| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-24页 |
| ·海藻糖的研究现状概述 | 第10-15页 |
| ·海藻糖的理化性质 | 第10-11页 |
| ·海藻糖的生产制备 | 第11-14页 |
| ·海藻糖的应用前景 | 第14-15页 |
| ·6-磷酸海藻糖合成酶研究概述 | 第15-17页 |
| ·TPS基因的表达 | 第15页 |
| ·TPS纯化 | 第15-16页 |
| ·TPS性质研究 | 第16页 |
| ·TPS作用机理 | 第16-17页 |
| ·酶促反应动力学 | 第17-19页 |
| ·底物浓度对反应速率的影响 | 第17-18页 |
| ·动力学参数的意义 | 第18-19页 |
| ·双倒数作图法测定Km和Vmax的值 | 第19页 |
| ·同源建模 | 第19-20页 |
| ·同源建模的概述 | 第19-20页 |
| ·同源建模的分析步骤 | 第20页 |
| ·研究意义及内容 | 第20-21页 |
| ·研究意义 | 第20-21页 |
| ·研究内容 | 第21页 |
| ·研究技术路线 | 第21-24页 |
| ·克隆、表达技术路线 | 第21-22页 |
| ·酶活测定技术路线 | 第22-24页 |
| 第二章 6-磷酸海藻糖合成酶的克隆、表达及分离纯化 | 第24-40页 |
| ·引言 | 第24页 |
| ·材料 | 第24-28页 |
| ·菌株、质粒、酶 | 第24页 |
| ·试剂及药品 | 第24-25页 |
| ·试剂配制方法 | 第25-27页 |
| ·培养基的配制 | 第27页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| ·仪器和设备 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-34页 |
| ·6-磷酸海藻糖合成酶的克隆 | 第29-32页 |
| ·6-磷酸海藻糖合成酶(taTPS)的表达 | 第32页 |
| ·6-磷酸海藻糖合成酶(taTPS)的分离纯化 | 第32-33页 |
| ·6-磷酸海藻糖合成酶(taTPS)浓度的测定 | 第33-34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-37页 |
| ·6-磷酸海藻糖合成酶(taTPS)的克隆 | 第34-35页 |
| ·蛋白进行SDS凝胶电泳分析 | 第35-36页 |
| ·蛋白进行分子筛层析 | 第36-37页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第37页 |
| ·本章小结 | 第37-40页 |
| 第三章 6-磷酸海藻糖合成酶酶学性质的研究 | 第40-50页 |
| ·引言 | 第40页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·酶及化学药品 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40-41页 |
| ·仪器和设备 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-43页 |
| ·6-磷酸海藻糖合成酶酶活的测定 | 第41-42页 |
| ·6-磷酸海藻糖合成酶学性质的研究 | 第42-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-47页 |
| ·温度、pH对taTPS活性的影响 | 第43-44页 |
| ·taTPS的底物特异性 | 第44-45页 |
| ·聚阴离子和二价金属离子对taTPS活性的影响 | 第45-47页 |
| ·不同添加剂对酶活的影响 | 第47页 |
| ·本章小结 | 第47-50页 |
| 第四章 6-磷酸海藻糖合成酶基因突变的研究 | 第50-66页 |
| ·引言 | 第50页 |
| ·材料 | 第50-55页 |
| ·菌株、质粒、酶 | 第50页 |
| ·化学试剂及药品 | 第50-51页 |
| ·培养基的配制 | 第51页 |
| ·试剂 | 第51-54页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第54-55页 |
| ·仪器和设备 | 第55页 |
| ·方法 | 第55-60页 |
| ·N-loop缺失突变的克隆 | 第55-58页 |
| ·N-loop缺失突变基因的表达 | 第58页 |
| ·N-loop缺失酶的分离纯化 | 第58页 |
| ·酶促反应动力学研究 | 第58-60页 |
| ·同源建模进行分子结构分析 | 第60页 |
| ·结果与分析 | 第60-64页 |
| ·6-磷酸海藻糖合成酶(taTPS)缺失突变的克隆 | 第60-61页 |
| ·缺失突变蛋白进行SDS凝胶电泳分析 | 第61-62页 |
| ·酶促反应动力学参数的测定 | 第62-64页 |
| ·三维模型分析 | 第64页 |
| ·本章小结 | 第64-66页 |
| 第五章 总结与展望 | 第66-70页 |
| ·总结 | 第66-67页 |
| ·展望 | 第67-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
| 在校期间主要科研成果 | 第78页 |