中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第1章 文献综述 | 第9-15页 |
·黄龙病的发现和危害 | 第9-10页 |
·柑橘黄龙病的发现 | 第9页 |
·柑橘黄龙病的危害 | 第9-10页 |
·黄龙病的症状、病原、病原寄主和传播 | 第10-12页 |
·柑橘黄龙病的症状 | 第10页 |
·柑橘黄龙病的病原 | 第10-11页 |
·柑橘黄龙病菌的寄主 | 第11页 |
·柑橘黄龙病的传播 | 第11-12页 |
·柑橘黄龙病的诊断 | 第12-14页 |
·柑橘黄龙病的田间诊断 | 第12页 |
·柑橘黄龙病的实验室诊断 | 第12-14页 |
·柑橘黄龙病的防控 | 第14-15页 |
第2章 引言 | 第15-16页 |
第3章 柑橘黄龙病的普通PCR检测方法的比较 | 第16-30页 |
·材料与方法 | 第16-17页 |
·植物材料 | 第16页 |
·主要试剂 | 第16页 |
·常用的贮备液和缓冲液 | 第16-17页 |
·主要实验仪器 | 第17页 |
·实验方法 | 第17-24页 |
·总核酸的提取 | 第17-19页 |
·柑橘黄龙病普通PCR检测体系 | 第19-20页 |
·荧光定量PCR检测体系 | 第20-24页 |
·各普通PCR检测引物灵敏度比较 | 第24页 |
·各普通PCR检测引物特异性比较 | 第24页 |
·结果与分析 | 第24-29页 |
·重组质粒pT-16S的构建 | 第24-26页 |
·阳性样品中柑橘黄龙病菌核酸的含量 | 第26-27页 |
·各引物常规PCR检测的灵敏性 | 第27-28页 |
·各引物常规PCR检测的特异性 | 第28-29页 |
·讨论 | 第29-30页 |
第4章 外膜蛋白omp抗体的研制 | 第30-51页 |
·材料与方法 | 第30-31页 |
·植物材料 | 第30页 |
·主要试剂 | 第30-31页 |
·本实验使用的主要缓冲液 | 第31页 |
·试验方法 | 第31-42页 |
·总核酸的提取 | 第31-32页 |
·目的片段的制备 | 第32-35页 |
·表达载体的线性化 | 第35页 |
·DH5ɑ 感受态细胞的制备 | 第35页 |
·克隆与转化 | 第35-36页 |
·菌液PCR鉴定 | 第36页 |
·融合蛋白的诱导表达 | 第36-39页 |
·融合蛋白纯化 | 第39-40页 |
·融合蛋白制备抗体 | 第40-41页 |
·抗体检测柑橘黄龙病效果测试 | 第41-42页 |
·实验结果 | 第42-50页 |
·omps PCR产物和线性化pGEX6P1载体纯化 | 第42页 |
·菌液PCR鉴定 | 第42-43页 |
·小试培养选择最佳的诱导条件 | 第43-44页 |
·超声波粉粹菌体 | 第44页 |
·融合蛋白Western Blot分析 | 第44-45页 |
·融合蛋白的纯化 | 第45-46页 |
·蛋白浓度测定 | 第46页 |
·三免后抗血清效价检测结果 | 第46-47页 |
·免后抗血清效价检测结果 | 第47-48页 |
·终放后抗血清效价检测结果 | 第48页 |
·终放后纯化抗体效价检测结果 | 第48-49页 |
·抗体检测柑橘黄龙病 | 第49-50页 |
·讨论 | 第50-51页 |
第5章 主要结论、创新点及研究展望 | 第51-52页 |
·主要结论 | 第51页 |
·筛选出灵敏度高、特异性强的常规PCR检测HLB引物 | 第51页 |
·制备出HLB外膜蛋白抗体 | 第51页 |
·创新点 | 第51页 |
·研究展望 | 第51-52页 |
附录 中英文对照缩略词 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
攻读硕士学位期间发表的文章 | 第60页 |