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藏系绵羊GSDMA基因皮肤特异表达载体的构建

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
前言第8-9页
第1章 文献综述第9-13页
 1 毛囊与羊绒毛性状第9页
 2 羊绒毛性状的主要候选基因第9-13页
   ·BMP基因家族第9-10页
   ·Hox基因家族第10页
   ·FGFs第10-11页
   ·胰岛素样生长因子第11页
   ·GSDMA第11-13页
第2章 藏系绵羊GSDMA基因的克隆与表达载体的构建第13-24页
 1 实验材料第13-15页
   ·样品的采集与处理第13-14页
   ·主要试剂与仪器第14-15页
 2 实验方法第15-18页
   ·总RNA的提取与PCR扩增第15页
   ·基因的克隆测序及双酶切引物设计第15-16页
   ·含酶切位点GSDMA基因和pCDsRed2-KI载体的扩增第16页
   ·皮肤特异表达载体pCDsR-KG的构建第16-18页
   ·pCDsR-KG载体的鉴定第18页
 3 结果与分析第18-23页
   ·藏系绵羊GSDMA基因的PCR扩增第18-19页
   ·GSDMA的基因克隆第19-20页
   ·测序及分析第20-21页
   ·GSDMA基因扩增和真核载体的转化第21-22页
   ·pCDsRed2-KG真核载体的鉴定第22-23页
 4.讨论第23-24页
第3章 GSDMA基因真核载体的转染及功能分析第24-39页
 1 实验材料第24-25页
   ·样品第24-25页
   ·主要试剂与仪器第25页
 2 实验方法第25-31页
   ·HHIRSC细胞的复苏与传代第25-26页
   ·转染条件优化第26-27页
   ·pCDsR-KG载体的转染与筛选第27页
   ·流式细胞术筛选转染细胞第27页
   ·筛选后细胞RNA及总蛋白的获得第27-28页
   ·GSDMA及 β-catenin基因荧光定量PCR分析第28-30页
   ·Western blot分析 β-catenin蛋白表达差异第30-31页
 3 结果与分析第31-37页
   ·转染条件优化第31页
   ·转染结果分析第31-32页
   ·流式细胞术筛选转染细胞第32-34页
   ·实验细胞RNA及总蛋白的获得第34页
   ·GSDMA及 β-catenin基因的定量第34-36页
   ·β-catenin基因的蛋白水平分析第36-37页
 4 讨论第37-39页
结论第39-40页
参考文献第40-47页
附录第47-48页
致谢第48-49页

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