摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
缩略词 | 第12-13页 |
前言 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-24页 |
·寄生植物的研究进展 | 第14-19页 |
·寄生植物的研究现状 | 第14-15页 |
·寄生植物吸器的研究 | 第15-17页 |
·吸器发生信号物质的研究 | 第17-18页 |
·吸器发育相关基因的研究 | 第18-19页 |
·百蕊草的研究进展 | 第19-20页 |
·抑制性差减杂交技术的原理及其应用 | 第20-22页 |
·差减杂交技术的基本原理 | 第20-22页 |
·差减杂交技术在植物研究中的应用 | 第22页 |
·本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
·技术路线图 | 第23-24页 |
第二章 百蕊草吸器发育信号物质的分离鉴定 | 第24-32页 |
·实验材料 | 第24页 |
·植物材料 | 第24页 |
·主要试剂和仪器 | 第24页 |
·实验方法 | 第24-26页 |
·百蕊草种子预处理 | 第24页 |
·寄主植物的培养及根系分泌物的收集 | 第24-25页 |
·气质联用鉴定根系分泌物 | 第25页 |
·DMBQ诱导百蕊草吸器形成 | 第25-26页 |
·实验结果与分析 | 第26-29页 |
·夏枯草根系分泌物的GC/MS鉴定结果 | 第26-29页 |
·不同浓度DMBQ诱导百蕊草吸器形成 | 第29页 |
·讨论 | 第29-32页 |
第三章 百蕊草吸器差减文库的构建及分析 | 第32-56页 |
·实验材料 | 第32-33页 |
·植物材料 | 第32页 |
·主要试剂和仪器 | 第32-33页 |
·试验方法 | 第33-43页 |
·总RNA的提取 | 第33-34页 |
·TRIzol法 | 第33页 |
·CTAB-LiCl法 | 第33-34页 |
·SDS/酚法 | 第34页 |
·改进TRIzol法 | 第34页 |
·mRNA的分离 | 第34-35页 |
·抑制性差减杂交 | 第35-41页 |
·ds cDNA的合成 | 第35-36页 |
·双链cDNA的Rsa Ⅰ酶切 | 第36页 |
·接头连接 | 第36-37页 |
·接头连接效率检测 | 第37-38页 |
·两次差减杂交 | 第38-39页 |
·两次PCR选择性扩增 | 第39-41页 |
·差减效率检测 | 第41页 |
·T/A克隆连接差减产物 | 第41-42页 |
·差减文库的生成、筛选和测序 | 第42-43页 |
·序列分析与功能注释 | 第43页 |
·实验结果与分析 | 第43-52页 |
·总RNA的提取 | 第43-45页 |
·不同提取方法对总RNA完整性的影响 | 第43-44页 |
·不同提取方法的总RNA纯度和得率 | 第44-45页 |
·mRNA的分离和双链cDNA合成 | 第45页 |
·酶切效率分析 | 第45-46页 |
·接头连接效率检测 | 第46-47页 |
·差减产物两次PCR扩增分析 | 第47页 |
·差减效率PCR扩增分析 | 第47-48页 |
·差减文库生成及文库质量检测 | 第48页 |
·菌液PCR筛选文库与测序 | 第48-49页 |
·序列分析与功能注释 | 第49-52页 |
·GO分类 | 第49-51页 |
·KEGG分析 | 第51-52页 |
·讨论 | 第52-56页 |
·Class Ⅲ过氧化物酶 | 第53页 |
·生长素Aux/IAA响应基因 | 第53-54页 |
·苯丙氨酸解氨酶 | 第54页 |
·果胶甲酯酶 | 第54-56页 |
第四章 百蕊草吸器发育差异表达基因的筛选及荧光定量PCR验证 | 第56-66页 |
·实验材料 | 第56-57页 |
·实验材料的培养 | 第56页 |
·主要试剂和仪器 | 第56-57页 |
·试验方法 | 第57-58页 |
·相关基因序列的引物设计 | 第57页 |
·总RNA的提取 | 第57页 |
·cDNA的反转录合成 | 第57-58页 |
·荧光定量PCR检测基因表达水平 | 第58页 |
·实验结果与分析 | 第58-63页 |
·百蕊草吸器发育不同阶段 | 第58-59页 |
·总RNA的质量 | 第59-60页 |
·定量PCR扩增曲线检测结果 | 第60页 |
·定量PCR溶解曲线检测结果 | 第60-61页 |
·定量PCR标准曲线检测结果 | 第61页 |
·不同诱导时间下相关基因的表达差异 | 第61-62页 |
·吸器不同发育阶段相关基因的表达差异 | 第62-63页 |
·讨论 | 第63-66页 |
全文结论 | 第66-68页 |
论文创新点 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-78页 |
附录 | 第78-82页 |
附表 | 第82-90页 |
攻读学位期间发表论文 | 第90-92页 |
致谢 | 第92页 |