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柑橘黄龙病PCR检测引物比较及其外膜蛋白抗体的研制

中文摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第1章 文献综述第9-15页
   ·黄龙病的发现和危害第9-10页
     ·柑橘黄龙病的发现第9页
     ·柑橘黄龙病的危害第9-10页
   ·黄龙病的症状、病原、病原寄主和传播第10-12页
     ·柑橘黄龙病的症状第10页
     ·柑橘黄龙病的病原第10-11页
     ·柑橘黄龙病菌的寄主第11页
     ·柑橘黄龙病的传播第11-12页
   ·柑橘黄龙病的诊断第12-14页
     ·柑橘黄龙病的田间诊断第12页
     ·柑橘黄龙病的实验室诊断第12-14页
   ·柑橘黄龙病的防控第14-15页
第2章 引言第15-16页
第3章 柑橘黄龙病的普通PCR检测方法的比较第16-30页
   ·材料与方法第16-17页
     ·植物材料第16页
     ·主要试剂第16页
     ·常用的贮备液和缓冲液第16-17页
     ·主要实验仪器第17页
   ·实验方法第17-24页
     ·总核酸的提取第17-19页
     ·柑橘黄龙病普通PCR检测体系第19-20页
     ·荧光定量PCR检测体系第20-24页
     ·各普通PCR检测引物灵敏度比较第24页
     ·各普通PCR检测引物特异性比较第24页
   ·结果与分析第24-29页
     ·重组质粒pT-16S的构建第24-26页
     ·阳性样品中柑橘黄龙病菌核酸的含量第26-27页
     ·各引物常规PCR检测的灵敏性第27-28页
     ·各引物常规PCR检测的特异性第28-29页
   ·讨论第29-30页
第4章 外膜蛋白omp抗体的研制第30-51页
   ·材料与方法第30-31页
     ·植物材料第30页
     ·主要试剂第30-31页
     ·本实验使用的主要缓冲液第31页
   ·试验方法第31-42页
     ·总核酸的提取第31-32页
     ·目的片段的制备第32-35页
     ·表达载体的线性化第35页
     ·DH5ɑ 感受态细胞的制备第35页
     ·克隆与转化第35-36页
     ·菌液PCR鉴定第36页
     ·融合蛋白的诱导表达第36-39页
     ·融合蛋白纯化第39-40页
     ·融合蛋白制备抗体第40-41页
     ·抗体检测柑橘黄龙病效果测试第41-42页
   ·实验结果第42-50页
     ·omps PCR产物和线性化pGEX6P1载体纯化第42页
     ·菌液PCR鉴定第42-43页
     ·小试培养选择最佳的诱导条件第43-44页
     ·超声波粉粹菌体第44页
     ·融合蛋白Western Blot分析第44-45页
     ·融合蛋白的纯化第45-46页
     ·蛋白浓度测定第46页
     ·三免后抗血清效价检测结果第46-47页
     ·免后抗血清效价检测结果第47-48页
     ·终放后抗血清效价检测结果第48页
     ·终放后纯化抗体效价检测结果第48-49页
     ·抗体检测柑橘黄龙病第49-50页
   ·讨论第50-51页
第5章 主要结论、创新点及研究展望第51-52页
   ·主要结论第51页
     ·筛选出灵敏度高、特异性强的常规PCR检测HLB引物第51页
     ·制备出HLB外膜蛋白抗体第51页
   ·创新点第51页
   ·研究展望第51-52页
附录 中英文对照缩略词第52-53页
参考文献第53-59页
致谢第59-60页
攻读硕士学位期间发表的文章第60页

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