| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 符号和缩略语说明 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-27页 |
| 1 灵芝生理特征 | 第13-15页 |
| ·灵芝药用价值研究 | 第13页 |
| ·灵芝形态特征 | 第13-14页 |
| ·灵芝生长条件 | 第14-15页 |
| 2 灵芝三萜的生物合成研究进展 | 第15-18页 |
| ·灵芝三萜生物合成途径 | 第15-16页 |
| ·灵芝三萜生物合成的研究 | 第16-18页 |
| 3 细胞壁完整性信号途径 | 第18-25页 |
| ·细胞壁完整性信号途径作用机制 | 第19-22页 |
| ·SLT2 MAPK的功能 | 第22-24页 |
| ·SLT2 MAPK与下游转录因子SWI6的关系 | 第24-25页 |
| ·发展与展望 | 第25页 |
| 4 本论文的研究意义及主要内容 | 第25-27页 |
| ·研究意义 | 第25-26页 |
| ·研究内容 | 第26-27页 |
| 第二章 灵芝mapk4基因的克隆及其生物学特性分析 | 第27-43页 |
| 前言 | 第27-28页 |
| 1 实验材料 | 第28页 |
| ·菌株和质粒 | 第28页 |
| ·菌株培养 | 第28页 |
| ·酶和生化试剂 | 第28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| 2 实验方法 | 第28-36页 |
| ·灵芝基因组DNA的提取 | 第28-29页 |
| ·灵芝RNA的提取及cDNA制备 | 第29-30页 |
| ·灵芝mapk4基因克隆 | 第30-32页 |
| ·灵芝mapk4基因的生物信息学分析 | 第32页 |
| ·灵芝MAPK4在酵母细胞中的定位分析 | 第32-34页 |
| ·灵芝MAPK4在灵芝细胞中的定位分析 | 第34-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-42页 |
| ·灵芝mapk4基因的克隆 | 第36-37页 |
| ·灵芝mapk4基因的生物特性分析 | 第37-40页 |
| ·灵芝MAPK4亚细胞定位分析 | 第40-42页 |
| 4 本章讨论 | 第42-43页 |
| 第三章 灵芝mapk4基因功能分析 | 第43-81页 |
| 前言 | 第43-44页 |
| 1 实验材料 | 第44页 |
| ·菌株和质粒 | 第44页 |
| ·菌株培养 | 第44页 |
| ·酶和生化试剂 | 第44页 |
| ·主要仪器 | 第44页 |
| 2 实验方法 | 第44-54页 |
| ·碱裂解法提取沉默载体pRNAi质粒 | 第44-45页 |
| ·灵芝mapk4基因沉默载体构建 | 第45-47页 |
| ·灵芝电击转化及转化子的筛选 | 第47页 |
| ·灵芝总RNA的提取及cDNA制备 | 第47-48页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第48-49页 |
| ·生长实验 | 第49页 |
| ·菌丝分叉检测 | 第49页 |
| ·原生质体数量统计及萌发实验 | 第49页 |
| ·胞内ROS检测 | 第49-50页 |
| ·胞内过氧化氢含量测定 | 第50-51页 |
| ·胞内过氧化氢酶活性测定 | 第51页 |
| ·三萜含量测定 | 第51-52页 |
| ·纤维素酶活性检测 | 第52-53页 |
| ·漆酶活性测定 | 第53页 |
| ·灵芝袋栽培养 | 第53-54页 |
| 3 结果分析 | 第54-78页 |
| ·灵芝mapk4基因沉默转化子的筛选 | 第54-55页 |
| ·灵芝mapk4基因影响菌丝生长 | 第55-57页 |
| ·沉默mapk4基因不改变菌丝疏水性 | 第57-58页 |
| ·灵芝mapk4沉默突变株菌丝分叉增多 | 第58-59页 |
| ·灵芝mapk4沉默突变株在不同胁迫下生长 | 第59-62页 |
| ·灵芝mapk4基因调控细胞壁完整性 | 第62-65页 |
| ·灵芝mapk4基因调控体内ROS水平 | 第65-69页 |
| ·灵芝mapk4基因参与调控灵芝三萜的生物合成 | 第69-73页 |
| ·灵芝mapk4基因对纤维素酶和漆酶的影响 | 第73-76页 |
| ·灵芝mapk4基因对发育的影响 | 第76-78页 |
| 4 本章讨论 | 第78-81页 |
| 第四章 灵芝CWI信号通路中转录因子swi6基因功能初步分析 | 第81-89页 |
| 前言 | 第81页 |
| 1 实验材料 | 第81页 |
| ·菌株和质粒 | 第81页 |
| ·菌株培养 | 第81页 |
| ·酶和生化试剂 | 第81页 |
| ·主要仪器 | 第81页 |
| 2 实验方法 | 第81-83页 |
| ·灵芝swi6基因沉默载体构建 | 第81-82页 |
| ·灵芝电击转化及转化子的筛选 | 第82-83页 |
| ·灵芝总RNA的提取及cDNA制备 | 第83页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第83页 |
| ·生长实验 | 第83页 |
| ·三萜测定方法 | 第83页 |
| 3 结果与分析 | 第83-88页 |
| ·灵芝swi6沉默转化子筛选 | 第83-84页 |
| ·swi6基因参与调控菌丝生长和胁迫应答 | 第84-85页 |
| ·灵芝swi6基因调控灵芝三萜生物合成 | 第85-87页 |
| ·灵芝swi6基因参与调控ROS相关基因表达 | 第87-88页 |
| 4 本章讨论 | 第88-89页 |
| 全文总结 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-99页 |
| 创新点 | 第99-101页 |
| 文章发表情况 | 第101-103页 |
| 附录Ⅰ | 第103-105页 |
| 附录Ⅱ | 第105-107页 |
| 致谢 | 第107页 |