| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-24页 |
| 第一节 纳米材料概述 | 第11-12页 |
| 第二节 纳米材料毒理学研究进展 | 第12-18页 |
| ·常见纳米材料的生物毒性 | 第12-14页 |
| ·影响纳米材料毒性的理化特征 | 第14-18页 |
| 第三节 纳米二氧化钛毒理学研究进展 | 第18-20页 |
| ·纳米二氧化钛的概述 | 第18-19页 |
| ·纳米二氧化钛毒性研究进展 | 第19-20页 |
| 第四节 巴斯德毕赤酵母与不饱和脂肪酸的概述 | 第20-22页 |
| 第五节 选题依据及技术路线 | 第22-24页 |
| ·选题依据 | 第22-23页 |
| ·技术路线 | 第23-24页 |
| 第二章 材料与方法 | 第24-47页 |
| 第一节 实验材料 | 第24-32页 |
| ·实验菌株 | 第24页 |
| ·质粒 | 第24页 |
| ·引物 | 第24-27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27-28页 |
| ·培养基 | 第28-29页 |
| ·主要溶液 | 第29-32页 |
| 第二节 实验方法 | 第32-47页 |
| ·纳米二氧化钛的合成与表征 | 第32页 |
| ·纳米二氧化钛粒子对毕赤酵母的生长抑制实验 | 第32-33页 |
| ·毕赤酵母细胞的死亡检测 | 第33页 |
| ·ROS检测 | 第33-34页 |
| ·几丁质含量检测 | 第34页 |
| ·液泡膜通透性检测 | 第34页 |
| ·线粒体形态观察 | 第34-35页 |
| ·脂滴的染色观察 | 第35页 |
| ·毕赤酵母脂肪酸分析 | 第35-36页 |
| ·毕赤酵母氯化锂转化法 | 第36-37页 |
| ·毕赤酵母基因组的提取 | 第37页 |
| ·PCR反应体系及程序 | 第37-38页 |
| ·酶切体系 | 第38页 |
| ·DNA连接体系 | 第38-39页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第39页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第39页 |
| ·大肠杆菌质粒的提取（碱裂解法） | 第39-40页 |
| ·毕赤酵母RNA的提取及纯化、cDNA的获得 | 第40-42页 |
| ·实时定量PCR | 第42-43页 |
| ·毕赤酵母总蛋白的提取 | 第43页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第43页 |
| ·Western blotting | 第43-44页 |
| ·Annexin V-FITC -PI双染检测细胞凋亡 | 第44-45页 |
| ·DAPI染色 | 第45页 |
| ·SOD，CAT活性及GSH含量测定 | 第45-46页 |
| ·毕赤酵母TEM样品准备 | 第46页 |
| ·纳米二氧化钛与蛋白相互作用的测定 | 第46-47页 |
| 第三章 结果与分析 | 第47-78页 |
| 第一节 纳米二氧化钛对不饱和脂肪酸合成的影响 | 第47-57页 |
| ·纳米二氧化钛的表征 | 第47-49页 |
| ·纳米二氧化钛对细胞的毒性 | 第49-51页 |
| ·纳米二氧化钛引起细胞壁损伤和ROS积累 | 第51-52页 |
| ·纳米二氧化钛增加胞内不饱和脂肪酸含量 | 第52-54页 |
| ·纳米二氧化钛促进胞内脂滴合成 | 第54-55页 |
| ·纳米二氧化钛上调不饱和脂肪酸合成相关基因 | 第55-57页 |
| 第二节 纳米二氧化钛对ROS清除系统的影响 | 第57-72页 |
| ·纳米二氧化钛的表征 | 第57-58页 |
| ·纳米二氧化钛引起细胞壁损伤和ROS积累 | 第58-60页 |
| ·纳米二氧化钛进入细胞并引起线粒体片段化 | 第60-61页 |
| ·纳米二氧化钛对毕赤酵母的毒性不依赖凋亡 | 第61-64页 |
| ·纳米二氧化钛对毕赤酵母的毒性不依赖自噬 | 第64-68页 |
| ·纳米二氧化钛损伤ROS清除系统 | 第68-69页 |
| ·纳米二氧化钛影响ROS清除系统基因的表达 | 第69-72页 |
| 第三节 不同晶型纳米二氧化钛的毒理对比 | 第72-78页 |
| ·不同晶型纳米二氧化钛的表征 | 第72-73页 |
| ·不同晶型纳米二氧化钛的毒性差异 | 第73-74页 |
| ·不同晶型纳米二氧化钛的毒性机制差异 | 第74-76页 |
| ·不同晶型纳米二氧化钛与细胞的相互作用 | 第76-78页 |
| 第四章 讨论 | 第78-85页 |
| 第一节 纳米二氧化钛毒性与UFAs的关系 | 第78-81页 |
| 第二节 纳米二氧化钛损伤ROS清除系统 | 第81-83页 |
| ·纳米二氧化钛的毒性与凋亡无关 | 第81-82页 |
| ·纳米二氧化钛的毒性与自噬无关 | 第82页 |
| ·纳米二氧化钛的毒性与GSH相关 | 第82-83页 |
| 第三节 不同晶型纳米二氧化钛毒性的差异 | 第83-85页 |
| 第五章 结论与展望 | 第85-87页 |
| 第一节 结论 | 第85页 |
| 第二节 论文的主要特色与创新点 | 第85-86页 |
| 第三节 展望 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-97页 |
| 致谢 | 第97-99页 |
| 个人简历及在学期间发表的学术论文 | 第99页 |