | 第185页 |
| 二、实验方法与结果 | 第185-189页 |
| 1. 白芨各组分中总酚含量测定 | 第185-186页 |
| 2. DPPH自由基清除能力的测定 | 第186-187页 |
| 3. BM60组分体外活性评价 | 第187-189页 |
| 3.1 NR8383细胞的培养方法 | 第187页 |
| 3.2 NR8383细胞活性测定 | 第187-188页 |
| 3.3 NR8383细胞NO含量测定 | 第188-189页 |
| 三、讨论 | 第189-190页 |
| 1. 总多酚含量测定 | 第189-190页 |
| 2. NR8383细胞的选择 | 第190页 |
| 3. 生物活性物质NO | 第190页 |
| 四、小结 | 第190-192页 |
| 第三节 白芨组分BM60的体内活性研究 | 第192-208页 |
| 一、材料与仪器 | 第192-193页 |
| 1. 实验材料 | 第192-193页 |
| 1.1 试剂 | 第192-193页 |
| 1.2 试药 | 第193页 |
| 1.3 实验动物 | 第193页 |
| 2. 实验仪器 | 第193页 |
| 二、实验方法与结果 | 第193-206页 |
| 1. 试剂配制 | 第193-195页 |
| 2. 大鼠模型建立与实验方案 | 第195-196页 |
| 2.1 大鼠模型建立 | 第195页 |
| 2.2 动物分组及给药方案 | 第195-196页 |
| 3. 肺灌洗液中各项检测指标技术测定 | 第196-198页 |
| 3.1 支气管肺泡灌洗液收集及细胞计数 | 第196-197页 |
| 3.2 肺灌洗液上清中主要炎症细胞因子的测定 | 第197-198页 |
| 4. 肺组织中各项检测指标技术测定 | 第198-206页 |
| 4.1 肺组织标本观察及湿干重比测定 | 第198-199页 |
| 4.2 肺组织匀浆的制备 | 第199页 |
| 4.3 肺组织中蛋白浓度测定 | 第199-200页 |
| 4.4 肺组织中炎症因子的指标变化 | 第200页 |
| 4.5 肺组织髓过氧化物酶活性测定 | 第200-201页 |
| 4.6 肺组织匀浆中MDA和SOD活性测定 | 第201-203页 |
| 4.7 肺组织常规病理学检查 | 第203-204页 |
| 4.8 肺组织NF-κB的免疫组化检测 | 第204-205页 |
| 4.9 Western blot检测NF-kB p65蛋白含量变化 | 第205-206页 |
| 三、讨论 | 第206-207页 |
| 1. ALI大鼠模型建立方法 | 第206页 |
| 2. 体内急性炎症反应(ALI)与发病机制 | 第206-207页 |
| 3. 抗氧化系统 | 第207页 |
| 四、小结 | 第207-208页 |
| 第四节 白芨BM60组分的定性分析 | 第208-215页 |
| 一、材料与仪器 | 第208页 |
| 1. 实验材料 | 第208页 |
| 1.1 试剂 | 第208页 |
| 1.2 试药 | 第208页 |
| 2. 实验仪器 | 第208页 |
| 二、实验方法与结果 | 第208-214页 |
| 1. 色谱分析条件 | 第208-209页 |
| 1.1 液相条件 | 第208-209页 |
| 1.2 质谱条件 | 第209页 |
| 2. 待测样品成分分析 | 第209-214页 |
| 三、讨论 | 第214-215页 |
| 1. 液相色谱条件的优化 | 第214页 |
| 2. 质谱检测参数的优化 | 第214页 |
| 3. 白芨中主要成分组成 | 第214-215页 |
| 四、小结 | 第215页 |
| 参考文献 | 第215-222页 |
| 全文结论 | 第222-225页 |
| 致谢 | 第225-226页 |
| 攻读学位期间发表论文目录 | 第226-227页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第227页 |