| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-19页 |
| 1 FOXL2 基因结构 | 第9-10页 |
| 2 FOXL2 基因在动物体内表达与分布 | 第10-12页 |
| ·FOXL2 基因在脊椎动物体内的表达与分布 | 第10-11页 |
| ·FOXL2 基因在无脊椎动物体内的表达与分布 | 第11-12页 |
| 3 FOXL2 基因的克隆与表达 | 第12-13页 |
| ·FOXL2 基因在原核细胞中的表达 | 第12页 |
| ·FOXL2 基因在真核细胞中的表达 | 第12-13页 |
| 4 FOXL2 基因的功能 | 第13-14页 |
| ·FOXL2 通过与芳香化酶和SOX9基因作用这两条途径来发挥对脊椎动物的性别决定作用 | 第13页 |
| ·FOXL2 主要在动物的垂体和卵巢颗粒细胞中表达 | 第13-14页 |
| ·卵巢颗粒细胞瘤 | 第14页 |
| ·SCST | 第14页 |
| 5 蛋白表达优缺点分析 | 第14-16页 |
| 6 研究趋势/展望 | 第16-19页 |
| 引言 | 第19-21页 |
| 第二章 来航鸡 FOXL2 基因重组克隆质粒及表达质粒的构建 | 第21-53页 |
| 1 材料 | 第21-25页 |
| ·实验动物 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·质粒 | 第22页 |
| ·工程菌 | 第22页 |
| ·试剂盒 | 第22页 |
| ·试剂与培养基 | 第22-25页 |
| 2 方法 | 第25-39页 |
| ·来航鸡翅静脉血DNA的提取 | 第25页 |
| ·来航鸡 FOXL2 基因的 PCR 扩增、克隆和鉴定 | 第25-31页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第31-35页 |
| ·携带目的基因的重组酵母的构建 | 第35-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-50页 |
| ·纯系来航鸡血DNA的提取 | 第39-40页 |
| ·基因的PCR扩增 | 第40页 |
| ·重组质粒的转化 | 第40页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定和酶切鉴定 | 第40-42页 |
| ·来航鸡FOXL2基因与表达载体PPICZΑA的连接 | 第42页 |
| ·重组表达质粒 PPICZΑA–FOXL2 的 PCR 鉴定 | 第42-44页 |
| ·重组质粒 PPICZΑA–FOXL2 的单酶切鉴定 | 第44-45页 |
| ·表达载体 PPICZΑA 双酶切鉴定 | 第45-46页 |
| ·重组质粒 PPICZΑA–FOXL2 的双酶切鉴定 | 第46-47页 |
| ·重组质粒 PPICZΑA–FOXL2 的测序鉴定 | 第47页 |
| ·高拷贝整合转化子的筛选与鉴定 | 第47-48页 |
| ·重组酵母菌菌液 PCR 鉴定 | 第48-49页 |
| ·重组酵母菌质粒 PCR 鉴定 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| ·引物的设计 | 第50-52页 |
| 5 小结 | 第52-53页 |
| 第三章 重组质粒的真核表达、鉴定及目的蛋白的纯化 | 第53-69页 |
| 1 材料 | 第53-57页 |
| ·主要仪器 | 第53页 |
| ·抗体 | 第53-54页 |
| ·SDS-PAGE 与 WESTEN-BLOTTING 用试剂 | 第54-56页 |
| ·蛋白纯化溶液 | 第56-57页 |
| 2 方法 | 第57-59页 |
| ·高抗性整合子的初步诱导表达 | 第57页 |
| ·表达产物的 SDS-PAGE 分析 | 第57页 |
| ·表达产物的免疫印迹分析 | 第57-58页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第58-59页 |
| 3 结果与分析 | 第59-62页 |
| ·表达产物的 SDS-PAGE 分析 | 第59-60页 |
| ·表达产物的 WESTERN-BLOT 分析 | 第60-61页 |
| ·PPICZΑA–FOXL2 重组目的蛋白的纯化 | 第61页 |
| ·来航鸡 FOXL2 基因重组蛋白纯化后浓度测量结果 | 第61-62页 |
| 4 讨论 | 第62-68页 |
| ·酵母表达系统 | 第62-64页 |
| ·影响外源基因在毕赤酵母中的表达的几个因素 | 第64-67页 |
| ·重组目的蛋白的纯化 | 第67-68页 |
| 5 小结 | 第68-69页 |
| 全文结论 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-75页 |
| 附图 A 本论文常用英文缩写词 | 第75-77页 |
| 附图 B 氨基酸中英文对照及缩写 | 第77-78页 |
| 附图 C 表达载体 PPICZΑA 的多克隆位点图 | 第78-79页 |
| 附图 D 表达载体 PPICZΑA 的物理图谱 | 第79-80页 |
| 附图 E PMD18-T 质粒图谱 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-83页 |
| 攻读硕士期间发表的论文和参与专利 | 第83页 |
