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巴氏醋酸杆菌uvrA基因的敲除及对菌体醋酸耐受性的影响

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
1 前言第11-22页
    1.1 醋酸概述第11-12页
        1.1.1 醋酸的理化性质第11页
        1.1.2 醋酸的应用第11-12页
    1.2 醋酸菌简介第12-16页
        1.2.1 醋酸菌的分类第12-14页
        1.2.2 醋酸菌发酵机制第14-15页
        1.2.3 醋酸菌的基因工程改良第15-16页
    1.3 醋酸菌的醋酸耐受机制第16-18页
    1.4 原核生物DNA损伤修复机制第18-21页
        1.4.1 DNA损伤修复机制简介第18页
        1.4.2 DNA损伤修复机制类型第18-19页
        1.4.3 核酸修复酶UvrABC型蛋白第19-21页
    1.5 立体背景与研究意义第21页
    1.6 主要研究内容第21-22页
2 材料与方法第22-39页
    2.1 实验材料第22-27页
        2.1.1 菌株与质粒第22页
        2.1.2 引物第22-23页
        2.1.3 主要仪器试剂第23-25页
        2.1.4 培养基第25-26页
        2.1.5 主要溶液第26-27页
    2.2 实验方法第27-36页
        2.2.1 菌体的培养第27-28页
        2.2.2 菌体感受态的制备及转化第28-29页
        2.2.3 分子生物学常用基本技术方法第29-33页
        2.2.4 巴氏醋杆菌uvrA基因敲除菌株的构建第33-35页
        2.2.5 巴氏醋杆菌uvrA基因重组表达菌株的构建第35-36页
        2.2.6 核酸修复酶UvrA对巴氏醋杆菌醋酸耐受性的影响第36页
        2.2.7 核酸修复酶UvrA对巴氏醋杆菌醋酸发酵的影响第36页
    2.3 分析方法第36-39页
        2.3.1 菌体基因组DNA完整性检测第36页
        2.3.2 菌体生物量的测定第36页
        2.3.3 菌体存活率计算第36-37页
        2.3.4 发酵液中总酸含量的测定第37页
        2.3.5 菌体ADH和ALDH酶活的测定第37页
        2.3.6 细胞干重的测定第37-38页
        2.3.7 生物信息学分析方法第38-39页
3 结果与讨论第39-61页
    3.1 醋酸对巴氏醋杆菌的影响第39-44页
        3.1.1 醋酸对巴氏醋杆菌生长的影响第39页
        3.1.2 醋酸对巴氏醋杆菌基因组DNA的影响第39-40页
        3.1.3 醋酸对巴氏醋杆菌蛋白表达的影响第40-43页
        3.1.4 醋酸对巴氏醋杆菌uvrA基因转录的影响第43-44页
        3.1.5 小结第44页
    3.2 巴氏醋杆菌AC2005 uvrA基因敲除菌株的构建第44-49页
        3.2.1 巴氏醋杆菌AC2005uvrA基因敲除质粒的构建第44-47页
        3.2.2 巴氏醋杆菌AC2005 uvrA基因敲除菌株的构建第47-49页
        3.2.3 小结第49页
    3.3 巴氏醋杆菌uvrA基因重组表达菌株的构建第49-54页
        3.3.1 巴氏醋杆菌uvrA基因重组表达质粒的构建第49-51页
        3.3.2 巴氏醋杆菌uvrA基因重组表达菌株的构建及蛋白表达分析第51-53页
        3.3.3 小结第53-54页
    3.4 核酸修复酶UvrA与巴氏醋杆菌醋酸耐受性的关系第54-61页
        3.4.1 核酸修复酶UvrA对巴氏醋杆菌生长的影响第54-55页
        3.4.2 核酸修复酶UvrA对巴氏醋杆菌醋酸耐受性的影响第55-58页
        3.4.3 核酸修复酶UvrA对巴氏醋杆菌醋酸发酵的影响第58-60页
        3.4.4 小结第60-61页
4 结论第61-62页
5 展望第62-63页
6 参考文献第63-70页
7 攻读硕士学位期间发表论文情况第70-71页
8 致谢第71页

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