摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
1 前言 | 第11-22页 |
1.1 醋酸概述 | 第11-12页 |
1.1.1 醋酸的理化性质 | 第11页 |
1.1.2 醋酸的应用 | 第11-12页 |
1.2 醋酸菌简介 | 第12-16页 |
1.2.1 醋酸菌的分类 | 第12-14页 |
1.2.2 醋酸菌发酵机制 | 第14-15页 |
1.2.3 醋酸菌的基因工程改良 | 第15-16页 |
1.3 醋酸菌的醋酸耐受机制 | 第16-18页 |
1.4 原核生物DNA损伤修复机制 | 第18-21页 |
1.4.1 DNA损伤修复机制简介 | 第18页 |
1.4.2 DNA损伤修复机制类型 | 第18-19页 |
1.4.3 核酸修复酶UvrABC型蛋白 | 第19-21页 |
1.5 立体背景与研究意义 | 第21页 |
1.6 主要研究内容 | 第21-22页 |
2 材料与方法 | 第22-39页 |
2.1 实验材料 | 第22-27页 |
2.1.1 菌株与质粒 | 第22页 |
2.1.2 引物 | 第22-23页 |
2.1.3 主要仪器试剂 | 第23-25页 |
2.1.4 培养基 | 第25-26页 |
2.1.5 主要溶液 | 第26-27页 |
2.2 实验方法 | 第27-36页 |
2.2.1 菌体的培养 | 第27-28页 |
2.2.2 菌体感受态的制备及转化 | 第28-29页 |
2.2.3 分子生物学常用基本技术方法 | 第29-33页 |
2.2.4 巴氏醋杆菌uvrA基因敲除菌株的构建 | 第33-35页 |
2.2.5 巴氏醋杆菌uvrA基因重组表达菌株的构建 | 第35-36页 |
2.2.6 核酸修复酶UvrA对巴氏醋杆菌醋酸耐受性的影响 | 第36页 |
2.2.7 核酸修复酶UvrA对巴氏醋杆菌醋酸发酵的影响 | 第36页 |
2.3 分析方法 | 第36-39页 |
2.3.1 菌体基因组DNA完整性检测 | 第36页 |
2.3.2 菌体生物量的测定 | 第36页 |
2.3.3 菌体存活率计算 | 第36-37页 |
2.3.4 发酵液中总酸含量的测定 | 第37页 |
2.3.5 菌体ADH和ALDH酶活的测定 | 第37页 |
2.3.6 细胞干重的测定 | 第37-38页 |
2.3.7 生物信息学分析方法 | 第38-39页 |
3 结果与讨论 | 第39-61页 |
3.1 醋酸对巴氏醋杆菌的影响 | 第39-44页 |
3.1.1 醋酸对巴氏醋杆菌生长的影响 | 第39页 |
3.1.2 醋酸对巴氏醋杆菌基因组DNA的影响 | 第39-40页 |
3.1.3 醋酸对巴氏醋杆菌蛋白表达的影响 | 第40-43页 |
3.1.4 醋酸对巴氏醋杆菌uvrA基因转录的影响 | 第43-44页 |
3.1.5 小结 | 第44页 |
3.2 巴氏醋杆菌AC2005 uvrA基因敲除菌株的构建 | 第44-49页 |
3.2.1 巴氏醋杆菌AC2005uvrA基因敲除质粒的构建 | 第44-47页 |
3.2.2 巴氏醋杆菌AC2005 uvrA基因敲除菌株的构建 | 第47-49页 |
3.2.3 小结 | 第49页 |
3.3 巴氏醋杆菌uvrA基因重组表达菌株的构建 | 第49-54页 |
3.3.1 巴氏醋杆菌uvrA基因重组表达质粒的构建 | 第49-51页 |
3.3.2 巴氏醋杆菌uvrA基因重组表达菌株的构建及蛋白表达分析 | 第51-53页 |
3.3.3 小结 | 第53-54页 |
3.4 核酸修复酶UvrA与巴氏醋杆菌醋酸耐受性的关系 | 第54-61页 |
3.4.1 核酸修复酶UvrA对巴氏醋杆菌生长的影响 | 第54-55页 |
3.4.2 核酸修复酶UvrA对巴氏醋杆菌醋酸耐受性的影响 | 第55-58页 |
3.4.3 核酸修复酶UvrA对巴氏醋杆菌醋酸发酵的影响 | 第58-60页 |
3.4.4 小结 | 第60-61页 |
4 结论 | 第61-62页 |
5 展望 | 第62-63页 |
6 参考文献 | 第63-70页 |
7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第70-71页 |
8 致谢 | 第71页 |