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猪圆环病毒2型和猪细小病毒体外混合感染致病机制的研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-12页
英文缩略词表第12-14页
第一部分 文献综述第14-40页
 第一章 猪圆环病毒2型的国内外研究进展第14-34页
  1 猪圆环病毒2型概述第14-17页
   ·病原学第14页
   ·猪圆环病毒的基因结构及编码蛋白第14-16页
   ·病毒编码的蛋白第16页
   ·流行病学第16-17页
  2 病毒与宿主免疫系统的相互作用第17-21页
   ·免疫细胞的感染第17-18页
   ·IL-10等细胞因子在PCV2发病机制中的作用第18-20页
   ·病毒和宿主蛋白之间的作用第20页
   ·病毒DNA和宿主蛋白之间的相互作用第20-21页
  3 猪圆环病毒2型的致病机制第21-23页
   ·淋巴细胞缺失和免疫抑制第21页
   ·PCV2感染和细胞凋亡第21-22页
   ·PCV2病毒毒力第22页
   ·遗传易感性第22-23页
   ·PCVAD相关的免疫增强作用第23页
  4 保护性免疫第23-24页
   ·疫苗与免疫第23-24页
   ·中和抗体和细胞免疫在保护中的作用第24页
  5 PCVAD的防治第24-25页
  6 总结和未来展望第25-26页
  参考文献第26-34页
 第二章 猪细小病毒及与猪圆环病毒混合感染的研究进展第34-40页
  1 病原学第34页
  2 流行病学及致病机制第34-35页
   ·流行病学第34-35页
   ·致病机理第35页
  3 PCV2与PPV混合感染的研究进展第35-38页
  参考文献第38-40页
第二部分 实验研究第40-88页
 第三章 PCV-2,PPV IFN-γ,TNF-α,IL-10和β-actin部分基因片段real-time PCR检测方法的建立第40-62页
  摘要第40-41页
  1 材料第41-42页
   ·毒株、细胞株和菌株第41页
   ·载体第41页
   ·主要试剂第41页
   ·主要仪器第41-42页
  2 方法第42-51页
   ·PCV2病毒的增殖及TCID_(50)的测定第42页
   ·PPV病毒的增殖及TCID_(50)的测定第42-43页
   ·基因组的提取第43-44页
   ·引物的设计与合成第44-45页
   ·目的基因的扩增第45-46页
   ·PCV2、PPV及细胞因子重组克隆质粒的构建第46-48页
   ·real-time PCR方法的建立第48-49页
   ·real-time PCR反应条件的优化第49-50页
   ·real-time PCR方法学评价第50-51页
  3 结果第51-58页
   ·PCV2、PPV及猪细胞因子目的基因的扩增第51-52页
   ·重组质粒的双酶切鉴定第52-53页
   ·重组质粒浓度的计算第53-54页
   ·反应条件的优化第54-56页
   ·real-time PCR方法学评价第56-58页
  4 讨论第58-60页
  参考文献第60-61页
  ABSTRACT第61-62页
 第四章 PCV2与PPV混合感染对原代PAM的影响第62-76页
  摘要第62-63页
  1 材料第63页
   ·病毒与细胞第63页
   ·主要试剂第63页
   ·主要仪器第63页
   ·实验动物第63页
  2 方法第63-65页
   ·肺泡巨噬细胞(PAM)的分离第63-64页
   ·PCV2和PPV混合感染肺泡巨噬细胞实验设计第64页
   ·PCV2和PPV在肺泡巨噬细胞中病毒核酸拷贝数的检测第64页
   ·PCV2和PPV混合感染PAM后PCV2 IFA检测第64-65页
   ·细胞因子IFN-γ,TNF-α,IL-10和β-actin mRNA的real-time PCR检测第65页
   ·数据分析第65页
  3 结果与分析第65-70页
   ·病毒感染PAM后病毒核酸拷贝数的变化第65-66页
   ·病毒感染PAM后PCV2 IFA检测第66-67页
   ·病毒感染PAM后细胞因子表达水平的变化第67-70页
  4 讨论第70-72页
  参考文献第72-74页
  ABSTRACT第74-76页
 第五章 PCV2与PPV混合感染对3D4/21细胞的影响第76-88页
  摘要第76-77页
  1 材料第77页
   ·病毒与细胞第77页
   ·主要试剂第77页
   ·主要仪器第77页
  2 方法第77-78页
   ·PCV2和PPV混合感染3D4/21细胞实验设计第77-78页
   ·PCV2和PPV在3D4/21细胞中病毒核酸拷贝数的检测第78页
   ·PCV2和PPV混合感染PAM后PCV2IFA检测第78页
   ·细胞因子TNF-α,IFN-γ,IL-10和β-actin mRNA的real-time PCR检测第78页
   ·数据分析第78页
  3 结果与分析第78-82页
   ·病毒感染3D4/21细胞后病毒核酸拷贝数的动态变化第78-79页
   ·病毒感染3D4/21后PCV2 IFA检测第79-80页
   ·病毒感染3D4/21后细胞因子表达水平的变化第80-82页
  4 讨论第82-84页
  参考文献第84-86页
  ABSTRACT第86-88页
全文总结第88-90页
致谢第90页

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