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mTOR信号通路在LPS诱导肉鸡肠道黏膜免疫应激中的作用

符号说明第1-12页
中文摘要第12-15页
Abstract第15-19页
1 前言第19-38页
   ·家禽黏膜免疫系统第19-23页
     ·家禽黏膜免疫系统的结构第19-20页
     ·家禽黏膜免疫系统的功能第20-21页
       ·特异性免疫功能第20页
       ·非特异性免疫功能第20页
       ·免疫耐受第20-21页
     ·肠道黏膜免疫系统的特点第21-22页
     ·家禽黏膜免疫的调节第22-23页
       ·黏膜上皮细胞的调节作用第22-23页
       ·T细胞和B细胞的调节作用第23页
   ·黏膜免疫主要效应因子SIgA第23-24页
     ·SIgA的结构第23-24页
     ·SIgA在黏膜免疫应答中的作用第24页
   ·免疫应激第24-26页
     ·应激概述第24-25页
     ·免疫应激第25-26页
     ·免疫应激对家禽的影响第26页
   ·LPS诱导的免疫应激第26-32页
     ·LPS的特性第26-27页
     ·LPS建立模型第27-28页
     ·LPS免疫应激介导的炎症细胞因子的释放第28-29页
     ·LPS免疫应激的作用机制(NF-κB信号通路)第29-30页
     ·LPS免疫应激的作用机制(MAPKs信号通路)第30-32页
   ·mTOR信号通路第32-35页
     ·mTOR概述第32-33页
     ·mTOR作用第33页
     ·mTOR与炎性反应第33-34页
     ·Leu对mTOR的调控作用第34-35页
   ·营养与肠道黏膜免疫第35-37页
     ·维生素A(VA)第35-36页
     ·5-羟色氨酸(5-HTP)第36-37页
   ·选题目的及意义第37-38页
2 材料与方法第38-54页
   ·试验动物管理第38页
   ·试验鸡胚第38页
   ·试验试剂与主要仪器第38-42页
   ·试验设计第42-47页
     ·RAPA处理对肠道黏膜发育和免疫的影响第42页
       ·试验处理第42页
       ·样品采集第42页
       ·测定指标第42页
       ·服LPS对肠道组织的影响第42-43页
       ·试验处理第42-43页
       ·采集样品第43页
       ·指标测定第43页
     ·原代肠道上皮细胞的培养第43页
     ·体外肠道组织的培养及体外LPS免疫应激模型的建立第43-44页
       ·试验处理第43页
       ·采集样品第43页
       ·指标检测第43-44页
     ·mTOR参与LPS诱导的信号通路第44页
       ·试验处理第44页
       ·样品采集第44页
       ·指标检测第44页
     ·mTOR参与营养素调控LPS免疫应激的初探第44-47页
       ·试验处理第44-46页
       ·样品采集第46页
       ·指标检测第46-47页
   ·试验方法第47-53页
     ·肠道原代上皮细胞的培养第47页
     ·小肠绒毛高度和隐窝深度的测定第47-48页
     ·免疫组化定位IgA的阳性信号第48页
     ·酶联免疫吸附(ELISA)检测SIgA效价第48-49页
     ·相关基因mRNA水平检测第49-52页
       ·组织中提取总RNA第49页
       ·RNA浓度的测定第49-50页
       ·反转录第50页
       ·荧光定量PCR第50-52页
     ·蛋白提取和Western Blotting第52-53页
       ·组织蛋白的提取第52页
       ·组织蛋白浓度的测定第52页
       ·蛋白变性第52页
       ·Western Blotting第52-53页
   ·数据处理第53-54页
3 结果与分析第54-76页
   ·RAPA处理对肠道黏膜发育和免疫的影响第54-59页
     ·体重变化第54页
     ·形态学观察第54-56页
     ·免疫组化定位空肠IgA的阳性信号第56-57页
     ·mTOR,IgA,Claudin1和Occludin的相对表达量第57-59页
     ·服LPS对肠道黏膜免疫应激的影响机制第59-62页
       ·服不同浓度LPS对肠道黏膜中SIgA分泌的影响第59-60页
     ·参与调控LPS免疫应激的信号通路第60-62页
       ·不同时间点IgA和TLR4的mRNA表达水平第60-61页
       ·不同时间点NF-κB p65和p38 MAPK蛋白的表达水平第61-62页
   ·肠道上皮细胞的原代培养第62页
   ·LPS应激体外培养的肠道组织模型第62-66页
     ·肠道组织的体外培养第62-63页
     ·LPS应激对培养液上清中SIgA浓度的影响第63-64页
     ·LPS处理对相关细胞因子在不同时间点的影响第64-65页
     ·LPS处理对MAPK和NF-κB信号分子的影响第65-66页
     ·LPS处理对mTOR信号分子的影响第66页
   ·mTOR参与调控LPS诱导的信号通路第66-69页
     ·mTOR调节LPS诱导的SIgA合成第66-67页
     ·mTOR参与调节LPS诱导的细胞因子的表达第67页
     ·mTOR参与调节LPS诱导的MAPK、NF-κB信号第67-69页
   ·mTOR参与营养素调控LPS免疫应激的初探第69-76页
     ·mTOR参与 5-HTP日粮的调控机制研究第69-72页
       ·血清和各段肠道黏膜中分泌的SIgA的浓度第69-70页
       ·5-HTP对十二指肠中不同细胞因子的调控作用第70页
       ·5-HTP对mTOR、MAPK和NF-κB信号蛋白的调控作用第70-72页
     ·mTOR参与VA日粮的调控机制研究第72-76页
       ·各段肠道黏膜中分泌的SIgA的浓度第72页
       ·VA对十二指肠中不同细胞因子的调控作用第72-73页
       ·VA对mTOR/p70S6K和MAPK、NF-κB信号蛋白的调控作用第73-76页
4 讨论第76-88页
   ·mTOR信号对肠道黏膜发育和免疫的影响第76-77页
     ·服LPS对肠道黏膜免疫的影响机制第77-79页
   ·建立体外培养的肠道组织模型第79-82页
     ·体外肠道组织的培养第79页
     ·体外肠道组织建立的免疫应激模型第79-81页
     ·LPS负调控mTOR信号通路第81-82页
   ·mTOR参与调控LPS诱导的免疫应激第82-83页
     ·Leu抑制LPS激活的SIgA第82页
     ·Leu缓解LPS抑制的mTOR及其下游信号表达第82-83页
     ·mTOR参与调控LPS激活的免疫应答第83页
   ·mTOR参与营养素的调控机制初探第83-88页
     ·mTOR参与 5-HTP日粮的调控机制研究第84-85页
     ·mTOR参与VA日粮的调控机制研究第85-88页
5 结论第88-89页
参考文献第89-103页
致谢第103-104页
攻读博士期间待发表与已发表论文情况第104页

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